Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

2 курс / Биохимия / Лабораторные_и_специальные_методы_исследования_в_судебной_медицине

.pdf
Скачиваний:
1
Добавлен:
23.03.2024
Размер:
6.4 Mб
Скачать

Рис. 3. Технические весы.

Объяснение в тексте.

качестве вещественных доказательств), что требует умения и тщательного выполнения.

В судебно-медицинской практике применяют весы для гру­ бого (до граммов), точного взвешивания (до 1 мг) и аналити­ ческие (точность зависит от их конструкции и определяется от 0,2 до Ю-6—Ю-9 мг).

Для взвешивания большой массы (например, труп) ис­ пользуют торговые или медицинские весы типа М-150. Отдель­ ные части от больших масс (части трупа) взвешивают на тор­ говых или технических весах (точность их обычно не превы­ шает 1 г).

Для взвешивания объектов массой от 200 до 5000 г ис­ пользуют т е х н и ч е с к и е весы Т-5000 (рис. 3). Наимень­ шая гирька в разновесах равна 10 мг.

Перед началом работы техническле весы следует выверить: по отвесу (а); проверить уровень весов путем вращения вин-

8

тов (б); освободить от арретира поворотом ручки (в); опреде­ лить нулевую точку весов, т. е. установить деление шкалы (г), которое соответствует ненагруженному состоянию весов. Это можно установить только методом качания. Если стрелки свободных весов откачнутся вправо на п4 деление, затем вле­ во на п2 деление и опять вправо на п3 деление, то нулевая точка по будет определяться по формуле:

Если отклонение от нулевого деления шкалы слишком ве­ лико, то предварительно регулируют это положение, передви­ гая балансированные гайки (д).

Чувствительность весов определяется по формуле

п

где Р — масса перегрузки, вызвавшей смещение нулевой точки весов на п деление от первого положения.

А н а л и т и ч е с к и е весы устроены по тому же принципу, что и технические, но они менее массивны. Перед началом работы их следует так же выверить, как и технические весы.

Взвешивание на аналитических весах с точностью до 1 мг осущест­

вляется просто. Обычно на левую

чашу помещают

взвешиваемый

объект,

а на правую — гирьку

(масса ее

близка

массе объекта); арретир осво­

бождают не до конца,

замечая,

в какую

сторону

смещается указатель,

и в зависимости от этого добавляют большую либо

меньшую

гирьку.

Наименьшая гирька в

разновесах

обычно

равна

10

мг, использование

меньших навесок осуществляется с помощью рейтера. Положение рейтера

на конце

коромысла, где

стоит число 10, означает,

что на чашу весов с

этой стороны как бы добавили 10 мг. Передвижение

рейтера с

помощью

особого

рычага к центру

весов уменьшает

эту массу

соответственно

на­

несенным

на

коромысло

цифрам. Десятые

доли

миллиграмма

на

этих

весах

можно

определить

методом расчета

по качанию указателя.

 

В

настоящее время пользуются

демпферными

весами,

процесс взвешивания на которых значительно упрощен, так как отпадает необходимость определения нуля.

Кроме этих весов, в лаборатории необходимо иметь тор­ с и о н н ы е весы. По принципу действия и конструкции они отличаются от технических и аналитических весов.

Весы выпускаются с разными пределами измерений—25, 500 и 1000 мг. На весах, имеющих предел 250 мг, цена од­ ного деления равна 0,5 мг, следовательно, точность измере­ ния на них составляет±0,25 мг. Взвешивание проводят очень быстро и достаточно точно.

Необходимо напомнить, что правильное измерение длин и массы, проведенное с максимальной точностью и тщатель­ ностью, определяет точность многих величин, входящих в

9

расчетные формулы (площадь, объем,

плотность твердых тел

правильной геометрической формы,

относительная масса

и т. д.), обеспечивает правильность

сложных остеологиче­

ских, сравнительных и трассологических исследований, дает возможность применить любой физико-химический метод с необходимой точностью.

