2 курс / Гистология / ГИСТОФИЗИОЛОГИЯ_СОСУДИСТОЙ_ОБОЛОЧКИ_ГЛАЗА_ЧЕЛОВЕКА_В_ПРЕНАТАЛЬНОМ

ХОРИОИДАЛЬНЫЙ АНГИОГЕНЕЗ В ПРЕНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ ЧЕЛОВЕКА

со

пэ

б

Рис. 4. Дососудистый период. Формирование веретеновидных клеток мембраны Бруха в цилиарном теле и радужке. Иммунная гистохимия на выявление белка S 100, метаноловый раствор Victoriablue, ув. 400: а – 8-я неделя развития, б – 9-я неделя развития.

Условные обозначения: пэ – пигментный эпителий; фигурная скобка – мембрана Бруха; со – зачаток сосудистой оболочки; а – наружный слой (веретеновидные клетки); б – средний слой (пигментные клетки); в – внутренний слой (волокнистые структуры); 1 – беспигментный эпителий; 2 – пигментный эпителий; 3 – базальная мембрана пигментного эпителия; 4 – веретеновидные клетки мембраны Бруха; 5 – плоские клетки мембраны Бруха; 6 – пигментные клетки мембраны Бруха; 7 – волокнистый слой мембраны Бруха

61

ГЛАВА II

нентам мембраны Бруха мы относим: веретеновидные клетки, плоские клетки, пигментные клетки и волокнистый слой. Даже в этом структурном образовании клетки не имеют плотных контактов друг с другом (рис. 4, а). В дальнейшем, на 9-й неделе, веретеновидные клетки начинают уплощаться между базальной мембраной пигментного эпителия и слоем пигментных клеток, а также немного погружаться (рис. 4, б). Все слои мембраны Бруха начинают уплощаться и сливаться. Клеточные компоненты мембраны Бруха начинают располагаться в три слоя: наружный слой представлен веретеновидными клетками (плоские и веретеновидные клетки сливаются в один слой), средний слой – пигментными клетками, внутренний слой имеет не клеточную, а, по-видимому, волокнистую структуру. Между волокнистым слоем мембраны Бруха и сосудистой оболочкой сохраняется щель. После слияния в один слой веретеновидные клетки приобретают светло-вы- тянутую или округлую форму ядра. Средний пигментный слой мембраны Бруха также имеет клеточное строение с наличием ядер. Выше веретеновидных клеток располагается беспигментный и пигментный эпителий с базальной мембраной. Отсутствуют стромальные меланоциты. Следует обратить внимание, что при формировании мембраны Бруха всегда идентифицируются позитивные по белку S 100 пигментные клетки (рис. 4), имеющие нейральное происхождение, как, по-ви- димому, и веретеновидные клетки. В ходе дальнейшего развития этот клеточный элемент заменяется бесструктурной пластинкой. В апикальной части пигментного эпителия увеличивается количество меланосом, а в беспигментном уменьшается.

На 10-й неделе слои мембраны Бруха и сосудистой оболочки сливаются в одно образование (исчезает щель между волокнистым слоем мембраны Бруха и сосудистой оболочкой). Пигментный и беспигментный эпителий весь заполняется синтезируемым пигментом. Начинает исчезать мембрана пигментного эпителия. Теряется слоистость мембраны Бруха, сохраняется только слой из веретеновидных клеток. Пигментные клетки мембраны Бруха начинают мигрировать вглубь стромы сосудистой оболочки, и из них, возможно, формируются стромальные меланоциты. Плоские клетки мембраны Бруха, возможно, тоже мигрируют вглубь стромы сосудистой оболочки и/или подвергаются апоптозу.

Веретеновидные клетки немного погружаются вглубь сосудистой оболочки, и из них формируются светлые и темные клетки по окрашиванию ядра. Таким образом, под пигментным эпителием и его базальной мембраной идентифицируются два типа клеток: светлые и тёмные.

62

ХОРИОИДАЛЬНЫЙ АНГИОГЕНЕЗ В ПРЕНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ ЧЕЛОВЕКА

пэ

кмб

а

пэ

кмб

ск

тк

б

Рис. 5 (начало)

63

ГЛАВА II

бпэ

пэ

см

кмб

в

см

пэ

хк

г

Рис. 5 (окончание)

64

ХОРИОИДАЛЬНЫЙ АНГИОГЕНЕЗ В ПРЕНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ ЧЕЛОВЕКА

Светлые клетки характеризуются крупным гипохромным ядром и высокими ядерно-цитоплазматическими отношениями, в то время как темные клетки отличаются базофильным ядром и низкими ядерно-ци- топлазматическими отношениями. Светлые клетки идентифицируются на более ранних этапах развития и по характеру окрашивания идентичны глиальным клеткам, для тех и других клеток сойственна хромофобность цитоплазмы. Эти клетки имеют вытянутую веретеновидную форму и контактируют межу собой. Светлые клетки немного крупнее, имеют более крупное и размытое ядро. Темные клетки проявляют более базофильные свойства. Возможно, что светлые клетки – это клетки, вступившие в апоптоз. Начинает формироваться пигментный эпителий сетчатки (рис. 5, а). На 12-й неделе клетки мембраны Бруха приближаются к пигментному эпителию сетчатки, в котором увеличивается количество гранул. В пигментном эпителии сетчатки красяшее вещество расположено на апикальной поверхности, а с формированием беспигментного эпителия перемещается в базальную часть клеток (рис. 5, б). На 14-й неделе светлые и темные клетки мембраны Бруха также располагаются под пигментным эпителием. Светлые клетки имеют признаки апоптоза с исчезновением ядра. Погибая, клетки мембраны Бруха формируют будущую стекловидную пластинку из эластических и коллагеновых волокон. Беспигментный эпителий формируется в высокий призматический. Происходит синтез, а также миграция пигмента между пигментным эпителием и стромальными меланоцитами. Пигмент начинает проникать через мембрану Бруха (рис. 5, в).

При окрашивании по методу Victoriablue нами отмечено, что эластический каркас стекловидной пластинки (мембраны Бруха) в период накопления меланина пигментными эпителиоцитами сетчатки имеет толщину до 25 мкм (рис. 5, г). К 18-й неделе развития начинает формироваться эластическая стекловидная пластинка из клеток мембраны Бруха. Сетчатка также имеет два ядерных слоя, формируется меланогенез стромы кровеносного сосуда.

Рис. 5. Клетки мембраны Бруха. Иммунная гистохимия на выявление белка S 100, метаноловый раствор Victoriablue, ув. 400: а – 10-я неделя развития; б – 12-я неделя развития; в – 14-я неделя развития; г – 18-я неделя развития.

Условные обозначения: с – фоторецепторный слой сетчатки; со – сосудистая оболочка; хк – хориоидальный кровеносный сосуд; пэ – пигментный эпителий; бпэ – беспигментный эпителий; мб – мембрана Бруха; кмб – клетки мембраны Бруха; стрелка – часть клеток мембраны Бруха мигрирует вглубь сосудистой оболочки; ск – светлые клетки; тк – темные клетки; см – стромальные меланоциты

65

ГЛАВА II

2.3. ФОРМИРОВАНИЕ ПИГМЕНТНОГО ЭПИТЕЛИЯ

Согласно полученным результатам базальная мембрана будущего пигментного эпителия сетчатки идентифицируется с 5-й недели эмбриогенеза.

К 9-й неделе на базальной мембране начинает появляться пигментный эпителий, который отделяется от нейральной части сетчатки

иприкрепляется к формирующейся сосудистой оболочке. Под базальной мембраной пигментного эпителия располагается будущая стекловидная пластинка, которая представлена веретеновидными клетками с их производными. Строма сосудистой оболочки еще не пигментирована, а гранулы с пигментом в пигментном эпителии еще расположены на апикальной поверхности клеток (рис. 6, а).

С14-й недели идентифицируются радужка, цилиарное тело в виде петель из пигментных клеток и собственно сосудистая оболочка заднего полюса глаза, в которой появляются многочисленные клетки с выраженной базофилией, придающие хориоидее более яркий цвет при окрашивании гематоксилин-эозином (рис. 6, б, в). Вся цитоплазма пигментного эпителия заполняется меланосомами с пигментом, т.е. начинается пигментообразование. Строма сосудистой оболочки еще не пигментирована.

На 14–16-й неделях происходит накопление пигмента пигментными эпителиоцитами. Базальная часть пигментного эпителия тоже пигментирована. Пигментный эпителий контактирует с сосудистой оболочкой

исетчаткой. Причём пигментный эпителий имеет более плотные связи

ссосудистой оболочкой, чем с сетчаткой. И поэтому он легко отслаивается от сетчатки. А также формируются слои сетчатки, и пока она однослойная (рис. 6, г).

