2 курс / Биохимия / Лабораторные_и_специальные_методы_исследования_в_судебной_медицине

Целесообразно извлекать колосники, так как в просветах их могут находиться отдельные кусочки обугленных костей, мелкие кости и различные другие объекты экспертного иссле­ дования.

В протоколе отмечают поддувала, ямы под топкой локо­

угол топки» и т. д. Если в отопительном очаге имеется горя­ щее топливо или крупные части его, то надлежит извлечь их и поместить отдельно. Изъятие остывших объектов производят деревянной лопаткой или пластмассовым совком. Упаковоч­ ным материалом служат калька, мешочки из хлопчатобумаж­ ной ткани, картонные коробки, не употреблявшиеся для хра­ нения металлических изделий, и т. д.

После изъятия отдельных проб из очага извлекают всю остальную золу и после осмотра и отбора отдельных находок помещают ее в один пакет. Следует помнить, что в золе могут быть очень хрупкие мелкие кусочки обугленных костей, кото­ рые легко рассыпаются. Обнаруженные включения помещают раздельно в пробирки или коробочки, предварительно каждый кусочек упаковывают в вату или в мягкую материю.

При обнаружении в зольном остатке бумаги или кусочков обугленной ткани их нужно осторожно извлечь и, поместив между двумя стеклами, перевязать.

Золу из поддувала также следует брать из разных мест, не менее 4 проб, а затем — всю остальную и класть в отдель-' ные пакеты с указанием на них, из каких мест взяты пробы.

При осмотре локомобилей следует обратить особое внима­ ние на наличие золы в яме под колосниками. Золу при этом берут послойно и из разных мест: каждую пробу помеща­ ют в пакет с указанием места, где была взята проба, и глу­ бины.

Если от сожжения трупа до осмотра места происшествия прошло некоторое время, то^юсле послойного забора отдель­ ных проб необходимо послойно изъять всю оставшуюся золу в отдельные пакеты (бумажные мешки) с указанием уровня, с которого взята зола.

Если в отопительном очаге обнаружена только пыль, ее также следует вначале взять из 4—5 мест, а затем собрать всю оставшуюся.

Если зола костра присыпана землей, то, кроме золы, берут еще 2—3 пробы земли (массой до 100 г каждая).

128»

По возможности должны быть изъяты и направлены на ис­ следование образцы топлива, которое могло быть использова­ но при сожжении трупа или его частей. Если топливо раз­ личное (дрова, уголь, торф), то направляют не менее 100 г каждого.

Во избежание нарушения целостности изъятых объектов при транспортировке их помещают в плотные пакеты и коро­ бочки, перекладывают ватой, мягкой бумагой или тканью, укладывают в ящик и направляют для исследования.

Поступившую в экспертное учреждение золу вначале ос­ матривают визуально, содержимое каждого пакета взвешива­ ют. Если в золе обнаруживают отдельные кусочки, напоми­ нающие по внешнему виду обугленные кости, то их извлекают и исследуют сравнительно-анатомическим методом или под­ вергают спектральному анализу.

Если при визуальном исследовании золы отдельных частиц костной ткани не обнаруживают, следует произвести ультра­ фиолетовое облучение золы в затемненном помещении. Кост­ ные фрагменты могут давать голубоватое или серовато-корич­ невое свечение. Люминесцирующие крупинки отбирают из золы для дальнейших исследований.

Золу из каждого пакета просеивают через капроновое или волосяное сито (диаметр ячеек до 1 мм2 ). В результате про­ сеивания получается два самостоятельных объекта исследо­ вания: собственно зола (то, что прошло через сито) и частицы различных размеров (то, что осталось в сите).

После визуального и микроскопического исследования ча­ стицы, оставшиеся в сите, подвергают рентгенографии. Для частиц объемом 2—3 мм3 используют мягкие рентгенов­ ские лучи (напряжение б—10 кВт), для более крупных частиц применяют лучи средней жесткости (10—30 кВт).

Далее, объекты достаточно больших размеров (более 0,2 г) взвешивают, помещают в тигли и ставят в муфельную печь при температуре 450° С на 4 ч. Объекты, масса которых очень мала (менее 0,2 г), исследуют без предварительной обработки. В зависимости от количества вещества берут 3—10 проб (мас­ сой 20—30 мг каждая). Если масса объекта находится в пре­ делах 2—30 мг, допускается однократный анализ, однако в этом случае достоверность выводов снижается.

Аналогичным образом подготавливают костное вещество, которое служит контролем для сравнения и проверки экспе­ римента в целом.

Если в лаборатории нет заранее подготовленной контроль­ ной коллекции, эксперт должен взять кости (трубчатые и реб­ ра) от 5—10 трупов людей того же пола и возраста, которые установлены или предполагаются по материалам дела. От каждого трупа берут по 1 кусочку массой 5—10 г какой-, либо трубчатой кости и ребра.

Подготовленные пробы с массой 20—30 мг загружают в углубления нижнего угольного электрода. Источник тока — дуга переменного тока ДГ-1, сила тока—7—9А, экспозиция — 45 с. Спектральный аппарат — ИСП-28, освещение—3-линзо- вым конденсором. Ширина щели—0,015 мм, пластинки спектральные — тип П. Чувствительность — 16 единиц по ГОСТ. Параметры эксперимента в зависимости от наличия той или иной аппаратуры, фотоматериалов и количества пробы иссле­ дуемого материала могут быть изменены экспертом предвари­ тельным подбором.

Съемку объекта (если его количество не ограничено еди­ ничной пробой) проводят не менее 3 раз (желательно 5—10 раз), через 3-ступенчатый ослабитель.

Большинство перечисленных вопросов этого вида эксперти­ зы решают методом относительных количественных критериев с последующей статистической обработкой.

Фотометрирование производят для 9 элементов по указан­ ным спектральным линиям (в скобках указаны значения 3-ступенчатого ослабителя 1—50%, 2—100%, 3—12,5%):

Отдельные вопросы могут быть решены и в системе 5 гра­ даций полуколичественного анализа ( + + +, -\—К +, ел,—).

В тех случаях, когда представленная на экспертизу кость (или ее фрагмент) хорошо сохранила определенное количест­ во морфологических признаков, задача решается достаточно надежно методами сравнительной анатомии. В тех же случа­ ях, когда костные останки малы или сильно деформированы и не сохранили морфологических признаков (что особенно часто бывает при их сожжении), единственными методами, которые могут помочь при решении этой задачи, являются рентгеновский и спектральный.

Предварительными детальными исследованиями микро- и макроэлементов (Са, Р, К, Mg, Na, Sr, Си, Fe, Al, Ag, Pb, Mn, Si, Ba, Cr, Ti, Ni, Co, Zn), входящих в состав костного вещества, установлено их наличие, а также даны полуколиче­ ственная оценка и основные Статистические характеристики для относительных количественных коэффициентов.

На рис. 40 показана функция распределения калия в кост­ ном веществе ребра трупов людей обоего пола, умерших в возрасте от 3 мес до 70 лет: детей, мужчин и женщин в воз­ расте моложе 35 лет (кривая а); мужчин и женщин в воз­ расте старше 35 лет (кривые б) и для генеральной совокуп­ ности (кривая б).

130

Рис. 40. Гистограммы распределения калия в костной ткани ребер. Объяснение в тексте.

Характерные кривые колоколообразной формы с опреде­ ленным значением дисперсии (которую можно рассматривать как физиологический разброс) резко отличают костную ткань от любого вида топлива, исследованного по тем же элементам и их соотношениям. Такие предварительные исследования по всем обнаруженным элементам дают возможность достоверно решить вопрос об идентификации костного вещества.

При сравнительных исследованиях для ответа на вопрос, является ли данное вещество костным, должно быть принято во внимание присутствие и соотношения следующих элемен­ тов: Са/Р, Mn/Na, K/Sr; К, Sr, Na и Си. Абсолютные значения этих коэффициентов могут несколько меняться в зависимости от параметров эксперимента. С особенной осторожностью надо использовать количественные характеристики для калия, так как его концентрация в значительной степени зависит от таких факторов, как время захоронения, вываривание и т. д.

Такие экспертные исследования, как установление видовой принадлежности костной ткани, половых, возрастных характе­ ристик, прижизненных патологических состояний, могут про-

Костные останки животных нередко попадают на экс­ пертное исследование слу­ чайно и почти всегда после предварительной кулинар­ ной обработки (выварка). Таким образом, эксперту приходится учитывать слож­ нейший процесс исчезнове­ ния калия из костного веще­ ства и значительное изме­ нение соотношений ряда других макро- и микроэле­ ментов.

Детальный статистиче­ ский анализ всех обнару­ женных элементов показал, что по элементам костной ткани невозможно диффе­

ренцировать пол, так как изменение содержания их настоль­ ко мало, а сам анализ настолько сложен, что использование его в повседневной экспертной работе при единичном ана­ лизе практически исключается.

Более достоверные результаты получают при определении возраста. Так, проведенными исследованиями статистически надежно устанавливаются возрастные группы — детский воз­ раст, средний возраст и старческий возраст. Данные по детс­ кой группе (от 1 мес до 14—16 лет) указывают на возмож­ ность дальнейшими исследованиями подтвердить возрастные интервалы в пределах ± 2—4 года (табл. 7).

Определение возраста по соотношению K/Sr показано на рис. 41. Старческий возраст характеризует накопление РЬ и Sr. При этом необходимо учитывать профессию умершего, так как значительные накопления РЬ, Си, Sr, Ag, Cr, Co и других элементов возможны при контакте человека с ними на произ­ водстве и в быту.

Проведенные исследования по использованию спектраль­ ного метода для установления времени и места захоронения трупа указывают на его перспективность и одновременно на значительные трудности проведения отдельных экспертных исследований.

Установлена определенная зависимость между временем захоронения трупа и содержанием в его тканях отдельных макро- и микроэлементов. Эта зависимость может быть пред­ ставлена в форме градуировочных кривых, по оси абсцисс которых указано время захоронения, по оси ординат — отно­ сительный количественный коэффициент изменяющихся мак­ ро- и микроэлементов. Однако эти кривые указывают только

133

на общую закономерность изучаемого явления. Отклонения от них как вследствие физиологического разброса, так и вследствие дополнительных случайно действующих факто­ ров— метеорологических условий, вида почвы, глубины захо­ ронения, вида захоронения и т. д.— значительны. Дальнейшее накопление экспериментального и экспертного материала дает возможность все точнее решать эти вопросы.

При захоронении и пребывании трупа в почве в течение первых 2 лет в костной ткани интенсивно накапливается Мп, что можно объяснить диффузией его из органов и тканей в костную систему. Концентрация К в течение первых 2—3 лет снижается значительно (определяются лишь следы). Накоп­ ление Si можно объяснить проникновением его из почвы.

В настоящее время ведутся исследования по определению видовой принадлежности костной ткани и принадлежности отдельных фрагментов костей одному скелету, т. е. делается попытка обосновать возможность идентификации костного ве­ щества скелета в целом.

ИЗУЧЕНИЕ МАКРО- И МИКРОЭЛЕМЕНТОВ, ВХОДЯЩИХ В СОСТАВ ОРГАНОВ, ТКАНЕЙ И ВЫДЕЛЕНИЙ ЧЕЛОВЕКА, И ИХ ЗНАЧЕНИЕ ДЛЯ ЭКСПЕРТИЗЫ

Многие вопросы судебной медицины, связанные с иденти­ фикацией личности, черепно-мозговой травмой, установлением вида и давности смерти, времени захоронения и т. д., требуют разработки новых дифференциальных (или идентификацион­ ных) признаков.

В настоящее время в спектральных лабораториях, создан­ ных при судебно-медицинских учреждениях, проводят следу­ ющие исследования.

Исследование объектов при проведении экспертизы по по­ воду отравлений металлическими ядами. В настоящее время эмиссионный спектральный анализ используют в качестве самостоятельного, а также вспомогательного при проведении различных химических исследований. Все данные токсиколо­ гических исследований построены на определении концентра­ ции веществ, поэтому для получения сопоставимых результа­ тов рекомендуется проводить определение концентраций мето­ дом 3 эталонов. Изготовление надежных эталонов в этих слу­ чаях для многих элементов не представляет трудности.

Полученные предварительные данные по изучению стати­ стических характеристик для отдельных макро- и микроэле­ ментов, содержащихся в органах и тканях человека, с учетом данных токсикологии и судебной химии, уже сейчас позволяют работникам судебной медицины диагностировать отравления такими металлами, как Ag, Pb, Mg, Cu, Be, Ba, T1 и др. Отдельные работы показывают возможность устанавливать

134 *

Диагностика прижизненно полученного перелома костей по изменению элементов состава венозной крови травмирован­ ной и интактной (контроль) конечности и крови из правого предсердия также ограничена вероятностными значениями. Однако статистически достоверно установлено изменение со­ держания отдельных микроэлементов (К, Р, Си, Na) в крови при прижизненно полученных переломах.

Исследования объектов при проведении экспертизы с целью установления живорожденности и мертворожденности, време­ ни смерти и времени внутриутробной жизни. Результаты спе­ циальных исследований свидетельствуют о том, что некоторые вопросы в подобных случаях можно успешно решить с по­ мощью эмиссионного спектрального анализа. Так, например, статистический анализ данных для Ри, Си, Fe, Ca, входящих в состав ткани легких живорожденных и мертворожденных, указывает на то, что в значительном проценте случаев они могут быть дифференцированы достаточно достоверно (коэф­ фициент отношения Р/Са у живорожденных 1,54 ±0,08, у мерт­ ворожденных 3,48±0,11 и т. д.). Гистограммы имеют колоколообразную форму, небольшую дисперсию.

В настоящее время проводится изучение других тканей и органов новорожденных и младенцев с целью их дифферен­ циации, а кроме того, анализируется материал различной сте­ пени гниения, сушки и т. д., что также найдет практическое применение.

Изучение мекония по содержанию К, Na, Ca, Mg, Cu, A1, Ag, Zn, Fe, Sr, P позволило установить признаки, позволяю­ щие отдифференцировать его от других выделений человека (в пятнах) и с большей степенью достоверности дифференци­ ровать VIII, IX, X лунные месяцы внутриутробной жизни младенца.

Этот вид исследования должен войти в практику спект­ ральных лабораторий судебно-медицинских учреждений.

Исследование объектов при проведении экспертизы по по­ воду установления давности смерти и получения черепно-моз­ говой травмы позволяет устанавливать тончайшие временные характеристики реакций отдельных органов, тканей и крови человека на эти процессы. Вероятностный характер дифферен­ циальных признаков может помочь при проведении отдельных сложных эспертиз. Обобщенный материал проанализирован на электронно-вычислительной машине.

Исследование объектов при проведении экспертизы по дифференциации отдельных выделений человека. Имеются данные о надежных дифференциальных признаках различных выделений, что может быть использовано в экспертной прак­ тике в совокупности с другими методами исследования.

Экспертиза крови достаточно описана в судебно-медицин­ ской литературе. Эмиссионный спектральный анализ может

136 •*

быть использован при установлении видовой принадлежности крови, давности наступления смерти, дифференцировании крови детей от крови взрослых, менструальной от перифери­ ческой и др.

Экспертиза волос, зубов, ногтей. Доказана малая значи­ мость дифференциальных признаков по микроэлементам при определении пола. В то же время выявлены надежные дан­ ные, по которым можно устанавливать индивидуальные осо­ бенности, некоторые профессиональные особенности, методы лечения ,и т. д.

Исследования внутренних органов человека позволили вы­ явить определенную топографию макро- и микроэлементов в отдельных органах и в разных участках одного и того же органа, установить выбранную условно «норму» содержания макро- и микроэлементов для всех органов и тканей человека и их физиологический разброс.

Указанными работами создана та база, на которой можно строить любое исследование объектов судебно-медицинской экспертизы.

Эта глава представляет собой обобщение работ судебномедицинских экспертов, опубликованных на протяжении по­ следних 20 лет.

Все отмеченное свидетельствует о перспективности исполь­ зования метода эмиссионно-спектрального анализа в судеб­ ной медицине и вместе с тем о сложности оценки полученных данных в практической работе экспертов.

АБСОРБЦИОННАЯ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ

С помощью методов абсорбционной спектрофотометрии устанавливают связь между длиной волны (X) излучения и изменением его интенсивности при прохождении через изуча­ емую среду (или при отражении от изучаемой поверхности). Их можно разделить на две группы. В первой группе методов используют область спектра с длиной волны от 200 до 1000 HIM, т. е. ультрафиолетовую, видимую и близкую инфра­ красную область, во второй—более 1000 нм, т. е. инфракрас­ ную область.

Область 200—1000 нм изучают с помощью обычной спектральной аппаратуры — фотоэлектрический калориметр (ФЭК), универсальный фотометр, спектрофотометр со стек­ лянной (СФ-14) и кварцевой оптикой (СФ-4а). Изучение объ­ ектов в инфракрасной области требует специального оборудо­ вания—спектрометр типа ИКС-14 (UR-20).

В судебной медицине методы абсорбционной спектромет­ рии, при которой используют волны длиной 200—1000 нм, могут играть как вспомогательную роль, так и самостоятель­ ную.

137