Визначення аскорбінової кислоти (вітамін с)

Аскорбінова кислота здатна легко вступати в окислювально-відновні реакції і відновлювати 2,6-дихлорфеноліндофенол, гексоциано(ІІІ)-феррат калію, нітрат срібла, метиленовий синій. При цьому окислена форма 2,6-дихлорфеноліндофенолу (синій колір) і метиленовий синій відновлюються до безбарвної лейкосполуки, а гексоциано(ІІІ)-феррат калію - K₃Fe(CN)₆ відновлюється до K₄Fe(CN)₆, який з іонами трьохвалентного заліза дає сіль Fe₄Fe(CN)₆ синьо-зеленого кольору.

Хід роботи.

У три пробірки вносять по 1 краплі розчину метиленового синього і по 1 краплі розчину Na₂CO₃. У першу вливають 5 крапель соку, у другу 5 крапель розчину аскорбінової кислоти, у третю - 5 крапель води і ставлять пробірки в термостат при 37-40С. Через 5 хвилин спостерігають зміну забарвлення у пробірках з соком та аскорбіновою кислотою.

Результати дослідів та висновки подаються у вигляді таблиці:

№ п/п	Біомолекули, що визначаються	Джерело біомолекул	Спостереження	Висновки

Лабораторна робота 2 визначення біомолекул в клітинах різного походження. Білки, ферменти

Мета роботи: ознайомлення з основними методами якісного визначення біомолекул та дослідження наявності біомолекул в клітинах різного походження.

Розділ і. Білки Короткі теоретичні відомості

Білки - високомолекулярні поліпептиди, які складають 10–18% загальної маси клітини. Тільки в організмі людини зустрічається близько 5 мільйонів типів білкових молекул, які відрізняються за своєю масою, структурою та функціями не тільки один від одного, але і від білків інших організмів.

Всі білки побудовані з 20 різних амінокислот, котрі поєднуються між собою за допомогою пептичного зв’язку утворюючи поліпептидні ланцюги. Послідовність амінокислот в поліпептидному ланцюзі називають первинною структурою білку. Після свого утворення поліпептидний ланцюг згортається у спіраль і утворює вторинну структуру білку. Третинна білкова структура формується завдяки взаємодії радикалів амінокислот. Більшість білків проявляють свою біологічну активність у вигляді третинної структури. Для виконання деяких функцій організму необхідним є участь білків з ще більш високим рівнем організації. Агреговані певним чином пептидні ланцюги, які виконують свої функції тільки в такому стані називають білками з четвертинною структурою (наприклад, гемоглобін).

Функції білків в клітинах найрізноманітніша: будівельна, каталітична, транспортна, захисна і т.д.

Матеріали й реактиви

Рослинна сировина яка містить білок (насіння гороху, сої, квасолі), м’ясо, альбумін курячого яйця, 5% розчин гідроксиду натрію (калію), 1% розчин сульфату міді.

Обладнання

Пробірки, піпетки на 1, 2 і 10 мл, ступка, фільтри паперові (жовта стрічка), фільтрувальна тканина, лійка.

Біуретова реакція

Якісне визначення білка біуретовою реакцією полягає у утворенні комплексу фіолетового кольору при взаємодії пептидних зв’язків білку з іонами міді (ІІ) у лужному середовищі.

Хід роботи

Подрібнити в ступці 2-3 г сировини. Залити 10 мл дистильованої води. Відфільтрувати. Налити в одну пробірку 2 мл отриманого розчину білку, в другу 2 мл дистильованої води. В обидві пробірки додати по 2 мл 5% гідроксиду натрію (калію) і змішати, потім додати 1 мл 1% розчину сульфату міді і перемішати. Спостерігається зміна забарвлення.