Лемешевский В.О.,Безрученок Н.Н.,Каленчук Т.В

ливания. Надавливание на ткани приводят к смешиванию крови с лимфой, из-за чего результаты анализа окажутся недостоверными. Первую каплю крови для исследования не используют, так как она содержит случайные примеси и лимфу, поэтому ее снимают фильтровальной бумагой или ватой, смоченной эфиром. Для исследования берут вторую или третью каплю. На ранку накладывают ватный тампон, смоченный настойкой йода или спиртом.

Получение крови у животных

ÏолесÃÓПринудительной фиксации животных при взятии крови следует по возможности избегать. Для получения крови у мелких животных и птиц иногда прибегают к пункции желудочков сердца.

Для взятия крови у животных производят обработку операционного поля (выстригание или выбривание волосяного покрова, протирание кожи пиртом и эфиром), а затем надрезают (прокалывают) кров но ный сосуд или вводят в него иглу, предварит льно подвергнутую стерилизации

(Рис. 2).

Лошади, крупный и м лкий рогатый скот. Неболь-

шие количества крови д я анализа у лошадей и рогатого скота получают из ушн й вены путем ее надреза или прокола инъекци нн й иг й. Выступившую кровь насасывают в пипетку или с бирают п каплям на часовое стекло, предварительн пр мыт е антикоагулянтом. У овец можно производить, кроме того, пункцию кожной вены, расположенной под внутренним углом глаза.

Для получения больших количеств крови производят пункцию яремной вены на границе верхней и средней трети шеи. После фиксации животного большим пальцем левой руки давливают вену ниже места пункции (у крупного и мелкого рогатого скота накладывают резиновый жгут), а затем прокалывают кровопускательной или инфузионной иглой кожу и стенку вены.

31

А – Г – из уха и пальца: 1 – съемное лезвие иглы Франка; 2 – головка; 3 – подвижная гайка; 4 – курок; Д – Ж – из вены

Иглу вводят против тока крови под углом 45° (Рис. 3). Кровь собирают в стерильный о уд. Для получения крови из глубоко расположенных сосудов (воротной, печеночной, задней полой, общей брыж чной, рубцовой и др. вен) производят их катетеризацию с помощью н йлоновых или тефлоновых катетеров. Д я взятия крови у крупных животных используют приборы-автоматы. Они имеют разную конструкцию, но в с став их бязате ьно входят корпус, иглодержатель, держатели д я пр бирок, ударный механизм с пружи-

ной (Рис. 4).

ÏолесÃÓРис. 2 – Иглы для взятия крови:

Свиньи. У свиней малые количества крови получают путем надреза скальпелем большой ушной вены. Центральный конец сосуда у корня уха зажимают при этом пальцами. Для получения больших количеств крови отсекают ножницами или скальпелем отрезок хвоста длиной 1– 1,5 см. П окончании кровопускания рану дезинфицируют, а кончик хвоста сдавливают резиновым кольцом или перетягивают бинтом на 1–2 суток. У поросят рекомендуют получать кровь путем прокола иглой или микропипеткой орбитального венозного синуса. Животное при этом фиксируют лежа, в спинном положении. За один раз берут от 5 до 30 мл крови.

32

получают путем надр за края уха или прокола мягкой части ступни. Для по учения бо ьших порций крови производят пункцию п р дн наружной п юсневой вены, расположенной на наружн й п верхн сти го ени (Рис. 5).

Рис. 5 – Пункция переднепружной плюсневой вены у собак

33

Животное кладут на бок или фиксируют в станке; конечности сдавливают руками или жгутом ниже коленного сустава. Иглой прокалывают сначала кожу, затем стенку вены. Кровь насасывают в шприц.

Кролики. Малые количества крови у кроликов получают путем надреза или прокола вены, расположенной снаружи по тонкому краю уха. Животное при этом завертывают в полотенце или сажают в ящик с отверстием для головы; ухо предварительно погружают в теплую воду или протирают

ксилол м (спиртом).

