• 29. Понятие о стерилизации, пастерилизации, дезинфекции, асептике и антисептике. Методы стерилизации и практическое использование.

*Стерилизация (от лат. sterilis — бесплодный), 1) полное освобождение различных веществ, предметов, пищевых продуктов от живых микроорганизмов. Наиболее распространённые методы С. — действие высоких температур, а для жидкостей — фильтрация, в результате которой клетки микроорганизмов задерживаются на фильтрах. Вегетативные клетки большинства бактерий, дрожжей и микроскопических грибов погибают при 50—70 °С в течение 30 мин, тогда как споры ряда бактерий выдерживают продолжительное кипячение. Этим объясняется применение высоких температур при С. Простейший способ С. — обжигание металлических и стеклянных предметов в пламени горелки. С. сухим жаром производится в сушильных шкафах при 160—165 °С в течение 2 ч. Таким методом стерилизуют лабораторную посуду, металлические предметы, некоторые порошкообразные, не портящиеся при нагревании вещества и т.п. С. водяным паром под давлением производят в автоклавах. Питательные среды для микроорганизмов стерилизуют при 4 am и 121 °С 20—30 мин или при 0,5 am и 112 °С — 20 мин.

* Пастеризация — процесс одноразового нагревания чаще всего жидких продуктов или веществ до 60 °C в течение 60 минут или при температуре 70—80 °C в течение 30 мин[1]. Технология была предложена в середине XIX века французским микробиологом Луи Пастером. Применяется для обеззараживания пищевых продуктов, а также для продления срока их хранения. При такой обработке в продукте погибают вегетативные формы микроорганизмов, однако споры остаются в жизнеспособном состоянии и при возникновении благоприятных условий начинают интенсивно развиваться.

* Асептика - комплекс мер предосторожности в клин., микробиол. или производственной работе, направленных на предупреждение заноса в рабочую зону посторонних микроорганизмов с тела человека, воздуха, инструментов или др. объектов внешней среды и развития нежелательных процессов (инфицирование человека или животного, контаминация питательных сред, посевов, к-р, посуды, вакцин и т.д.).

* Антисептика— система мероприятий, направленных на уничтожение микроорганизмов в ране, патологическом очаге, органах и тканях, а также в организме больного в целом, использующая механические и физические методы воздействия, активные химические вещества и биологические факторы.

* Дезинфекция — уничтожение патогенных микробов в окружающей человека среде. Методы и способы дезинфекции. различны, но они преследуют цели уничтожения не всех микроорганизмов, а только патогенных. Уничтожение возбудителей инфекционных заболеваний в переносчиках называют дезинсекцией, а в организме грызунов — источников инфекции — дератизацией.

• Действие био. факторов на микроорганизмы: антибиотики, фитонциды, бактериофаги. Их характеристика и механизм действия. Практическое использование биологических факторов в животноводстве и ветеринарии.

Действие биологических факторов на МО.В антогонизме с МО, где продукты обмена одних Мо убивают или угнетают другие МО. Кислые МО выделяют мол. кислоту, которая является консервантом и предотвращает действие гнилостных МО. (асептика, антисептика, дизенфикция) Антибиотики- в небольших кол-вах убив. МО. Могут выд-ся различными в-вами, используется не более 100 антибиотиков. Делятся на группы 1)плесневыми грибами и актиномицетами выделяются - пенициллин, тетрациклин и т.д, 2) вырабатываются бактериями - граммицидин, полимексин. 3) животного происх-я - интерферон. 4) растительного - фитонциды лука, чеснока, хрена, алоэ. Антибиотики делятся механизму действия - нарушают функцию клет. стенки, повреждают нукл. к-ты и белок. Антимикробный спектр - 1) узкий - пенициллин делится на Г+ - кокки, спирохеты. 2) Широкий - тетрациклин , Г+ - рикккетсии, хламидии и микоплазмы. Антибиотики находят применение в качестве стимуляторов роста организмов. Введение в рацион молодняка домашних животных и птиц небольших доз антибиотиков (пенициллина, биомицина) способствует ускорению их роста и снижению смертности. При взаимодействии с микробной клеткой антибиотик вызывает определенное нарушение процесса жизнедеятельности клетки, изменяет проницаемость клеточной оболочки или нарушает осмотическое свойство на ее поверхности, что приводит к лизису клетки, выводит из строя один или группу ферментов, что отражается на метаболизме клетки (синтез различных веществ, дыхание и т. п.). Антибиотики приостанавливают рост, репродуктивные процессы и другие функции.

• Применение антибиотиков в ветеринарии и животноводстве. Антибиотикорезистентность микробов.