Измерение температуры в судебно-медицинских иссле­ дованиях в основном играет вспомогательную роль, однако отнюдь не снижает требований к точности и тщательности ее измерения. Влияние температуры на изменение органиче­ ских веществ, входящих в состав органов, тканей, выделе­ ний человека, хорошо известно. Под контролем температуры работают термостаты, муфельные печи, холодильные уста­ новки.

Для этой цели обычно используют технические термомет­ ры с различными шкалами, рассчитанными для измерения температур от 0 до 550 °С.

Химические термометры обычно выпускаются пяти номеров с диапазоном от 30 до 302° С.

Конструктивные особенности ртутных термометров позво­ ляют фиксировать и измерять температуру в пределах 5— 6° С с точностью до 0,002° С (термометр Бекмана) или изме­ рять максимальные и минимальные температуры (термометр

Сикса)

и т. д. Для измерения низких температур (ниже

—30 °С)

используют жидкостные термометры. Например, при

заполнении термометра пентаном пределы измерения темпера­

туры

составляют —180° и 20° С,

при

заполнении этиловым

спиртом —65° и 65° С.

 

 

 

 

Для измерения высоких температур

(выше 550° С)

исполь­

зуют термометры сопротивления

(болометры и термопары).

В

качестве примера, где

фактор изменения температуры

используется для решения

самостоятельной задачи,

можно

привести только определение давности смерти по изменению температуры отдельных частей трупа. Для этой цели исполь­ зуют электротермометры, конструкция которых разнообразна. Обычно диапазон измерений составляет от 16 до 42° С с точ­ ностью определения 0,2° С (см. главу XIX).

Во избежание случайных ошибок рекомендуется проверять термометры либо по эталонированным приборам, либо гра­

дуированием

по двум точкам — 0°С

(температура таяния

льда) и 100°С

(температура кипения

воды). Необходимо

помнить, что для ртутных и жидкостных термометров нулевая точка со временем смещается, так как вследствие остаточных напряжений, сохраняемых в стекле, объем резервуара и капил­ ляра изменяется. Это смещение может достигать 20° С.

Г л а в ;) II

МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В последние 30 лет в судебно-медицинской экспертизе, помимо наиболее (распространенного микроскопического ис­ следования объекта в проходящем свете, стали широко при­ менять такие методы, как фазово-контрастная, интерференци­ онная, флуоресцентная и ультрафиолетовая микроскопия. Судебно-медицинские эксперты используют различные методы микроскопического исследования для изучения повреждений одежды и тела человека, предметов и орудий, на которых мо­ гут иметься следы воздействия их на человека.

МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ В ПАДАЮЩЕМ СВЕТЕ ПО МЕТОДАМ СВЕТЛОГО И ТЕМНОГО ПОЛЯ

При микроскопическом исследовании в падающем свете лучи попадают на непрозрачный объект и через него не про­ никают. При микроскопии в падающем свете пользуются осве­ щением по методу светлого и темного поля. По методу светло­ го поля объект освещают из самого микроокопа, при этом свет проходит через тубус и объектив, затем свет, отраженный от поверхности объекта, попадает в глаз наблюдателя. По мето­ ду темного поля объект освещают с одной или с нескольких сторон. В объектив микроскопа попадают лучи, рассеиваемые объектом.

Простым приспособлением для освещения в падающем све­ те по методу светлого поля при микроскопии со слабыми объ­ ективами может служить стеклянная пластинка (толстое пок­ ровное, тонкое предметное стекло), установленная под углом 45° к столику микроскопа. Свет частично отражается от пла­ стинки и падает сверху вертикально на объект, который иссле­ дуют через стекло. Чтобы получить рассеянный свет, между источником света и стеклянной пластинкой помещают матовое стекло.

Однако, когда при микроскопии требуется применение большого увеличения, нельзя использовать наклонное стекло, так как расстояние между объектом и объективом при этом незначительно. В таких случаях применяют вертикальные ос-

11

ветители — опак-иллюминаторы. Находясь между тубусом и объективом микроскопа, опак-иллюминатор направляет лучи света от осветителя, находящегося сбоку от микроскопа, на препарат. Препарат же отражает лучи в объектив. Для на­ блюдения служат специальные объективы (эпиобъективы). Опак-иллюминаторы бывают двух видов: призменные— для работы с малым и средним увеличением и с плоским стек­ лом— для работы с большими увеличениями.

При исследовании объекта в падающем свете по методу темного поля используют дневной свет. Контрастность изобра­ жения и теневые эффекты достигаются при помощи освещения объекта софитными лампами (продолговатые' лампы накали­ вания устанавливают с четырех сторон). Возможно также од­ ностороннее освещение объекта электрической лампой, рас­ положенной под различным углом сбоку от микроскопа. Яркость освещенной и теневой сторон объекта можно регули­ ровать при помощи нескольких эпиосветителей, имеющих раз­ личную яркость, а также при помощи матовых стекол, зеркал.

При осмотре в падающем свете кожных покровов, слизи­ стых оболочек, поверхностей ран, ожогов, различных повреж­ дений органов и тканей, одежды, орудий травм, вещественных доказательств могут быть применены бинокулярные микро­ скопы. Благодаря их высокой стереоскопичности можно рас­ смотреть отдельные детали повреждений, инородные включе­ ния в ранах, установить форму и глубину их залегания.

Существует несколько видов бинокулярных микроскопов. О п е р а ц и о н н ы й м и к р о с к о п применяется в клинической практике. Он может быть использован при проведении судеб­ но-медицинской экспертизы живых лиц и исследовании трупов (непосредственная микроскопия). Микроскоп состоит из мас­ сивного основания со стойкой, на которой закреплен крон­ штейн, несущий оптическую головку. Оптическая головка со­ стоит из двух самостоятельных микросистем, установленных под углом друг к другу. Наводку на резкость производят дви­ жением всей головки, освещенность осуществляется вмонти­ рованным в головку осветителем.

Б и н о к у л я р н ы й м и к р о с к о п (МБ-51-2) предназна­ чен для рассматривания мелких предметов, повреждений, от­ дельных их деталей (непосредственная микроскопия). Он со­ стоит из двух самостоятельных микросистем. Каждая система дает отдельное изображение. При наблюдении двумя глазами достигается стереоскопический эффект. Объективы обеих си­ стем имеют увеличение 0,7. Они вмонтированы в общую опра­ ву, укрепленную в нижней части кронштейна. Призмы каждой половины микроскопа вмонтированы в отдельные тубусы, на верхних крышках которых находятся окуляры, имеющие уве­ личение 12,5. Чтобы установить нужное для глаза расстояние между окулярами, каждый тубус можно повернуть на неболь-

12

шой угол вокруг оси системы. Наводку на резкость осущест­ вляют вращением рукояток, расположенных по бокам крон­

штейна.

С т е р е о с к о п и ч е с к и е м и к р о с к о п ы (МБС-1 и МБС-2) с универсальными штативами дают прямое и объем­ ное изображение рассматриваемого предмета как в отражен­ ном, так и в проходящем свете. В судебно-медицинской прак­ тике они могут быть использованы для исследования орудий, предметов, повреждений одежды, органов и тканей трупов в секционном зале (непосредственная микроскопия). При рабо­ те в отраженном свете в качестве источника света используют электрическую лампочку и коллектор. При работе в проходя­ щем свете с помощью того же коллектора и отражателя осве­ щают прозрачный препарат, устанавливаемый на стеклянной пластинке. В качестве объектива служит специальная систе­ ма, офор'Мленная в виде оптической головки, состоящей из 4 линз с фокусным расстоянием, равным 80 мм, и двух пар галилеевых систем. Переворачивая эти системы, можно полу­ чить по два варианта увеличения. Для получения пятого ва­ рианта галилеевы системы нужно выключить из хода лучей.

Микроскоп МБС-2 состоит из столика, универсального штатива, оптической головки с механизмом грубой подачи, окулярной насадки и подлокотников. Внутри столика вмонти­ ровано отдельное устройство для естественного и искусствен­ ного освещения с применением обычных и специальных осве­ тителей. На столике имеется круглое окно, в расточку которо­ го устанавливается либо круглая металлическая пластина (при работе в отраженном свете), либо стеклянная пластина (при работе в проходящем свете). В качестве источника све­ та используют лампу накаливания СЦ-61 (8 В, 20 Вт), пита­ ющуюся от сети переменного тока через понижающий транс­ форматор. Благодаря конструкции штатива оптическая голов­ ка микроскопа может быть установлена в любое положение, удобное для исследования, применительно к форме рассмат­ риваемого объекта.

МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ В ПРОХОДЯЩЕМ СВЕТЕ ПО МЕТОДАМ СВЕТЛОГО И ТЕМНОГО ПОЛЯ

При микроскопии в проходящем свете объект освещают снизу, он становится виден в светлом или темном поле. Этот вид микроскопии наиболее распространен в судебно-медицин­ ских отделениях: гистологическом, по исследованию вещест­ венных доказательств биологического происхождения, бакте­ риологическом; он применяется также в работе физико-тех­ нического отделения.

Качество микроскопического изображения при рассматри­ вании в светлом поле во многом зависит от света, освещаю-

13

щего объект. Интенсивность освещения регулирует конденсор, который укреплен под столиком микроскопа. При диафраг­ мировании конденсора усиливается контрастность, что имеет значение, например, для лучшего исследования неокрашенных препаратов. Если через конденсор проходит очень много света, то препарат может выглядеть завуалированным, нечетким. Наилучший .вариант освещения достигается при соотношении величины апертуры конденсора к величине апертуры объек­ тива, как 2:3. При этом диафрагма конденсора снимает лучи света, проходящие дальше от оптической оси, и оставляет лучи, идущие ближе к ней.

Таким образом, ирисовая диафрагма конденсора предна­ значена не для регулирования силы освещения, а для получе­ ния более контрастного изображения.

Перемещение конденсора в вертикальном направлении поз­ воляет установить на резкость диафрагму. Так, при чрезмер­ ном опускании конденсора диафрагма может исчезнуть из поля зрения, освещение становится слабее, и поле зрения темнеет. Поэтому опускать конденсор следует до появления резкого изображения диафрагмы. Если при рассматривании объектов, особенно цветных, появится необходимость снизить яркость освещения, то следует пользоваться дымчатыми ней­ тральными фильтрами, помещая их в держатель под конден­ сором. Большая рельефность изображений объекта при микро­ скопии может быть достигнута применением половины дым­ чатого фильтра (в форме полумесяца) или диафрагмы с заслонкой в центральной части.

Увеличение разрешающей способности микроскопа и повы­ шение контрастности исследуемого объекта могут быть достиг­ нуты косым освещением. Оно может быть получено децентрированньш установлением зеркала (при отсутствии конден­ сора) и диафрагмы на конденсоре, применением секторных диафрагм, помещаемых в держатель под конденсором, диаф­ рагм с эксцентрически расположенными отверстиями.

При освещении по методу темного поля изображение объ­ екта получают светлым, а фон — темным. Большая контраст­ ность способствует лучшему наблюдению деталей объекта. В темном поле могут быть исследованы все объекты, струк­ туры которых различны между собой по показателям прелом­ ления.

Освещение по методу темного поля может быть установ­ лено при помощи центральных диафрагм, конденсоров темно­ го поля, путем косой установки зеркала микроскопа и др.

В судебно-медицинской экспертизе при исследовании гисто­ логических препаратов, а также вещественных доказательств биологического и небиологического происхождения для на­ блюдения в проходящем свете могут быть применены микро­ скопы различной конструкции.

14

Б и о л о г и ч е с к и й р а б о ч и й м и к р о с к о п (МБР-1) предназначен для исследования прозрачных объектов в прохо­ дящем свете в светлом поле. Микроскоп укомплектован тремя

ахроматическими объективами для тубуса длиной

160 мм.

На микроскопе может быть установлен прямой или

биноку­

лярный тубус. Конденсор микроскопа съемный и при необхо­ димости может быть заменен конденсором с фазово-контраст-

ным устройством КФ-4

или панкротическим конденсором

ПК-1.

 

Б и о л о г и ч е с к и й

р а б о ч и й м и к р о с к о п (МБР-3)'

предназначен для исследования прозрачных объектов в свет­ лом поле при прямом и косом освещении и в поляризованном свете. Микроскоп снабжен наклонной бинокулярной насадкой, дающей увеличение 1,5. Для фотографирования объектов к микроскопу прилагается вертикальная насадка с выдвижным тубусом, на которую могут быть установлены микрофотонасадки— МФН-7, МФН-8, МФН-12 (они не входят в комплект микроскопа). Ахроматические объективы, входящие в ком­ плект микроскопа, рассчитаны на тубус длиной 160 мм. Голов­ ка тубусодержателя имеет гнезда для крепления револьвера с объективами и бинокулярной насадки АУ-12 или прямого тубуса для фотографирования.

Б и о л о г и ч е с к и й и с с л е д о в а т е л ь с к и й м и к р о ­ с к о п (М Б И-3) предназначен для исследования прозрачных объектов в проходящем свете в светлом и темном поле при прямом и косом освещении. Исследования с помощью микро­ скопа можно производить при естественном и искусственном освещении; для последнего рекомендуется осветитель ОИ-19 (в комплект микроскопа не входит).

Для визуального наблюдения микроскоп снабжен наклон­ ной бинокулярной насадкой 1,5, а для фотографирования — прямым сменным тубусом. Объективы рассчитаны на тубус длиной 160 мм. Головка тубусодержателя имеет гнезда для крепления револьвера с объективами и бинокулярной насад­ ки АУ-12 или прямого тубуса для фотографирования.

Б о л ь ш о й б и о л о г и ч е с к и й м и к р о с к о п (МББ-1) предназначен для исследования прозрачных объектов в про­ ходящем свете в светлом и темном поле при прямом и косом освещении.

Исследование объектов можно также производить и в отраженном свете светлого и темного поля с помощью осветителя ОИ-21 (в комплект прибора не входит).Микроскоп имеет объемную бинокулярную насадку АУ-26 и прямой выд­ вижной тубус. Насадка АУ-26 снабжена револьверным уст­ ройством, с помощью которого собственное увеличение насад­ ки может изменяться ступенями (1,1; 1,6; 2,5). Фотографиро­ вание объектов производят также с помощью микрофотонасадок типа МФН. Увеличение микроскопа от 70 до 1600.

15

Универсальными моделями являются исследовательские микроскопы МБИ-6 и МБИ-11.

Ми к р о с к о п М Б И - 6 (с постоянной фотокамерой) поз­ воляет производить визуальные исследования и фотографи­ рование объектов в проходящем свете в светлом поле при пря­ мом и косом освещении, в темном поле с фазовым контрастом,

вполяризованном свете, а также в отраженном свете в свет­ лом и темном поле.

Ми к р о с к о п М Б И - 1 1 предназначен для исследования объектов в проходящем свете в светлом и темном поле, с фа­ зовым контрастом, а также в отраженном свете в светлом и темном поле и при смешанном освещении, т. е. при освещении объекта снизу и сверху одновременно. Кроме того, микро­

скоп обеспечивает возможность фотографирования объектоз с помощью микрофотонасадок МФН (в комплект прибора не входят). Увеличение оптической системы микроскопа в прохо­ дящем свете от 92,4 до 2700, в отраженном свете — от 69 до 2375).

МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ В ПОЛЯРИЗОВАННОМ СВЕТЕ

При проведении судебно-медицинской экспертизы в поля­ ризованном свете могут быть исследованы такие объекты, как различные ткани и органы человека, кости, волосы, текстиль­ ные волокна и др.

