ilovepdf_merged

Биохимические признаки, используемые

для идентификации бактерий

Способность выделять летучие соединения

(сероводород, индол) определяют с помощью индикаторных бумажек, вставленных под пробку в пробирку с жидкой культурой микроорганизма.

Фильтровальную бумажку на H2S пропитывают раствором ацетата свинца и высушивают.

При выделении сероводорода бумажка чернеет.

Фильтровальную бумажку на индол пропитывают раствором щавелевой кислоты и высушивают.

При выделении индола бумажка краснеет.

Образование аммиака. Для определения способности к образованию аммиака проводят посев в МПБ, и между его поверхностью и пробкой закрепляют полоску лакмусовой бумаги. При положительном результате

бумажка синеет.

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

ВЫДЕЛЕНИЕ ЛЕТУЧИХ СОЕДИНЕНИЙ

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

2. Система индикаторных бумаг (СИБы).

Принцип действия: диски фильтровальной бумаги, пропитанные питательными средами (питательная основа + субстрат + индикатор) и высушенные, хранятся во флаконах. В лаборатории диски раскладываются в стерильные пробирки и заливаются густой суспензией исследуемой культуры в физрастворе. Учет проводят после 18-24 часовой инкубации в термостате по изменению цвета индикатора.

3. Системы автоматизированной идентификации. Принцип действия тот же, что и в предыдущем пункте, однако инкубация панелей, учет результатов и идентификация проводятся при помощи компьютера. Примеры: МЗ-2 (США); BIOSCREEN (Финляндия);

SEPTOR (США)

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

БИОХИМИЧЕСКАЯ ВИДОВАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

Тест-системы для биохимической видовой идентификации:

▪Микроген Strep-ID (MID-62)

▪Микроген GN-ID A (MID-64)

▪Микроген GN-ID B (MID-65)

▪Микроген Bacillus-ID (MID-66)

▪Микроген Listeria-ID (MID-67)

▪ Микроген Staph-ID (MID-69)

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

БИОХИМИЧЕСКАЯ ВИДОВАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

2. Внесение суспензии в лунки стрипа

3. Внесение минерального масла и других реагентов

1.Получение

суспензии

4. Регистрация результата

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

Автоматические биохиманализаторы бактерий

(Vitek 2, BacT/ALERT 3D и др.)

- позволяет проводить идентификацию бактерий в автоматическом режиме. Выделенные колонии бактерий суспендируют и помещают в луночки микрокарт,

которые устанавливают в прибор. Идентификация проводится в автоматическом режиме в течение 5-6 часов. Результаты обрабатываются компьютерной программой и сравниваются с видовыми характеристиками из огромной базы данных.

Проводится оценка % совпадения культуры с эталоном. Результат выводится на монитор компьютера и распечатывается в бумажном виде.

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

АВТОМАТИЧЕСКИЕ АНАЛИЗАТОРЫ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ

Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов

МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

•Времяпролетная масс-спектрометрия с матричноассоциированной лазерной десорбцией/ионизацией (MALDI-TOF MS) используется

в клинической диагностике для классификации и идентификации микроорганизмов.

•MALDI-TOF масс-спектрометрия определяет соотношение масса/заряд для отдельных частиц в биоаналите и позволяет получить бактериальный спектр в течение нескольких минут.

•База данных используется для сравнения полученных масс-спектров неизвестных микроорганизмов со спектрами достоверно идентифицированных микроорганизмов из базы данных. В ходе сравнения на основе корреляции полученных пиков, их интенсивности высчитывается коэффициент соответствия.

•Метод может быть использован для идентификации микроорганизмов различных родов, видов, также как для идентификации штаммов внутри вида.

•Данный метод является более эффективным методом идентификации бактерий и грибов, чем большинство биохимических тестов.

•Это довольно важно для улучшения качества ухода за больными и снижения расходов на здравоохранение, так как данная технология может серьезно увеличить скорость и точность идентификации болезнетворных микроорганизмов и, соответственно, лечения