Занятие 1. Эпителии (покровные и кишечные)

Цель занятия: изучить строение покровных и кишечных эпителиев в сравнительном аспекте, научиться выявлять эпителиальную ткань на препаратах.

1. Однослойный ресничный эпителий турбеллярий (окраска железным гематоксилином)

При малом увеличении микроскопа видно, что эпителиальные клетки цилиндрической формы расположены в один слой более или менее равномерной высоты, который утолщается на краях тела. Округлые или овальные ядра лежат приблизительно в середине клетки.

При большом увеличении в протоплазме клеток обычно заметны особые палочковидные образования – рабдиты. Каждая палочка окрашивается равномерно гематоксилином, слегка изогнута и обычно ориентирована перпендикулярно поверхности эпителия. Число их в клетках различно; на спинной стороне тела их больше, чем на брюшной, на боковых частях тела они более длинные. Плоской проксимальной поверхностью эпителиальные клетки прилегают вплотную к базальной мембране. Между некоторыми клетками имеются промежутки – места выхода наружу протоков слизистых и белковых желез, лежащих в паренхиме. На апикальной поверхности клетки несут многочисленные реснички.

2. Кутикула нематод (окраска гематоксилин-эозином)

Кутикула нематод – неклеточное защитное образование, малопроницаемое для воды и других веществ, препятствующее механическим повреждениям покровов. Кутикула является продуктом синтеза эпителиальных клеток, которые при этом разрушаются. В состав кутикулы входят, в основном, белки, в их числе кератины и коллагены.

Препарат представляет собой поперечный срез тела аскариды. При малом увеличении следует найти кутикулу, одевающую тело снаружи. При большом увеличении в световом микроскопе можно различить три составляющие ее слоя. Внешний слой носит название коркового и разделяется, в свою очередь, на два слоя – наружный (прозрачный) и внутренний (более темный, исчерченный). Далее следует мощный светлоокрашенный, имеющий тонкозернистую структуру, гомогенный слой. Самый внутренний слой – волокнистый, волокна которого расположены преимущественно параллельно поверхности кутикулы; подразделяется на несколько слоев. Под многослойной кутикулой находится субкутикула, или гиподерма, имеющая характер синцития.

16

Рис. 1. Кутикула аскариды

1 – внешний корковый слой; 2 – внутренний корковый слой; 3 – гомогенный слой; 4 – внешний волокнистый слой; 5 – средний волокнистый слой; 6 – внутренний волокнистый слой; 7 – внутренний слой; 8 – пограничная мембрана

3. Многослойный плоский эпителий кожи лягушки (окрашивание гематоксилин-эозином)

Относится к частично ороговевающим эпителиям, так как процесс кератинизации не заходит еще столь далеко, как у наземных позвоночных. Это проявляется в наличии лишь одного слоя клеток, заполненных гранулами кератина, и сохраняющих часть органоидов. Клетки являются живыми.

При большом увеличении рассмотреть и зарисовать тонкое строение эпителия, соблюдая правильное соотношение слоев. Непосредственно к базальной мембране примыкает один слой высоких призматических клеток с большим овальным ядром – базальный слой. За ним следуют 3–6 рядов клеток, не имеющих правильного расположения и постепенно уплощающихся; соответственно меняется и форма ядер. Самый верхний слой, ороговевающий, представлен одним рядом клеток с плоскими ядрами, плотно прилегающими друг к другу; границы между клетками не видны.

17

Рис. 2. Многослойный эпителий кожи лягушки

1 – частично ороговевающий слой; 2 – ростковый слой;

3 – пигментные клетки; 4 – соединительная ткань

4. Многослойный плоский ороговевающий эпителий кожи пальца человека (окраска гематоксилин-эозином)

При малом увеличении найти участок эпителия, срезанного строго вертикально. Базальная мембрана, расположенная на границе эпителия и сосочкового слоя соединительной ткани, неровная, выражена слабо. Показать на рисунке соотношение слоев эпителия.

