ilovepdf_merged
.pdf
Принцип окраски по Граму
В основе окраски по Граму лежит различие в строении клеточной стенки (КС) бактерий.
- Грамположительные бактерии имеют толстую,
многослойную КС, поэтому при окраске комплекс
генцианфиолетовый-йод прочно связывается с КС, и не отмывается спиртом. Бактерии красятся
в сине-фиолетовый цвет.
- Грамотрицательные бактерии имеют тонкую,
малослойную КС, поэтому при окраске комплекс генцианфилетовый-йод непрочно связывается с КС, и отмывается спиртом. Бесцветные бактерии
красятся фуксином в розово-красный цвет.
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Контроль окраски по Граму
При окраске по Граму неизвестной бактерии на одном стекле готовят три мазка из разных культур
(для контроля).
Мазок в середине стекла готовят из изучаемой культуры, а по концам стекла с одной стороны:
-из культуры стафилококка (заведомо грамположительная – окраска сине-фиолетовая),
ас другой
-из культуры кишечной палочки (заведомо грамотрицательная - окраска розово-красная).
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Высокая устойчивость спор бактерий к внешним факторам связана с:
1. Толстая пятислойная оболочка.
2. Высокое содержание липидов (в 3 раза больше, чем в вегетативной
клетке).
3. Оболочка пропитана солями Са.
4. Низкое (около 15%) содержание воды.
В связи с устойчивостью спор к обычным красителям, используют интенсивные способы окраски. Применяют едкий 10%-ый карболовый фуксин с многократным нагреванием мазка. Обесцвечивание проводят серной кислотой (вместо этанола). Препарат докрашивают метиленовым синим. Результат – синие бактерии и контрастные красные споры.
Окраска по Граму
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Рисунки к занятию 3
окраска по Граму
стафилококк |
E. coli |
|
сарцина |
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов |
|
Рисунки к занятию 3
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Занятие 4. Питательные среды. Культивирование микроорганизмов. Выделение чистой культуры бактерий.
Наумов Г.Н.
доцент кафедры микробиологии КубГМУ
ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ
служат для выращивания микроорганизмов, выделения их из окружающей среды и изучения их свойств.
Выращивание микробов на питательных средах является важнейшим этапом микробиологической работы и часто определяет результат исследования.
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов