21.Выявление холестерола методом Либермана-Бурхарда. Принцип метода. Какая в норме концентрация холестерола в крови человека?
22.Изучение кинетики действия липазы поджелудочной железы. Какие соединения
в организме активируют липазу? Проиллюстрируйте ответ результатами практической работы.
23.Воспроизведите в эксперименте процесс переаминирования с использованием глутаминовой и пировиноградной кислот. Использование метода хроматографии для оценки результатов. Напишите уравнение соответствующих
реакций.
24.Определение активности аланинаминотрансферразы и
аспартатаминотрансферразы. Принцип метода. Значение определения этих ферментов для медицины.
25.Определение мочевины в моче цветной реакцией с диацетилмонооксимом.
Написать реакции образования мочевины в организме. 26.Определение аммиака в моче. Принцип метода.
27.Определение креатинина в моче цветной реакцией Яффе. При каких условиях наблюдается увеличение или уменьшение количества креатинина в моче?
28.Выявление желчных пигментов в моче реакцией Гмелина. Поясните процесс
образования желчных пигментов в организме.
29.Выявление уробилина в моче реакцией Богомолова. Принцип метода. Когда
уробилин присутствует среди желчных пигментов в моче?
30.Качественная реакция на фенилпировиноградную кислоту (проба Фелинга). Принцип метода. При каком заболевании фенилпировиноградная кислота появляется в моче?
МОДУЛЬ 3 МОЛЕКУЛЯРНАЯ БИОЛОГИЯ. БИОХИМИЯ МЕЖКЛЕТОЧНЫХ
КОММУНИКАЦИЙ.
БИОХИМИЯ ТКАНЕЙ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ФУНКЦИЙ
Тема 1. Строение и функции нуклеиновых кислот.
58
Актуальность темы. Изучение строения и свойств нуклеопротеидов имеет биологическое в общих чертах и практическое значение для медицины: формирует на молекулярном уровне понятия о наследственности и изменчивости, хранении и
реализации наследственной информации. Знание материала темы важно для понимания природы наследственных заболеваний, причины их возникновения, а
также подхода к лечению генетических болезней.
Цель и исходный уровень знаний.
Общая цель. Уметь применять знания о нуклеопротеидах для объяснения наследственных болезней, обоснования методов их лечения и профилактики.
Конкретные цели:
1.Объяснить строение и функции нуклеиновых кислот.
2.Сделать выводы относительно биологической роли нуклеиновых кислот.
3.Анализировать уровни структурной организации нуклеиновых кислот.
Исходный уровень знаний-умений.
Уметь писать формулы азотистых оснований, пентоз.
Ориентировочная карта для самостоятельного изучения студентами учебной литературы при подготовке к занятию.
Содержание |
и |
Указания к учебным действиям |
|
|||||
последовательность действий |
|
|
|
|
|
|
||
1. |
Практическое |
изучение |
1.1. В тетрадь протоколов практических |
|||||
качественного |
состава |
занятий выписать алгоритм лабораторной |
||||||
нуклеопротеидов. |
|
работы |
“Гидролиз |
и |
определение |
|||
|
|
|
составных частей нуклеопротеидов”. |
|
||||
|
|
|
1.2. Написать в тетрадь протоколов |
|||||
|
|
|
схему гидролиза полимера нуклеопротеида |
|||||
|
|
|
до составных компонентов. |
|
|
|||
|
|
|
1.3. |
В |
тетрадь |
самостоятельной |
||
|
|
|
подготовки выписать формулы составных |
|||||
|
|
|
компонентов ДНК, РНК, примеры строения |
