Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Методическое пособие по биохимиидля стоматол..doc
Скачиваний:
5
Добавлен:
10.11.2019
Размер:
613.38 Кб
Скачать

Аудиторная работа:

Лабораторные работы:

1. Количественный анализ желудочного сока (определение свободной, связанной hCl и общей кислотности).

Желудочный сок – секрет слизистой желудка – прозрачная бесцветная (иногда желтоватая) жидкость с резко кислой реакцией. В состав желудочного сока входят: вода, белки, ферменты, HCl, муцин, NaCl, кислые фосфорнокислые соли.

При исследовании желудочного сока принимают во внимание цвет, содержание слизи, наличие крови, желчи, кислотность.

Соляную кислоту, связанную с белками и продуктами их переваривания, условно называют связанной HCl, несвязанную свободной HCl, сумму обеих – общей HCl. Сумма всех кислореагирующих соединений (свободной, связанной HCl, органические кислоты, кислые однозамещенные фосфаты) составляют общую кислотность желудочного сока.

Кислотность желудочного сока выражают в мл 0,1 н раствора едкого натра, затраченного на нейтрализацию 100 мл желудочного сока в присутствии фенолфталеина и диметиламиноазобензола. В условиях здоровья общая кислотность у взрослого человека – 40-60 Е (единиц), свободная HCl – 20-40 Е, связанная HCl – 20-30 Е, pH желудочного сока – 1,5 – 2,55.

Клинико-диагностическое значение: увеличение содержания свободной HCl и общей кислотности (гиперхлоргидрия) наблюдается при язвенной болезни, гиперацидном гастрите; уменьшение тех же величин (гипохлоргидрия) наблюдается при гипоацидном гастрите, раке желудка. Полное отсутствие HCl (ахлоргидрия) встречается при атрофических гастритах, раке желудка.

Определение кислотности желудочного сока основано на титровании свободной HCl и кислореагирующих соединений 0,1 N раствором NaOH.

Пользуясь разными индикаторами, в одной пробирке определяют общую кислотность и содержание свободной HCl, а путем расчета и содержание связанной HCl. Общую кислотность выражают количеством мл N раствора NaOH, затраченного на титрование 100 мл желудочного сока в присутствии фенолфталеина. Нормальное значение общей кислотности 40-60 ед. (принятое обозначение - Е)

Ход работы. В коническую колбу на 100 мл внести 5 мл исследуемого сока, добавить 1-2 капли раствора диметиламиноазобензола и 2 капли раствора фенолфталеина. Пробу титровать 0,1 н раствором NaOH до появления оранжевой окраски – отметить затраченное количество мл NaOH (1-й пункт титрования).

Продолжать титрование до появления лимонно-желтой окраски и отметить количество мл NaOH, затраченное от начала титрования (2-й пункт титрования).

Продолжать титрование до появления розовой окраски и отметить количество мл NaOH, израсходованное от начала титрования (3-й пункт титрования).

Пример расчета:

1. Предположим, на титрование 5 мл желудочного сока до п.1 затрачено 1,5 мл NaOh.

Количество свободной HCl = 1,5 · 100, то есть 30 Е.

5

2. Для вычисления связанной HCl определяют общую кислотность на основании результатов титрования: известно, что количество NaOH, необходимое для связывания всей HCl, равно среднему арифметическому количества, пошедшего на титрование до п.2 и п.3. Если до п.2 затрачено 2, а до п .3 – 3мл, то М (средняя) = (2+3):2 = 2,5 мл.

Следовательно, содержание общей HCl в 100 мл желудочного сока составит: (2,5 х 100) : 5 = 50 Е

Связанная с белками кислотность определяется по разнице между количеством общей и свободной: 50 – 30 = 20 Е.

3. 3-й пункт титрования служит для определения общей кислотности. Если на титрование 5 мл желудочного сока затрачено 3 мл NaOH, то общая кислотность равна (3 · 100) : 5 = 60 Е.