2.4. РАСЩЕПЛЕНИЕ СТРУКТУР СОСУДИСТОЙ ОБОЛОЧКИ

В плодный период, после 10-й недели, реализуются обособление сосудистой оболочки и её структуризация, формирование особенностей на переднем, заднем полюсе и в зоне прилегания к хрусталику. В этот период происходит постепенное расщепление общего мезенхимного зачатка (средней оболочки) на сосудистую и фиброзную оболочку (рис. 7, а). Расщепление начинается с задней стенки среднего слоя. Разделение оболочек идет почти одновременно с ангиогенезом, а затем и с меланогенезом. Хориоидея (сосудистая оболочка) имеет более яркую окраску, чем фиброзная (склеральная или наружная) оболочка. В участках разделения двух оболочек с образованием разрежения формируются кровеносные сосуды. Эндотелиальные клетки формируют клубки. Строма

66

ХОРИОИДАЛЬНЫЙ АНГИОГЕНЕЗ В ПРЕНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ ЧЕЛОВЕКА

пэ

со

а

цт

пэ

б

Рис. 6 (начало)

67

ГЛАВА II

пэ

с

пэ

со

г

Рис. 6 (окончание)

68

ХОРИОИДАЛЬНЫЙ АНГИОГЕНЕЗ В ПРЕНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ ЧЕЛОВЕКА

средней оболочки представлена фибробластами, образующими вид волокон. В сетчатке происходит формирование слоев, из одноядерной становится двуядерной. Происходит формирование пигментного эпителия, расправление сетчатки, но она по-прежнему не имеет плотных контактов со средней оболочкой.

На 12–14-й неделях в некоторых участках сосудистая оболочка попрежнему еще плотно соединена с фиброзной, несмотря на усложнение ангиогенеза в зоне расщепления. Из сосудистых клубков формируются кровяные островки в участках расщепления двух оболочек. Строма двух оболочек представлена ячейками из фибробластов (рис. 7, б, в).

На 16-й неделе развития сосудистая и фиброзная оболочки все ещё имеют участки неполного расщепления. Развивается стромальный меланогенез, который начинается с сосудистой оболочки и далее распространяется на склеру (рис. 7, г).

2.5. АНГИОГЕНЕЗ СОСУДИСТОЙ ОБОЛОЧКИ

На 10-й неделе пренатального развития сначала в собственно сосудистой оболочке (хориоидее), а затем последовательно в цилиарном теле

ив радужке начинает формироваться хориоидальная сосудистая система.

Внаших исследованиях во всех растущих капиллярах почки роста содержали макрофаги фенотипов CD163, которые также идентифицировались и вокруг более крупных сосудов. Анализ исследуемого материала с помощью иммуногистохимических методов показал, что иммунофагоциты представлены фенотипами CD163 (рис. 8, в, г, д).

Впросвете формирующихся кровеносных сосудов, также обнаруживались клетки моноцитарно-макрофагального ряда (рис. 8, а, б). Повидимому, макрофаги участвуют в утрате внутренними клетками ангиогенного островка контактов на периферии. Утрата контактов, возможно, происходит путем фагоцитоза апоптотических участков островка. Таким образом, макрофаги обнаруживались в просвете и стенке кровеносных сосудов. Часть клеток моноцитарно-макрофагального ряда представлена

Рис. 6. Формирование пигментного эпителия: а – цилиарное тело, 9-я неделя развития. Иммунная гистохимия на выявление белка S100, метаноловый раствор Victoriablue, ув. 400; б – цилиарное тело, 14-я неделя развития. Окраска гематоксилин-эозином, ув. 200; в – цилиарное тело, 16-я неделя развития. Окраска гематоксилин-эозином, ув. 200; г – сетчатка, 16-я неделя развития. Окраска гематоксилин-эозином, ув. 400.

Условные обозначения: фигурная скобка – формирование слоёв мембраны Бруха; пэ – пигментный эпителий; с – сетчатка; со – сосудистая оболочка; цт – цилиарное тело

69

ГЛАВА II

ф

кр

со

а

с

с

кр

б

Рис. 7 (начало)

70