3.1.2. Распределение бтш70 у линий дрозофилы с полиморфизмом по гену limk1 после теплового шока
Для моделирования стрессорной ситуации мы использовали ТШ. Рассмотрим представленное распределение БТШ70 в нервно-мышечных контактах линии дикого типа Canton-S после воздействия ТШ (рис. 6).
Рис. 24. Локализация БТШ70 в нервно-мышечных контактах у линии Canton-S после воздействия ТШ. Х63. Суммарное изображение трёх слоёв – 3 мкм. Зеленый – антитела к HRP. Красный - антитела к БТШ70. Merge – сводное изображение HRP и БТШ70.
В нервно-мышечных контактах линии дикого типа Canton-S под действием ТШ интенсивность окрашивания антителами к БТШ70 по сравнению с интактным контролем возрастает, т.е. увеличивается количество этого белка в ответ на стресс. БТШ70 сохраняет свою локализацию в глии.
После действия ТШ интенсивность окраски БТШ70 у Oregon-R увеличивается (рис. 25). Район глиальных клеток более обширен, чем зона НМК и нейрит, и значительно превышает таковой по сравнению с интактным контролем. БТШ70 обнаруживается в ядрах.
Рис. 25. Локализация БТШ70 в нервно-мышечных контактах у линииOregon-R после воздействия ТШ. Х63. Суммарное изображение трёх слоёв – 3 мкм. Зеленый – антитела к HRP. Красный - антитела к БТШ70. Merge – сводное изображение HRP и БТШ70.
У линии дикого типа Berlin после действия ТШ общая интенсивность окраски увеличивается (рис. 26). Но район глиальных клеток истончается. А в зоне НМК антитело к БТШ70 выявляется только вдоль мембраны. Ядра не окрашены.
Рис. 26. Локализация БТШ70 в нервно-мышечных контактах у линии Berlin после воздействия ТШ. Х63. Суммарное изображение трёх слоёв – 3 мкм. Зеленый – антитела к HRP. Красный - антитела к БТШ70. Merge – сводное изображение HRP и БТШ70.
В нервно-мышечных контактах линии agnts3 под действием ТШ БТШ70 сохраняет свою локализацию в глии (рис. 27). Интенсивность окрашивания антителами к БТШ70 по сравнению с интактным контролем уменьшается, т.е. количество этого белка в ответ на стресс становится меньше.
Рис. №27. Локализация БТШ70 в нервно-мышечных контактах у линии agnts3 после воздействия ТШ. Х63. Суммарное изображение трёх слоёв – 3 мкм. Зеленый – антитела к HRP. Красный - антитела к БТШ70. Merge – сводное изображение HRP и БТШ70.
Однако интенсивность окраски у исследуемых линий разная (рис. 28).
Рис. №28. Сравнение локализации БТШ70 в нервно-мышечных контактах у исследуемых линий после воздействия ТШ. Х63. Суммарное изображение трёх слоёв – 3 мкм. Зеленый – антитела к HRP. Красный - антитела к БТШ70. Merge – сводное изображение HRP и БТШ70.
Таким образом, в нервно-мышечных контактах личинок исследованных линий дикого типа Canton-S, Berlin, Oregon-R и у мутанта agnts3 БТШ70 после действия теплового шока сохраняет свою локализацию в глии. Однако, сводное изображение позволяет сделать вывод, что есть различие в интенсивности окраски у дикого типа и мутанта. После воздействия ТШ у линий дикого типа наблюдается усиление окраски антителами БТШ70, что свидетельствует о влиянии повышения температуры на количество БТШ70. Но у линии agnts3 после действия высокой температуры интенсивность окраски антителами к БТШ70 уменьшается, то есть количество БТШ70 после данного стрессорного воздействия не возрастает.