ilovepdf_merged

Требования к питательным средам:

должны содержать необходимый для микроба набор питательных веществ (макро- и микроэлементы, факторы роста);

иметь оптимальную для микроба кислотность среды (рН);

иметь оптимальную для микроба

концентрацию солей (изотоничность);

иметь достаточную влажность;

среда должна быть стерильной.

Несоблюдение любого из требований делает питательную среду непригодной.

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

Классификация

питательных сред

По происхождению различают:

естественные, которые содержат естественные компоненты (молоко,

мясо, яйца, кровь, картофель, отвары овощей, пивное сусло и т.п. ), и имеют

неопределённый состав,

искусственные (минеральные,

глюкозо-солевые среды) определённого

состава.

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

Классификация

питательных сред

По консистенции различают среды:

 жидкие – (МПБ, желчный МПБ);

 плотные – жидкая среда, уплотненная

1,5-2,0% агар-агара (МПА, МСА, ЖСА);

 полужидкие – концентрация агара –

0,5-0,7%;

 твёрдые – отходы растениеводства (отруби,

свекловичный жом, рисовая лузга, подсолнечная лузга, пивная дробина и т.п.) в биотехнологии для получения ферментов из плесневых грибов.

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

Классификация питательных сред По назначению различают среды:

 общего назначения (универсальные)

– для выращивания всех микробов (МПБ, МПА);

 специальные – для изучения свойств и диагностики микробов;

они подразделяются на:

- избирательные (элективные) – предназначенные

для определенного вида микробов, другие на них растут плохо (МСА, желчный МПБ, щелочной МПА);

- дифференциально-диагностические -

предназначены для определения некоторых свойств и дифференциации (различения) микроорганизмов

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

Приготовление питательной среды

• Для получения готовой

среды необходимо взвешиванием отмерить нужное количество порошка, растворить его в воде, нагреванием расплавить находящийся в нем агар, провести стерилизацию, асептически добавить нетермостойкие добавки и разлить в стерильную лабораторную посуду.

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

Дифференциально-диагностические среды

среды для обнаружения способности микробов

расщеплять определённые углеводы (сахара)

и многоатомные спирты (полиолы).

Это среды Эндо, Плоскирева и Левина а также среды Гисса (“пёстрый ряд”);

среды для обнаружения протеолитической и гемолитической способности микроорганизмов

(расщепление белков и крови). Это свёрнутая сыворотка, питательная желатина, кровяной агар;

среды с определёнными химическим веществами, которые служат источником питания для одних видов, и не усваиваются другими. Это цитратная среда для кишечной палочки;

среды для обнаружения редуцирующей способности микроорганизмов. Это лакмусовое

молоко и др.

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

ХРОМОГЕННЫЕ СРЕДЫ

Действие хромогенных плотных питательных сред основано на выявлении специфических

или уникальных ферментов микробов.

Для обнаружения специфического фермента

в состав среды включены хромогенные субстраты - вещества, при расщеплении

которых образуются окрашенные продукты.

В результате хромогенная среда контрастно изменяет свой цвет при обнаружении искомого микроорганизма.

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

ХРОМОГЕННЫЕ СРЕДЫ

• Среды с хромогенными субстратами – содержат

вещества, которые дают окрашенные продукты при их расщеплении бактериальными ферментами (например, X-Gluc расщепляется бета-глюкуронидазами с образованием

синего пигмента).

•Принцип действия основан на выявлении высокоспецифичных ферментов у искомых микроорганизмов. К таким ферментам относятся, например, бета-D-глюкуронидаза Escherichia coli или бета-D-глюкозидаза энтерококков.

Е. coli

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

ХРОМОГЕННЫЕ СРЕДЫ

среда «Detection» (для выявления мочевых инфекций) позволяет дифференцировать колонии E. сoli, Proteus mirabilis, S. aureus, Enterococcus faecalis, Klebsiella pneumonia и Pseudomonas aeruginosa.

Среда «Salmonella» позволяет различать разные виды сальмонелл.

Среда «Candida» - позволяет по цвету колоний дифференцировать различные виды рода Candida: C. albicans, C. krusei,

C. tropicalis, C. glabrata.

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

Хромогенная среда Detection (18-24 ч.) МОЧЕВЫЕ ИНФЕКЦИИ

Escherichia coli

Staphylococcus aureus

Enterococcus faecalis

Proteus mirabilis

Pseudomonas aeruginosa

Klebsiella pneumoniae

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов