III. Демонстрация.

1. Микроорганизмы, образующие пигменты.

2. Рост при поверхностном и глубинном культивировании мицелиальных грибов и дрожжей на жидких питательных средах.

Лабораторная работа №6

Влияние физических и химических факторов

на микроорганизмы

Стерилизация, асептика, антисептика, дезинфекция

I. Вопросы для обсуждения.

1. Факторы (физические, химические), обеспечивающие оптимальные условия роста и развития микроорганизмов.

2. Повреждающее действие на микроорганизмы:

- физических факторов (высоких и низких температур, ультрафиолетового и ионизирующего облучения, высушивания, ультразвука, осмотического давления) на спорообразующие и неспорообразующие бактерии, мицелиальные грибы, дрожжи;

- химических веществ: ПАВ, неорганических и органических кислот, соединений тяжелых металлов, спиртов, фенола, окислителей и т.д. Механизм противомикробного действия этих веществ.

3. Понятия асептики, антисептики, дезинфекции.

4. Стерилизация (определение понятия). Основные методы, аппаратура и режим стерилизации.

5. Контроль эффективности работы стерилизационных устройств.

II. Работа, выполняемая студентами.

1. Задача 2. Определение влияния высоких и низких температур, УФ облучения, действия различных антисептиков на споровые и неспоровые бактерии.

• Приготовление бактериальной взвеси по стандарту на 1 млрд. микробных клеток из исследуемой культуры.Для этого в пробирку с 4-5 мл физиологического раствора асептично внести петлей небольшое количество биомассы культуры, равномерно распределить в этом объеме и сравнить мутность полученной взвеси с мутностью бактериального стандарта; в случае недостаточной или избыточной концентрации клеток во взвесь добавить соответственно биомассу или физиологический раствор.

• Полученную взвесь стерильно разлить в 3 пробирки: первую пробирку (1 –2 мл взвеси) нагревать при 80С⁰в течение 20 мин, вторую пробирку (1 –2 мл) прокипятить при 100С⁰, третью пробирку (0,5 мл) поместить в холодильник (0С⁰в течение 20 мин); после этого делают высев на соответствующий сектор чашки Петри с МПА, на контрольный сектор сеют исходную взвесь.

• 0,2 мл (2-3 капли) приготовленной взвеси поместить в пробирки с раствором антисептика (в протоколе зафиксировать название и концентрацию антисептика), выдержать 1 мин, 5 мин и 10 мин, после экспозиции сделать высев на соответствующие сектора чашки Петри с МПА.

• После посева чашки Петри помещают в термостат при температуре 37С⁰на 24 часа.

2. Задача 3. Проверка стерильности лабораторной посуды.

Студенту выдаются две внешне одинаковые пробирки: одна из них стерильна, другая нет. С помощью влажных стерильных тампонов необходимо сделать “смыв” со стенок пробирок и посев на соответствующий сектор чашки Петри с МПА, чашки отдать на рост в термостат на 37С⁰(работа выполняется бригадой из 3-х человек).

3. Просмотр демонстрации, оформление протокола и уборка рабочего места.

III. Демонстрация.

1. Лекарственные средства, простерилизованные различными методами.

2. Полимерные медицинские изделия (одноразовые шприцы, системы для переливания крови), простерилизованные методом радиационной стерилизации.

3. Различные системы для контроля эффективности стерилизации.

4. Результат действия УФ лучей на микроорганизмы.

Лабораторная работа №7

Вирусы и бактериофаги

I. Вопросы для обсуждения.

1. Общая характеристика вирусов. Строение вириона.

2. Этапы взаимодействия вирусов с клеткой хозяина.

3. ДНК- и РНК-содержащие вирусы и их роль в патологии человека.

4. Характеристика бактериофагов; вирулентные, умеренные фаги. Применение бактериофагов.

5. Контрольная работа по теме “Вирусы”.

II. Работа, выполняемая студентами.

1. Определить эффективность действия физических и химических факторов по результатам посевов, результаты оформить в виде таблицы и сделать соответствующие выводы (задача 1).

Культура	Температура, 0С			Антисептик, время выдержки в мин.			Контроль
	-5	+80	+100	1	5	10
St. aureus B. subtilis E. coli

2. Учесть результаты задачи 2.

3. Задача 4. Определение вида культуры микроорганизмов с помощью бактериофага.

Для этого используют культуру бактерий, выросших на МПБ, которую засевают на чашки Петри с МПА “газоном” с помощью шпателя Дригальского. Затем на поверхность засеянной среды наносят петлей в соответствующие сектора небольшие капли колифага, стафилофага, субтилисфага и помещают на рост в термостат при 37⁰С на 24 часа.

4. Просмотр демонстрации, оформление протокола и уборка рабочего места.