Для исследования в поляризованном свете применяют следующие микроскопы:

а ) у п р о щ е н н ы й п о л я р и з а ц и о н н ы й м и к р о с к о п МПУ - 1 служит для исследования прозрачных и непрозрач­ ных препаратов в проходящем (обыкновенном или поляризо­ ванном) свете. Конструкция микроскопа позволяет использо­ вать столик Федорова ФС-5, а также дает возможность при­ менять поляризационный осветитель (ОЙ-12) отраженного света при изучении непрозрачных объектов в полированных шлифах. Исследование можно производить при естественном и искусственном освещении (применяют осветители ОИ-19 и ОИ-9М). Для фотографирования объектов может быть исполь­ зована микрофотонасадка МФН. Увеличение микроскопа от 17,5 до 900;

б ) д о р о ж н ы й п о л я р и з а ц и о н н ы й м и к р о с к о п МПД-1 предназначен для исследования прозрачных препа­ ратов (шлифы, порошки) при ортоскопическом и коноскопическом ходе лучей. При ортоскопическом исследовании изоб­ ражение объекта рассматривается непосредственно в поле зрения микроскопа. Поляризованный свет, проходя через объ­ ект, претерпевает изменения в зависимости от свойств и ори­ ентировки исследуемого объекта. При повороте столика вме-

1 6 .. ; . ,г**'

сте с объектом изменяются освещенность и цвет изображения объекта. При коноскопическом исследовании рассматривают картину, которая зависит от кристаллографических характе­ ристик исследуемого объекта. Наблюдения можно произво­ дить при естественном и искусственном освещении (освети­ тель ОИ-19). Оптическая схема микроскопа МПД-1 примерно такая же, как микроскопа МПУ-1. Увеличение микроскопа от 45 до 900;

в ) п о л я р и з а ц и о н н ы й м и к р о с к о п М И Н - 8 служит для исследования прозрачных препаратов в проходящем (обыкновенном или поляризованном) свете в коноскопических и ортоскопических лучах. Он может быть применен для иссле­ дования непрозрачных предметов (осветитель ОИ-12) в отра­ женном свете. С помощью микрофотонасадки МФН можно фотографировать исследуемые объекты. Конструкция микро­ скопа позволяет использовать столик Федорова ФС-5, устрой­

ство для наблюдения методом

фазовых контрастов КФ-4 и

конденсор темного поля ОЙ-13

(в комплект микроскопа они

не входят). Увеличение микроскопа от 17,5 до 1350.

 

г) с т е р е о с к о п и ч е с к и й

п о л я р и з а ц и о н н ы й ми­

к р о с к о п

МПС-1 дает объемное

изображение

объекта в

проходящем и отраженном свете.

На микроскоп может быть

установлена

стереоскопическая

микрофотонасадка

МФН-5

(в комплект не входит), при помощи которой получают сте­ реоскопические снимки объектов. Увеличение микроскопа от 3,5 до 88.

ФАЗОВО-КОНТРАСТНАЯ МИКРОСКОПИЯ

Контрастность объектов при микроскопическом исследова­ нии значительно усиливается при определенном воздействии на дифракционные максимумы изображения. На этом осно­ ван фазово-контрастный метод исследования, превосходящий по контрастности получаемого изображения метод микроско­ пического исследования в темном поле. Для'фазово-контраст- ной микроскопии применяют специальные объективы и кон­ денсоры.

Основное преимущество фазово-контрастного метода за­ ключается в том, что он позволяет наблюдать биологические объекты (клетки тканей) без их предварительной фиксации и окраски. Этот метод может быть с успехом использован при проведении судебно-медицинской экспертизы для изучения поверхностей повреждений, волос, текстильных волокон, стек­ ла, пластмассы и других объектов. '

Устройствл для наблюдения методом фазового контраста КФ-4, КФ-5 могут служить и для работы с биологическими микроскопами МБР-1, МБИ-3 и др., т^4ИВ»рЛ& rwfwStiQy^ конденсора имеет посадочный диаметр 37|}щ|.#гфф$о^£1м^-де-

2-2257

&ЩК- ГЛаЬНвй О J . **•••«4Я£*М<

 

rjlei 5i,;ot Р ,ИЭ« ft 3 b't*,'