А/б- это БАВ по отношению к МО, представл. Собой специфические продукты ж/д растений, животных, МО. Их называют БАВ изза того что она активны в малых концентрациях. А/б не обладают специфичностью действия, они обладают избирательностьтю. Пинициллин действуют на Г+ м/ф. Стрептомицин на Г- м/ф. Нистатин и Гризеофульвин действуют на грибы. А/б обладдают бактерицидным действием, другие бактериостатическим(подавляют рост и развитие). Классификация: 1 по Продуцентам различают А/б микробного происхождения. Продуцентами мб 1) микроскопич. Грибы( пинициллин, грезиофульвин). 2) А/б из актиномицетов: стрептомицин,, неомицин, эритромицин. 3) Грибы: полимексин.

Животного Происхождения: Эритрин из эритроцитов крови, Экмолин из тканей рыб, Спермин из спермы. Растит.происхожд.- фитонциды хорошо вырабатывают лук, чеснок( сативин и аллицин), редиска(рафанин). Синтетические и полусинтетич. :Ампициллин, цефалоспарин. 2. По спектру действия: противбактер., п/грибковые, п/опухолевые. 1) антимикр. Действие подавляет синтез клет. Стенки бактерий, при бактериостатическом действии обр-ся протопласты, сферопласты,L-форма бактерий. Стрептомицин подавляет синтез бактериального белка. А/б кот. Подавляют синтез нукл.к-т изменяют цитопроницаемость мембраны клетки. Эффективность Действия антибиотиков опред по диаметру зоны задержки роста микробов. Практич. Примен. А/б. Они обладают высоким терапевтич.действием при многих инф. Заболеваниях Они нашли примен. В ветеринарии, для лечения мыта лошадей, рожи свиней, мастита коров. Использ-т как стимуляторы роста молодняка с/х животных и птицы. В пищевой и консерв. Практике для сохранения скроропортящихся продуктов.

Резистентность микроорганизмов к антибиотикам может быть истинной и приобретенной. Истинная (природная) устойчивость характеризуется отсутствием у микроорганизмов мишени действия антибиотика или недоступностью мишени вследствие первично низкой проницаемости или ферментативной инактивации. При наличии у бактерий природной устойчивости антибиотики клинически неэффективны.Под приобретенной устойчивостью понимают свойство отдельных штаммов бактерий сохранять жизнеспособность при тех концентрациях антибиотиков, которые подавляют основную часть микробной популяции. Появление у бактерий приобретенной резистентности не обязательно сопровождается снижением клинической эффективности антибиотика. Формирование резистентности во всех случаях обусловлено генетически — приобретением новой генетической информации или изменением уровня экспрессии собственных генов. Причины развития устойчивости микроорганизмов к антибиотикам многообразны, среди них значимое место занимают нерациональность, и ошибочность применения препаратов.1. Необоснованное назначение антибактериальных средств. 2. Ошибки в выборе антибактериального препарата.Антибиотик должен выбираться с учетом следующих основных критериев: спектр антимикробной активности препарата in vitro, региональный уровень резистентности возбудителей к антибиотику, доказанная эффективность в контролируемых клинических исследованиях.3. Ошибки в выборе режима дозирования антибактериального препарата.Ошибки в выборе оптимальной дозы антибактериального средства могут заключаться как в недостаточной, так и в избыточной дозе назначенного препарата, а также неправильном выборе интервалов между введениями. 4. Ошибки комбинированного назначения антибиотиков.Одной из ошибок антибактериальной терапии внебольничных респираторных инфекций является необоснованное назначение комбинации антибиотиков. В современной ситуации при наличии широкого арсенала высокоэффективных антибактериальных препаратов широкого спектра показания к комбинированной антибактериальной терапии значительно сужены и приоритет в лечении многих инфекций остается за монотерапией.5. Ошибки, связанные с длительностью антибактериальной терапии.

• Бактериофагия и её применение в агодиагностике и фаготерапии инфекционных болезней животных.

Бактериофаги – вирусы. поражающие бактерий. Впервые это явление было открыто в 1917 г. В 1941 описали морфологию. Бактериофаги имеют головку в виде многогранника, внизу базальную пластинку, к которой прикрепляются нити и зубчики, головка содержит либо ДНК либо РНК, нуклеиновую кислоту окружает капсид, капсиды расположены симметрично. Все вирусы строгие внутриклеточные паразиты, с помощью зубцов и нитей бактериофаги прикрепляются к бактериальной клетке. В дистальной части фага выделяется фермент лизоцим, с помощью которого бактериофаг растворяет клеточную стенку бактерии и происходит впрыскивание н/к. Дальше н/к использует клетку для синтеза компонентов бактериофага. Вирулентные бактериофаги разрушают клетку, умренные фаги не вызывают гибели клетки. Геном фага встраивается в хромосому бактерии в виде профага и длительное время может там находиться. Бактериофаги обладают специфичностью действия. Их применяют при болезнях ЖКТ (как при дезентерии) и для определения вида бактерий. В ветеринарии Ф. используется при сальмонеллёзах животных, колибактериозе телят и поросят. Осуществляется в комплексе с др. лечебными средствами.

• Микрофлора почвы, её санитарно-гигиеническое значение.

*В почве живут и развиваются самые разнообразные микроорганизмы: амебы, инфузории, грибы, водоросли, актиномицеты, бактерии. Из структурных частей почвы для микробиологии особенно важно ее органическое вещество – гумус, состоящий из остатков животных и растительных организмов и обитающих в почве микробов. Поверхностный слой почвы беднее микробами, т.к. на них вредно воздействуют фаторы внешней среды: высушивание, ультрафиолетовое излучение, солнечный свет, повышенная температура и др. Наиболее многочисленны микроорганизмы в верхнем 5…15 – сантиметровом слое, меньше их на глубине 20…30 и минимальное на глубине 30…40 см. Почвы , богатые бактериями, биологически наиболее активны. На каждый гектар малоплодородной почвы приходится 2,5 …3т микробной массы, высокоплодородной- до 16т. Наиболее богаты микрофлорой возделоваемые ( культурные) почвы; бедны- песчаные, горные, а так же почвы , лишенные растительности. Цвет и запах почвы зависят так же от состава микроорганизмов. Запах почве придают определенные виды актиномицеты. К типичным почвенным бактериям относятся Bac. Mesentericus, Bac. Megathrrium. C. Tetani. и др. а так же термофильные , пигментные , непигментные и др микроорганизмы, составляющие иногда 80…90 % все микрофлоры почвы. В ряде случаев почва представляет собой резервуар для некоторых патогенных микробов, попадающих в нее с выделениями больных животных или трупами. Наиболее длительно живут спорообразующие микробы- возбудители столбняка, злокачественного отека, ботулизма; споры бацилл сибирской язвы могут сохраняться на протяжении десятилетий. При блогоприятных условиях микробы в почве не только выживают , но и долго сохрняют вирулентные свойства.

* Санитарно-гигиеническую оценку почвы производят по данным физического, химического, бактериологического и гельминтологического исследований. Характер и программа исследований определяются целью, с которой производят оценку почвы. В санитарно-гигиенической практике необходимость изучения почвы возникает: при строительстве населенных мест, животноводческих ферм и комплексов, промышленных предприятий, при устройстве колодцев, при выборе способов очистки твердых и жидких отбросов почвенным методом, при оценке эффективности их работы и т.д.

При полном санитарно-бактериологическом анализе исследование почвы включает определение следующих показателей:

1)общее число сапрофитных бактерий (микробное число);

2)число бактерий группы кишечной палочки;

3)количество анаэробов (Cl. Perfringens);

4)количество термофильных микроорганизмов, определяющих характер загрязнения (навоз, фекалии, сточные воды).

• Микрофлора воды. Источники инфицирования воды патогенными микроорганизмами. Самоочищение воды.

Вода- естественная среда обитания микробов, основная масса которых поступает из почвы воздуха с оседающей пылью , с отбросами, стоками промышленных и животноводческих объектов т.д. Особенно микроорганизмов в открытых водоемах и реках, нередко встречаются они в илистых отложениях океанов, морей , болот, минеральных водах. Их находят как в поверхностных слоях воды так и на глубине до 10 тыс.м. Качественный состав обитающих в воде микроорганизмов зависит в основном от свойств самой воды, поступления в нее сточных и промышленных отходов. К постоянно живущим в воде микроорганизмам относятся относятся Azotobakter, Nitrobakter, Micrococcus roseus, Proteus vulgaris, Spirillum. Кроме сапрофитов в воде могут присутсвовать возбудители инфекционных болезней животных и человека. * Определяют микробное число – кол.-во микробов в 1 мл. воды. Микробное число опред. методом последовательных разведений (обычно берут 10 пробирок), но количество разведений зависит от органолептических свойств воды. Чем чище вода, тем меньше разведений и наобарот. Определяют содержание колиморфных бактерий в опред. объёме воды. Колититр – наименьший объём воды, где обнаружена 1 кишечная палочка. Это косвенный показатель загрязнения воды патогенной микрофлорой. Есть метод мембранных фильтров – через стерильн.бумажный фильтр фильтруют различные объёмы воды, чем хуже вода, тем меньше объём. Фильтр кладут на среду Энда, помещают в термостат. * Микробиологические показатели для питьевой (водопроводной воды, подвергаемой очистке и дезинфекции) нормированы ГОСТ 2874—73.

Микробное число должно быть не более 100.

Коли-титр должен быть не менее 300.

Коли-индекс не должен превышать 3.