- •Введение предмет и задачи микробиологии
- •Краткая история развития микробиологии
- •1 В 1698 г. Петр I посетил Левенгука и привез микроскоп в Россию.
- •1 Материалы XXVI съезда кпсс. М.: Политиздат, 1981, с. 170.
- •Глава 1 морфология и систематика микроорганизмов
- •Бактерии Общая характеристика
- •1 Микрометр (мкм) равен 0,001 мм.
- •1 Нанометр (нм) равен 0,001 микрометра.
- •Основы систематики бактерий
- •1 Информационный бюллетень в.М.О. При ан ссср «Одобренные списки названий бактерий», 1982.
- •2 Международный кодекс номенклатуры бактерий. М.: Наука, 1978.
- •Часть 2. Скользящие бактерии. Такие бактерии передвигаются путем скольжения (ползающие). Скользящие бактерии делят на два порядка:
- •Грибы (mycota или fungi) Общая характеристика
- •Систематика грибов
- •Дрожжи Общая характеристика
- •Основы систематики дрожжей
- •Глава 2 физиология микроорганизмов
- •Понятие об обмене веществ
- •Химический состав микроорганизмов
- •Ферменты микроорганизмов Общая характеристика
- •Классификация ферментов
- •Использование микробных ферментов
- •Конструктивный обмен – питание микроорганизмов Поступление питательных веществ в клетку
- •Типы питания микроорганизмов
- •Энергетический обмен у микроорганизмов
- •Аэробные микроорганизмы
- •Анаэробные микроорганизмы
- •Использование энергии микроорганизмами
- •Глава 3 влияние факторов внешней среды на микроорганизмы
- •Физико-химические факторы Влажность среды
- •Концентрация растворенных веществ в среде
- •Физические факторы Температура среды
- •110°С (по данным в. И. Рогачева)
- •Глава 4
- •Глава 5 патогенные микроорганизмы
- •Глава 6 микробиология воздуха, почвы, воды
- •Глава 7 микробиология и санитария пищевых продуктов
- •Глава 1. Морфология и систематика микроорганизмов...... 10
- •Глава 3. Влияние факторов внешней среды на микроорганизмы ... 74
- •Глава 5. Патогенные микроорганизмы........, ... 14
- •Глава 6. Микробиология воздуха, почвы, воды..........166
- •Глава 7. Микробиология и санитария пищевых продуктов.....175
Физические факторы Температура среды
Температура среды – один из основных факторов, определяющих возможность и интенсивность развития микроорганизмов.
Каждый микроорганизм может развиваться лишь в определенных пределах температуры; для одних эти пределы узкие, для других – относительно широкие и исчисляются десятками градусов.
Для каждого организма различают три кардинальные точки: минимум – температура, ниже которой не происходит рост микроорганизмов, максимум – температура, выше которой рост не происходит; оптимум – наилучшая температура для роста микроорганизмов. Кардинальные температурные точки для размножения некоторых микроорганизмов (по данным литературы и автора) приведены в табл. 4.
По отношению к температуре микроорганизмы подразделяют на три группы: психрофилы, мезофилы и термофилы.
Психрофилы, или холодолюбивые микроорганизмы, хорошо растут при относительно низких температурах. Для них характерны: минимум в пределах от –10 до 0 °С, оптимум 10–15 °С и максимум около 30 °С. К ним относят, например, организмы, обитающие в почве полярных стран, в северных морях, океанах, на охлажденных и замороженных продуктах.
