ilovepdf_merged
.pdf
Схема выделения чистой культуры облигатных анаэробов.
•Взятие исследуемого материала осуществляется шприцем с притертым поршнем, после чего материал вносят в пробирку с транспортной средой.
•Выделение чистой культуры проводится со строгим соблюдением анаэробных условий на всех этапах исследования.
1-й этап – получение изолированных колоний.
•Готовят ряд разведений исследуемого материала и делают посев на чашки Петри со средой КАБ или другой питательной средой для культивирования анаэробов.
•Посевы инкубируют в микроанаэростатах, заполненных газовой смесью, при температуре 37 °С в течение 48-72 часов.
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Схема выделения чистой культуры облигатных анаэробов.
2-й этап - получение чистой культуры анаэробов.
На этом этапе:
1.Изучают морфологические и культуральные свойства выросших колоний.
2.Проводят параллельный рассев каждой отобранной колонии на две чашки Петри с питательной средой.
Одну чашку инкубируют в аэробных условиях, другую - |
в |
анаэробных условиях. |
|
3. Для дальнейшего исследования отбирают культуры, |
|
выросшие только в анаэробных условиях (так исключают |
|
факультативные анаэробы). |
|
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Схема выделения чистой культуры облигатных анаэробов.
3-й этап - идентификация выделенных облигатных анаэробов.
• Проводят биохимическую идентификацию в микротест-
системе, например АР1-20А. Суспензию выделенной культуры засевают на пластину АР-20А с набором биохимических тестов, инкубируют в анаэробных условиях в течение 48 часов, учитывают биохимические свойства культуры по изменению окраски индикаторов системы и определяют ее родовую и/или видовую принадлежность.
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Рисунки к занятию 5
Sarcina
Латинское морфологическое название |
Латинское морфологическое название |
|
выделенной культуры |
||
бактерий из колонии |
||
|
Метод выращивания анаэробов по Фортнеру
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
АРХЕИ
Археи - (от латинского Archaea - извечный, древний, первозданный, старый) домен живых организмов. Термин “архей” предложил в 1872 году американский геолог Джеймс Дана. Домены - относительно новый способ классификации. Трёхдоменная система изобретена в 1990 году. Карл Вёзе предложил трёхдоменную систему: археи, бактерии и эукариоты. Археи представляют собой одноклеточные микроорганизмы, не имеющие ядра, а также каких-либо мембранных органелл.
Археи отличаются по строению клеточной стенки и ряду генетических и биохимических признаков от прокариотических бактерий (эубактерий).
По устоявшейся классификации в настоящее время выделяют 5 типов архей:
•Crenarchaeota — термофилы, термоацидофилы, серные анаэробные бактерии;
•Euryarchaeota — метаногенные и галофильные археи;
•Nanoarchaeota — единственный известный представитель Nanoarchaeum equitans;
•Korarchaeota — ДНК обнаружена в геотермальных источниках США, Исландии, на рисовых полях Японии, культивируемые виды пока неизвестны;
•Thaumarchaeota — в основном окислители аммония, как например, морской аммонийокислитель Nitrosopumilus maritimus и аммоний-окислитель преимущественно почвенного происхождения Nitrososphaera gargensis. Недавние филогенетические исследования, основанные на сравнительном анализе структур рибосомальных белков и других важнейших генов, подтвердили существование типа Таумархеот.
Иногда выделяют также шестой тип — Aigarchaeota.
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
Среда обитания
Археи живут в широком диапазоне сред обитания и являются важной частью глобальной экосистемы, могут составлять до 20 % общей биомассы.
Экстремофилы - выживают при высоких температурах, часто свыше 100 °C, обнаружены в гейзерах, маслосборниках.
Базофилы - приспособились к жизни в очень холодных условиях, в сильносолёных, сильнокислых и сильнощелочных средах, а также при высоком давлении — до 700 атмосфер.
Мезофилы – обитают в мягких условиях, в болотистых местностях, сточных водах, океанах и почве.
Форма архей
Отдельные клетки архей достигают от 0,1 до 15 мкм в диаметре и могут иметь различную форму: шара, палочки, спирали или диска. Некоторые кренархеоты имеют другую форму, например,
Sulfolobus— неправильной дольчатой формы; Thermofilum — тонкой нитевидной формы и меньше 1 мкм в диаметре, а Thermoproteus и Pyrobaculum почти идеально прямоугольные. Haloquadratum walsbyi — плоские квадратные археи, живущие в сверхсолёных водоёмах.
Строение архей
У архей обнаружены белки, родственные компонентам цитоскелета других организмов, а также показано присутствие филаментов в их клетках, однако у архей, в отличие от других организмов, эти структуры плохо изучены.
Размножение архей
Археи размножаются бесполо: бинарным делением, фрагментацией, почкованием. В отличие от бактерий и эукариот, ни один известный вид архей не формирует спор.
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ
Доцент Наумов Г.Н., КубГМУ