к среднÏолесÃÓй линии, глубина прокола 1,5–2 см. Одновременно можно взять до 5–10 мл крови.

М т м кровопускания может служить и грудная вена –

v. thoracica externa, расположенная на грудной клетке сбоку. После обработки операционного поля (от локтевого бугра до третьего ребра) вену зажимают пальцем около локтя. Иглу вводят пр тив т ка крови.

ских свинок по учают пут м надр за края уха или прокола иглой Франка ступни животного. Для получения больших количе тв кр ви де ают пункцию яремной вены (после разреза кожи и препар вки с суда) или пункцию сердца. Иглу

вкалывают у лев г края грудины, в точке, где хорошо ощущается сердечный т лч к. Направление укола – внутрь

Крысы и мыши. Для получения крови у крыс и мышей надсекают ухо или срезают кончик хвоста. У крупных крыс можно п учать кровь пункцией хвостовой вены. Хвост опускают в теплую воду, затем обсушивают марлей и сдавливают у корня пальцами; в сосуд вводят тонкую иглу. Кровь насасывают в шприц.

Птицы. Небольшие порции крови у кур и индеек получают путем надреза или скарификации гребня (сережек). У гусей и уток делают прокол мякоти ступни. В большом коли-

34

честве кровь у птиц получают из подкожной подкрыльцовой вены, расположенной на внутренней поверхности крыла. Перья выщипывают, вену сдавливают пальцем в области локтевого сустава, прокол делают под углом на уровне локтевого сгиба (Рис. 6).

Можно предварительно обнажить сосуд коротким разрезом кожи. Ввиду высокой свертываемости крови у птиц место прокола протирают противосвертывающей жидкостью. Выступившие капли крови переносят пипеткой в бюкс или собирают в центрифужную пробирку с антикоагулянтом. После взятия крови место пункции на несколько минут зажимают тампоном.

Рис. 6 – Внутренняя поверхность крыла кур:

1 – мест пункции п дкрыльцовой вены помечено крестиком

У гусей, ут к и индеек кровь можно получать из внутренней плюсневой вены, расположенной под кожей на медиальной, поверхности плюсны, ближе к ее плантарному краю. У кур, гусей, индеек можно брать одновременно до 10–15 мл, у голубей – 1–1,5 мл крови.

При необходимости получить у кур артериальную кровь прибÏолесÃÓгают к пункции сонной артерии (после ее обнажения у наркотизированной птицы) или к пункции левого желудочка сердца. Прокол делают слева в V-образной вырезке грудной кости с направлением иглы к плечевому суставу противоположной стороны (у кур) или под углом 45° к стенке грудной клетки, вперед (у цыплят).

35

Иногда производят пункцию кожной вены, расположенной посередине живота (кожу предварительно надрезают). Можно получать кровь у лягушки и пункцией обнаженного сердца.

Рыбы. У рыб небольшие количества крови берут из подкожной артерии или глубокой хвостовой артерии.

Общие рекомендации:

Исследования крови следует всегда производить в одно

и то же время, при одинаковых условиях, до приема пищи. Перед уколом место взятия крови дезинфицируют и обезжиривают, протирая его ватой, смоченной спиртом, а затем эфиром или их смесью. Прокол производят либо стерилизованным скарификатором, либо иглой Франка со сменными стерилизуемыми лезвиями. Укол обычно производится на глубину 2–3 мм. Полученную после укола первую каплю снимают

фильтровальной бумагой или ватой, моченной эфиром.

Кровь для исследования б рут в опр д ленном порядке: для определения СОЭ, гемоглобина, зат м – для подсчета лейко-

цитов и эритроцитов де ают мазки. Посл взятия крови, место

укола оборачивается смоч нной эфиром или спиртом ватой

ЛошадьÏолесÃÓ, крупный и мелкий р гатый скот

Свиньи

Собаки

Кролики Морские свинки Крысы и мыши Птицы Лягушки

36

Работа № 2 Получение плазмы, сыворотки, фибрина

и дифибринированной крови

Кровь – жидкая соединительная ткань, которая состоит из жидкой части – плазмы и находящихся в ней во взвешен-

ном состоянии форменных элементов – эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов.

Получение плазмы крови. Для получения плазмы кровь необходимо предохранить от свёртывания добавлением антикоагулянтов – веществ, препятствующих свертыванию крови (1 % раствор гепарина, 2–3 капли, или 5 % раствор лимоннокислого натрия, 0,5 мл).

Стабилизированная кровь – кровь, предохраненная от свертывания.

В пробирку или стеклянный цилиндр с антикоагулянтом собирают по 10 мл крови из яр мной вены животного. Закрыв

37

плазму, лишенную белка фибриногена и других веществ, участвующих в свертывании крови.

1-й способ:

В пробирку или цилиндр без антикоагулянта собрать 10 мл крови животного и поставить в термостат при 38 °С на несколько часов. Образовани кровяного густка и частичная ретракция, т.е. его стягивани и самопроизвольное отделение сыворотки наступа т у ошад й через 1–3 часа, а полное отделение сгустка через 12–18 часов. У крупного рогатого скота ретракция пр текает значительно медленнее. Для лучшего отделения сыв р тки стери ьной проволокой или стеклянной пал чк й бв дят по стенке пробирки вокруг сгустка. Вначале сгуст к рыхлый и занимает почти весь объем пробирки, затем он уплотняется и отходит от ее стенок. Из пробирки, с полной ретракцией сгустка, слить или отсосать сыворотку и сравнить ее с плазмой. Сыворотка имеет желтоватосоломенный цвет и более прозрачна, чем плазма.

2-й пособ:

Дефибринированную кровь разлить в центрифужные пробирки и центрифугировать при 3000 об / мин-1 в течение

10–15 минут.

Форменные элементы оседают на дно. Сверху окажется сыворотка.

38

Иногда она приобретает красноватый оттенок, вследствие разрушений эритроцитов из дефибринированной крови

(Рис.9).

Получение фибрина и дефибринированной крови.

Положить в стеклянную колбочку 10–12 стеклянных бусинок и собрать в нее из сосуда животного 20–30 мл крови. Взбалтывать кровь вращательными движениями в течение 10–15 минут. Фибриноген, выпадающий в осадок в виде волокни-

стых нитей фибрина, оседает на шариках. Затем профильтро-

пробиркиÏолесÃÓ, поместить на беззольный фильтр.

вать держимое колбы через 2 слоя марли. Фильтрат пред-

ставляет собой дефибринированную кровь, а осевшие на шариках «метелки» – нити фибрина – отмыть от форменных элементов теплой водой. Фибрин имеет вид белого волокни-

Сжимая фильтр, получить воздушно-сухой остаток фибрина, к т рый взвесить на торзионных весах.

В норме в 1 мл цитратной крови содержится 6–9 мг воз- душно-сухого фибрина. При пониженном содержании фибриногена может нарушаться свертываемость крови.

39

Вопросы и задания для самоконтроля:

1.Что такое кровь и каково ее значение для организма?

2.Опишите процесс забора крови у крупных и мелких животных для анализа.

3.В чем состоят основные правила взятия крови у чело-

века?

4.Каков принцип метода разделения крови на плазму и форменные элементы?

5.Дайте характеристику стабилизированной крови.

7. На как м принципе основан способ получения сыворотки крови?

8. В результате чего происходит ретракция кровяного сгустка?

став?

6.ÏолесÃÓВ ч м отличия плазмы и сыворотки?

9. Чт так д фибринированная кровь и каков ее со-

10.Опишите получение фибрина и дефибринированной крови.

40