|||||
|
|
|
их мономеров, схему связи мономеров |
|||||
|
|
|
ДНК и РНК. |
|
|
|
|
|
2. |
Строение и |
функции |
2.1. Биохимические функции НК и |
|||||
нуклеиновых кислот (НК). |
нуклеотидов. |
Роль нуклеотидов |
в |
|||||
|
|
|
образовании молекул НК. |
|
|
|||
|
|
|
2.2. |
Компоненты |
нуклеотидов |
и |
||
|
|
|
нуклеозидов. |
Минорные |
азотистые |
|||
|
|
|
основания и нуклеотиды. |
|
|
|
||
|
|
|
2.3. Свободные нуклеотиды и их |
|||||
|
|
|
биохимические функции: участие в |
|||||
|
|
|
метаболических реакциях (АТФ, НАД, |
|||||
|
|
|
НАДФ, ФАД, ФМН, ЦТФ, УТФ) и их |
|||||
|
|
|
регуляции (циклические нуклеотиды – 3’,5’- |
|||||
|
|
|
цАМФ, |
|
3’,5’-цГМФ). |
|
|
|
|
|
|
2.4. Нуклеиновые кислоты: структура, |
|||||
|
|
|
свойства, исторические этапы изучения. |
|||||
|
|
|
Первичная структура НК, полярность |
|||||
|
|
|
нуклеотидов, |
особенности |
первичной |
|||
|
|
|
структуры ДНК и РНК. |
|
|
|
||
59
2.5.Строение, свойства и
биологические функции ДНК. Экспериментальные доказательства
генетической роли ДНК (феномен трансформации). Молекулярная масса,
размеры и нуклеотидный состав молекул ДНК вирусов, прокариотов и эукариотов.
2.6.Вторичная структура ДНК, роль
водородных связей в ее образовании (правила Чаргаффа, модель Уотсона-
Крика). Антипараллельные цепи.
2.7.Третичная структура ДНК. Физикохимические свойства ДНК: взаимодействие
скатионными лигандами; гипохромный эффект; денатурация и ренатурация ДНК.
2.8.Строение, свойства и биологические эффекты РНК. Типы РНК: мРНК, тРНК, рРНК; особенности
структурной организации (вторичной и
третичной) разных типов РНК.
3. |
Молекулярная |
3.1. |
Хроматин: |
нуклеосомная |
|
организация |
|
ядерного |
организация, гистоны и негистоновые |
||
хроматина |
и |
рибосом |
белки. |
|
|
эукариотических клеток. |
3.2. Рибосомы: субъединицы, состав |
||||
|
|
|
белков и РНК. |
|
|
4. Нуклеопротеины. |
4.1. Строение и биологические функции |
||||
|
|
|
нуклеопротеинов. Особенности строения |
||
|
|
|
белков нуклеопротеинов. |
|
|
Индивидуальная самостоятельная работа студента:
1.Создать схему структурной организации нуклеиновых кислот.
2.Объяснить механизм образования двойной спирали ДНК.
3.Объяснить механизм образования шпилек в молекуле т-РНК.
4.Какие высокомолекулярные комплексы образуют нуклеиновые кислоты?
Алгоритм лабораторной работы.
Гидролиз и определение составных компонентов нуклеопротеидов.
Принцип метода. Определяют качественными реакциями в гидролизате нуклеиновых кислот дрожжей пентозы, азотистые основания, фосфорную кислоту,
белок.
1.Определение пентоз. К 1 мл гидролизата добавить 0,1 мл реактива Фелинга,
кипятить на водяной бане до образования красной окраски.
2.Определение азотистых оснований. К 0,3 мл гидролизата добавить 0,1 мл раствора азотнокислого серебра [AgNO3]; наблюдается образование белого осадка.
3.Определение фосфорной кислоты. К 2 мл гидролизата добавить 1 мл раствора
аммония молибденовокислого [(NH4)2MoO4], нагреть на водяной бане до образования желтого осадка. Добавление 1 мл раствора аскорбиновой кислоты дает синюю окраску.
4.Определение белка. К 1 мл гидролизата добавить 0,5 мл биуретового реактива. Наблюдается возникновение фиолетовой окраски.
60