2 курс / Биохимия / Тканевая биохимия

Схема реакции:

O

Ход работы: к 5 каплям исследуемой мочи добавляют 1 каплю раствора гидроксида натрия и 3 капли раствора Люголя. При наличии ацетона в моче появляется муть с последующим желтоватым осадком иодоформа на дне пробирки с характерным запахом.

3. Определение белка.

Принцип метода основан на коагуляции белка в моче в присутствии азотной (или 20 % раствора сульфосалициловой) кислоты.

Ход работы: к 5 каплям мочи добавляют 1–2 капли азотной (или сульфосалициловой) кислоты. При наличии белка в моче появляется мутность.

Обнаружение патологических компонентов мочи

Примечание. При наличии в исследуемой моче глюкозы и белка определяют их количественное содержание.

Количественное определение белка в моче колориметрическим методом с пирогаллоловым красным

Принцип метода: при взаимодействии белка с пирогаллоловым красным и молибдатом натрия образуется окрашенный комплекс, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации белка в пробе.

Реактивы: рабочий реагент – раствор пирогаллолового красного в сукцинатном буфере, калибровочный раствор белка с концентрацией

0,50 г/л.

61

Ход работы:

Пробы перемешать, выдержать 10 мин при комнатной температуре (18–25° С). Измерить оптическую плотность опытной (Dоп) и калибровочной пробы (Dк) против контрольной пробы при λ=598 (578–610) нм. Окраска стабильна в течение 1 ч.

Расчет: концентрацию белка в моче (С, г/л) рассчитать по формуле:

С= Dоп /Dк×0,50,

Нормальные величины: до 0,094 г/л (0,141 г/сут).

Вывод: ___________________________________________________.

Количественное определение глюкозы в моче глюкозооксидазным методом

Принцип метода. При окислении D-глюкозы кислородом воздуха под действием глюкозооксидазы образуется эквимолярное количество перекиси водорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хромогенные субстраты (смесь фенола и 4-аминоантипирина – 4ААП) с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию глюкозы.

глюкозооксидаза

Глюкоза О2 Н2О глюконолактон Н2О2.

пероксидаза

Н2О2 фенол 4ААП окрашенное соединение 4Н2О.

Ход работы: в две пробирки вносят по 1 мл рабочего раствора и по 0,5 мл фосфатного буфера. В первую пробирку добавляют 0,02 мл мочи, во вторую – 0,02 мл калибратора (калибровочный, стандартный раствор глюкозы, 10 ммоль/л). Пробы перемешивают, выдерживают 15 мин при температуре 37° С в термостате и измеряют оптическую плотность опытной (Dоп) и калибровочной (Dк) проб против рабочего реагента при длине волны 500–546 нм.

62

Расчет:

Содержание глюкозы в суточной моче (ммоль/сут) определяют, умножая полученный результат на объем собранной за сутки мочи.

Вывод: __________________________________________________.

В настоящее время в биохимических лабораториях используется унифицированный экспресс-метод анализа мочи на содержание глюкозы с помощью реактивной бумаги на глюкозу «Глюкотест» или с использованием комбинированных тест-полосок на рН, белок, глюкозу, кетоновые тела и кровь. Тест-полоски опускают в сосуд с мочой на 1 с и сравнивают окраску по шкале.

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

ВЫБЕРИТЕ ПРАВИЛЬНЫЙ ОТВЕТ

1.ГЛЮКОЗУРИЯ ПОЯВЛЯЕТСЯ ПРИ НАРУШЕНИИ

а) концентрирования б) разведения в) реабсорбции г) секреции д) фильтрации

2.КЕТОНУРИЯ НАБЛЮДАЕТСЯ ПРИ

а) миопатии б) несахарном диабете

в) патологии печени г) патологии почек д) сахарном диабете

3. ПРИЧИНА ГЕМАТУРИИ

а) воспалительный процесс в селезенке б) миопатия в) патология предстательной железы