При большом увеличении рассмотреть и зарисовать тонкое строение эпителия. На базальной мембране в один слой расположены высокие призматические клетки с овальными ядрами, называемые базальными. В базальном слое располагаются также пигментные клетки (меланоциты). Над базальным слоем в 8–10 рядов лежат клетки шиповатого слоя полигональной формы, соединенные посредством десмосом, имеющих после фиксации вид шипов на поверхности клетки. Ядра шиповатых эпителиоцитов круглой формы. Клетки базального и шиповатого слоев являются камбиальными.

В цитоплазме клеток шиповатого слоя усиливается синтез кератина и образование из него тонофиламент, которые соединяются в пучки – тонофибриллы. Кроме того, формируются кератиносомы, содержащие липиды и гидролитические ферменты.

Выше расположен зернистый слой, состоящий из трех рядов уплощенных клеток с гранулами в цитоплазме. Гранулы не ограничены мембраной, состоят из кератогиалина. В клетках синтезируются белки филаггрин, инволюкрин, кератолинин. Филаггрин образует аморфный матрикс между тонофиламентами,

18

к которому присоединяются продукты распада ядер и органелл. В результате и образуется кератогиалин. Инволюкрин и кератолинин образуют слой под плазмалеммой, защищая ее от действия гидролитических ферментов.

Следующий – блестящий слой. Образован плоскими кератиноцитами, или корнеоцитами, в которых полностью разрушены ядро и органоиды. Границы клеток здесь не видны. Кератогиалиновые гранулы сливаются в единую светопреломляющую массу из кератиновых фибрилл и аморфного матрикса, включающего филаггрин. Усиливается слой кератолинина под плазмалеммой. Между клетками увеличивается количество цементирующего вещества, богатого липидами.

Самый широкий поверхностный слой носит название рогового, содержит до 100 рядов уплощенных роговых чешуек (закончивших дифференцировку кератиноцитов), заполненных гранулами кератина.

5. Однослойный эпителий тонкого кишечника млекопитающих (окраска: железный гематоксилин по Гейденгайну и смесь Маллори)

При малом увеличении микроскопа необходимо найти ворсинки – складки внутренней поверхности слизистой оболочки кишечника. Они покрыты однослойным призматическим эпителием. В области основания соседних ворсинок покрывающий их эпителий образует трубковидные впячивания вглубь слизистой оболочки – крипты.

При большом увеличении микроскопа следует рассмотреть строение клеток эпителия. Основная их масса представлена призматическими всасывающими клетками – энтероцитами. Для них характерно наличие на апикальной поверхности многочисленных выростов плазмалеммы – микроворсинок. Под световым микроскопом микроворсинки имеют вид вертикальной исчерченности, именуемой "щеточной каемкой". В плазмалемме и гликокаликсе исчерченной каемки обнаружено высокое содержание ферментов, участвующих в расщеплении и транспорте питательных веществ: фосфатазы, нуклеозиддифосфатазы, L- и D-гликозидазы, аминопептидазы. Эти ферменты обеспечивают происходящие в области щеточной каемки процессы пристеночного пищеварения. Между апикальными частями соседних клеток видны уплотненные полоски, представляющие собой замыкающие пластинки и плотные контакты. Ядра эпителиальных клеток овальные и расположены ближе к базальной части клетки. В клетках хорошо развиты АГ, шероховатая и гладкая ЭПС, рибосомы и митохондрии.

Помимо всасывающих клеток, местами встречаются железистые клетки бокаловидной формы, вырабатывающие слизь. Описание их приведено ниже. Эпителиальная выстилка кишечных крипт содержит стволовые клетки, клеткипредшественники энтероцитов, бокаловидных экзокриноцитов, эндокриноцитов, и клетки Панета с ацидофильными гранулами в цитоплазме, вырабатывающие дегидрогеназы, дипептидазы и лизоцим.

19