Термофилы, или теплолюбивые микроорганизмы, лучше развиваются при относительно высоких температурах. Температурный минимум для них не ниже 30 °С, оптимум 55–65 °С, максимум около 70–80 °С, а для некоторых и более. Из горячих водоисточников Камчатки выделена палочковидная неспороносная бактерия с температурным оптимумом
Таблица 4
|
Кардинальные точки температуры, °C |
||
Названия микроорганизмов |
минимум |
оптимум |
максимум |
Бактерии: Streptococcus lactis, subsp. diacetilac-tis ............... |
8–10 5 20 6–10 8 4 От 2 ДО –2 29 5-8 5–10 2 От –5 до 2 От –5 ДО 1 От –3 ДО 2 7–10 5–6 6–8 4–6 4 23–25 0,5–5 |
30–35 25 40–42 37 30 34 20–25 30–45 30–35 18–21 22–25 24–25 22–24 33–37 30–35 30–35 24–26 22–25 40 20–30 |
40–45 40 |
Lactobacillus bulgaricus....... Escherichia coli Acetobacteraceti, subsp. orleanensis . . Acetobacter aceti ......... |
50 50 36–39 42 |
||
Mycobacterium tuberculosis..... Bacillus subtilis .......... |
41–45 41 55–60 |
||
Clostridium botulinum (различные Грибы: Botrytis cinerea .......... |
50–55 26 30–33 |
||
Aspergillus niger......... |
30–32 33–34 40 43 |
||
Aspergillus candidus ........ Aspergillus flavus ......... |
40–43 40 44 |
||
Aspergillus repens ......... |
36–38 |
||
|
33 |
||
|
55 60 |
||
|
40–50 |
70–80 °С, которая оставалась жизнеспособной даже при температуре воды 90 °С. Термофилы встречаются, например, в горячих водных источниках, в самонагревающихся скоплениях различных органических материалов (зерна, сена, навоза и др.), в сооружениях по переработке осадков сточных вод (см. с. 174). Обитают они в поверхностных слоях почвы, в кишечнике человека и животных; встречаются в продуктах, прошедших тепловую обработку.
Мезофилы – микроорганизмы, для которых температурный минимум около 5–10 °С, оптимум 25–35 °С, максимум в пределах 45–50 °С. Одни мезофилы являются термоустойчивыми, т. е. способны развиваться при относительно высоких температурах (50–60 °С), а другие – холодоустойчивыми, или психротрофными, так как могут развиваться при температурах, близких к 0 °С и даже немного ниже.
Большинство наиболее распространенных в природе бактерий, грибов и дрожжей, в том числе многие возбудители заболеваний и отравлений человека, относят к мезофильным организмам.
Среди термофилов и психрофилов преобладают бактерии.
Оптимальные и предельные температуры для микроорганизмов обычно соответствуют оптимальным и предельным температурам активности их ферментов. Установлено, что у холодоустойчивых микроорганизмов ферменты, в частности ферменты энергетического обмена, термочувствительны. У этих микроорганизмов обнаружены ферменты с температурным оптимумом около 10 °С. Ферменты термофилов термостабильны, наиболее активны при 50–60 °С, некоторые длительно не инактивиру-ются при 80–90 °С. По сравнению с мезофилами у термофилов более термостабильны белки клеток, а в цитоплазматиче-ской мембране больше липидов и несколько иной их состав.
Кардинальные температурные точки, определяющие размножение микробов и другие процессы (спорообразование, брожение и др.), для одних и тех же организмов могут быть разными. Эти температурные точки могут колебаться для одного и того же вида в зависимости от других условий развития.
Отношение микроорганизмов к высоким температурам. Повышение температуры среды по сравнению с оптимальной сказывается на микроорганизмах более неблагоприятно, чем понижение ее. Отношение микроорганизмов к температурам, превышающим максимальную для их развития, характеризует их термоустойчивость. У разных микроорганизмов она очень различна. Гибель наступает не мгновенно, а во времени. Температуры, немного превышающие максимальную, вызывают явление «теплового шока». При недлительном пребывании в таком состоянии клетки могут реактивироваться, при длительном – наступает их отмирание. Большинство бесспоровых бактерий отмирают при нагревании во влажном состоянии до 60–70 °С в течение 15–30 мин, а при нагревании до 80– 100 °С – от нескольких секунд до 1–2 мин. Дрожжи и плесени погибают также довольно быстро при температуре 50– 60 °С. Исключение составляют некоторые осмофильные дрожжи, которые выдерживают нагревание до 100 °С в течение нескольких минут.
Таблица 5
Названия бактерий |
Время отмирания спор при нагревании до 100 °С, мин |
Bacillus cereus ......... |
3–4 5–10 15–16 60–180 300–360 510–540 460–720 |
|
|
Clostridium botulinum ...... Bacillus stearothermophilus .... |
Наиболее термоустойчивыми являются бактериальные споры. У многих бактерий они способны выдерживать температуру кипения воды в течение нескольких часов. Во влажной среде споры бактерий гибнут при 120–130 °С через 20– 30 мин, в сухом состоянии – при 160–170 °С через 1–2 ч. Термоустойчивость спор различных бактерий неодинакова; особенно устойчивы споры термофильных бактерий (табл. 5).