г) сахарный диабет д) травмы мочевыводящих путей

4.ПРИЧИНА ГЕМОГЛОБИНУРИИ

а) алкаптонурия

63

б) внутрисосудистый гемолиз в) миопатия г) сахарный диабет

д) патология печени

5.ПРИЧИНА ПОЯВЛЕНИЯ ПРЯМОГО БИЛИРУБИНА В МОЧЕ

а) гемолиз эритроцитов б) закупорка желчного протока в) миопатия г) патология почек

д) патология селезенки

6.ПРИЧИНА КРЕАТИНУРИИ

а) алкаптонурия б) гемолиз эритроцитов в) миопатия г) патология печени

д) сахарный диабет

7.ПРИЧИНА СНИЖЕНИЯ СОЛЕЙ АММОНИЯ В МОЧЕ

а) гемолиз эритроцитов б) избыточное белковое питание в) патология печени г) патология почек д) сахарный диабет

8.ПОЛИУРИЯ НАБЛЮДАЕТСЯ ПРИ

а) диарее б) миопатии

в) мочекаменной болезни г) патологии печени д) сахарном диабете

9.ОЛИГУРИЯ НАБЛЮДАЕТСЯ ПРИ

а) гемолизе эритроцитов б) миопатии

в) почечной недостаточности г) сахарном диабете д) цистите

10.СНИЖЕНИЕ УДЕЛЬНОГО ВЕСА МОЧИ НАБЛЮДАЕТСЯ ПРИ

а) гемолизе эритроцитов б) миопатии

в) почечной недостаточности

64

г) сахарном диабете д) цистите

11.ТЕМНЫЙ (ЧЕРНЫЙ) ЦВЕТ МОЧИ НАБЛЮДАЕТСЯ ПРИ ПОЯВЛЕНИИ

а) гомогентизиновой кислоты б) кетоновых тел в) крови г) уробилиногена

д) фенилпировиноградной кислоты

12.КРАСНЫЙ ЦВЕТ МОЧИ НАБЛЮДАЕТСЯ ПРИ ПОЯВЛЕНИИ

а) глюкозы б) гомогентизиновой кислоты в) крови

г) уробилиногена д) фенилпировиноградной кислоты

13.БУРЫЙ ИЛИ КОРИЧНЕВЫЙ ЦВЕТ МОЧИ НАБЛЮДАЕТСЯ ПРИ ПОЯВЛЕНИИ

а) белка б) глюкозы в) крови

г) уробилиногена д) фенилпировиноградной кислоты

14.ПОМУТНЕНИЕ МОЧИ НАБЛЮДАЕТСЯ ПРИ ПОЯВЛЕНИИ

а) билирубина б) гомогентизиновой кислоты в) глюкозы г) креатина

д) солей (уратов, оксалатов)

15.ПОНИЖЕНИЕ рН МОЧИ НАБЛЮДАЕТСЯ ПРИ

а) гемолизе эритроцитов б) миопатии в) патологии печени г) пневмонии

д) сахарном диабете

16.ПОНИЖЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ МОЧЕВИНЫ В МОЧЕ НАБЛЮДАЕТСЯ ПРИ

а) алкаптонурии б) гемолизе эритроцитов в) гипертиреозе

65

г) патологии почек д) сахарном диабете

17.ПОВЫШЕНИЕ МОЧЕВОЙ КИСЛОТЫ В МОЧЕ НАБЛЮДАЕТСЯ ПРИ

а) белковом голодании б) гемолизе эритроцитов в) патологии печени г) патологии почек д) подагре

18.КЛУБОЧКОВАЯ ФИЛЬТРАЦИЯ ОЦЕНИВАЕТСЯ ПО ВЕЛИЧИНЕ

а) клиренса креатинина б) клиренса парааминогиппуровой кислоты

в) максимального транспорта парааминогиппуровой кислоты г) максимального транспорта глюкозы д) соотношения объема выделяемой мочи с удельным весом

19.ПОЧЕЧНЫЙ ПЛАЗМОТОК ОЦЕНИВАЕТСЯ ПО ВЕЛИЧИНЕ

а) клиренса креатинина б) клиренса парааминогиппуровой кислоты

в) максимального транспорта глюкозы г) максимального транспорта парааминогиппуровой кислоты

д) соотношения объема выделяемой мочи с удельным весом

20.КАНАЛЬЦЕВАЯ СЕКРЕЦИЯ ОЦЕНИВАЕТСЯ ПО ВЕЛИЧИНЕ

а) клиренса креатинина б) клиренса парааминогиппуровой кислоты

в) максимального транспорта глюкозы г) максимального транспорта парааминогиппуровой кислоты

д) соотношения объема выделяемой мочи с удельным весом

21.КАНАЛЬЦЕВАЯ РЕАБСОРБЦИЯ ОЦЕНИВАЕТСЯ ПО ВЕЛИЧИНЕ

а) клиренса креатинина б) клиренса парааминогиппуровой кислоты

в) максимального транспорта глюкозы г) максимального транспорта парааминогиппуровой кислоты

д) соотношения объема выделяемой мочи с удельным весом

22.КОНЦЕНТРАЦИОННАЯ ФУНКЦИЯ ПОЧЕК ОЦЕНИВАЕТСЯ ПО ВЕЛИЧИНЕ

а) клиренса креатинина б) клиренса парааминогиппуровой кислоты

в) максимального транспорта глюкозы г) максимального транспорта парааминогиппуровой кислоты

66

д) соотношения объема выделяемой мочи с удельным весом

23.ПРИЧИНОЙ ОСТЕОПОРОЗА ЯВЛЯЕТСЯ СНИЖЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ В ПОЧКАХ

а) витамина D2

б) витамина D3

в) 7-дегидрохолестерина г) 25-гидроксихолекальциферола

д) 1,25-дигидроксихолекальциферола

24.НАРУШЕНИЕ РЕАБСОРБЦИИ В ПОЧЕЧНЫХ КАНАЛЬЦАХ ХАРАКТЕРИЗУЕТСЯ

а) снижением мочевины в крови б) повышением глюкозы в крови в) снижением креатинина в моче г) появлением глюкозы в моче д) появлением белка в моче

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

25.НАРУШЕНИЕ ФИЛЬТРАЦИИ В ПОЧЕЧНЫХ КЛУБОЧКАХ ХАРАКТЕРИЗУЕТСЯ

а) повышением в крови мочевины б) снижением в крови мочевой кислоты в) увеличением в крови глюкозы г) увеличением в крови креатинина д) появлением глюкозы в моче

26.ПАТОЛОГИЧЕСКИЕ КОМПОНЕНТЫ МОЧИ

а) ацетон б) гиппуровая кислота

в) мочевая кислота г) мочевина д) порфирины

27.ПАТОЛОГИЧЕСКИЕ КОМПОНЕНТЫ МОЧИ ПРИ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ

а) ацетон б) глюкоза

в) гомогентизиновая кислота г) уробилиноиды

д) фенилпировиноградная кислота

28.НОРМАЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ МОЧИ

а) глюкоза б) креатинин

67

в) мочевая кислота г) мочевина д) порфирины

29.ФЕРМЕНТ ТРАНСАМИДИНАЗА

а) участвует в синтезе креатина б) содержится в ткани почек в) содержится в ткани печени

г) увеличивается в моче при заболевании почек д) уменьшается в моче при заболевании

30.ФЕРМЕНТ УРОКИНАЗА

а) катализирует расщепление фибрина б) вырабатывается почками в) вырабатывается печенью

г) повышает свою активность при заболевании почек д) снижает свою активность при заболевании почек

31.ВЕЩЕСТВА, СИНТЕЗИРУЕМЫЕ В ПОЧКАХ

а) мочевина б) эритропоэтин

в) простагландины г) ренин д) аммонийные соли

УСТАНОВИТЕ СООТВЕТСТВИЕ

ДОПОЛНИТЕ

38.Причиной гемоглобинурии является __________ _____________ .

39.Преобладание ночного диуреза над дневным называется

____________.

40.Снижение суточного диуреза называется ___________.

41.Гематурия в зависимости от происхождения подразделяется на два вида: ___________, ______________.

42.Отсутствие колебаний удельного веса в течение суток называется

____________.

43.Индикаторным ферментом, синтезируемым в почках, является

_____________.

44.Активность урокиназы при патологии почек ______________.

45.Активность трансамидиназы при патологии почек ______________.

69

70