С повышением температуры ее губительное действие быстро возрастает. По данным Эсти и Мейера, споры Clostridium botulinum отмирали: при 100 °С–через 330 мин, при 105 °С – через 100, при 110 °С – через 32, при 115 °С – через 10, при 120 °С –через 4 мин.
Споры большинства дрожжей и плесеней по сравнению со спорами бактерий менее устойчивы к нагреванию и погибают довольно быстро при 65–80 °С, а споры некоторых плесеней выдерживают нагревание до 100 °С. Однако не все клетки или споры даже одного вида микроорганизмов отмирают одновременно, среди них встречаются более и менее устойчивые.
Термоустойчивость одних и тех же микроорганизмов может, кроме того, изменяться в зависимости от свойств среды (рН, концентрации и др.), в которой производится нагревание.
Отмирание микроорганизмов при нагревании во влажной среде наступает вследствие происходящих необратимых изменений в клетке. Главными из них являются денатурация белков и нуклеиновых кислот клетки, а также инактивация ферментов; возможно повреждение цитоплазматической мембраны.
Высокая термоустойчивость бактериальных спор обусловлена, по-видимому, малым содержанием в них свободной воды. Предполагается также, что устойчивость спор к высоким температурам связана с содержанием в них дипиколиновой кислоты (пиридин-2,6-дикарбоновая кислота) и кальция. Эта кислота в виде кальциевой соли обнаруживается только в термоустойчивых спорах.
При воздействии на клетки сухого жара (без влаги) гибель происходит в результате активных окислительных процессов.
На губительном действии высоких температур основаны многие приемы уничтожения микробов в пищевых продуктах и в различных других объектах, например кипячение, варка, обжарка, бланширование продуктов питания, пропаривание производственного оборудования.
В пищевой промышленности широко применяют два способа воздействия высоких температур на микроорганизмы: пастеризацию и стерилизацию.
Пастеризация – это нагревание продукта чаще при температуре 63–80 °С в течение 20–40 мин. Иногда пастеризацию производят кратковременным (в течение нескольких секунд) нагреванием до 90–100 °С. При пастеризации погибают не все микроорганизмы. Некоторые термоустойчивые бактерии, а также споры многих бактерий остаются живыми. В связи с этим пастеризованные продукты следует немедленно охлаждать до температуры не выше 10 °С и хранить на холоде, чтобы задержать прорастание спор и развитие сохранившихся клеток. Пастеризуют молоко, вино, пиво, икру, фруктовые соки и некоторые другие продукты.
Стерилизация – это нагревание при температурах, которые в течение определенного времени вызывают гибель всех вегетативных клеток микроорганизмов и их спор. Стерилизации подвергают различные баночные консервы (см. с. 239), многие предметы и материалы, используемые в медицинской и микробиологической практике. Процесс проводится при температурах 112–125 °С в течение 20–60 мин в специальных приборах – автоклавах (перегретым паром под давлением) или при 160–180° С в течение 1–2 ч в сушильных шкафах (сухим горячим воздухом).
Многочисленными исследованиями по изучению кинетики отмирания клеток во время нагревания (как и при воздействии многих других губительно действующих факторов) установлено, что отмирание во времени протекает с определенной закономерностью. Если построить график в полулогарифмической системе координат, то «кривая выживаемости» в большинстве случаев представится прямой линией (рис. 23). Такая прямая линия показывает, что при постоянной температуре в каждый последующий равный интервал времени отмирает одинаковая доля (%) клеток (спор) по отношению к числу выживших.
Таким образом, отмирание клеток имеет логарифмический порядок и может быть выражено уравнением
где К – константа процесса;
t– продолжительность воздействия;
А – начальное число бактерий;
В – число бактерий, оставшихся после воздействия данной температуры. Из уравнения следует, что эффективность стерилизации зависит от количества микроорганизмов, находящихся на стерилизуемом объекте: чем оно выше, тем больше остается живых, следовательно, для уничтожения всех потребуется длительное нагревание при данной температуре (табл. 6).
Рис. 23. Кривая выживаемости
спор Bac. aerothermophilus при