Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
вопросы по генетике(посл).doc
Скачиваний:
265
Добавлен:
18.05.2015
Размер:
692.74 Кб
Скачать

52. Генная, клеточная и хромосомная инженерия.

Новейшие методы генной инженерии применяются для выведе­ния штаммов бактерий и дрожжей, синтезирующих гормоны роста животных, интерферон человека, антиген вируса гепатита и других вирусов, необходимые для борьбы с инфекционными заболева­ниями. Развивается клеточная и генная инженерия высших расте­ний, позволяющая переносить гены одних видов и родов растений в другие. Например, при использовании культуры соматических клеток ген фазеолина (основного запасного белка) бобов перене­сен в клетки подсолнечника.

Гибридизация соматических клеток растений позволяет объ­единять геномы разл. видов.

Широкое использование трансформации эукариот, элементы парасексуального цикла в генетике эукариот, культивирование клеток многоклеточных организмов и т.д. объединяются в систему изменения генетического материала и создания организмов с новыми для них свойствами. Успехи генной инженерии в методах манипулирования генами на основе рекомбинантных ДНК, получаемых in vitro, а также методы клеточной инженерии открывают огромные перспективы в экспериментальной биологии и в создании новых форм организмов, полезных человеку.

Клеточная инженерия →культивирование кл. или тканей на спец. искусственных средах.

Подбор растения→ выделение экспланта → стерилизация → получение каллуса (недиф. соматич. кл.) (в среде с ауксинами и цитокининами)→ целое растение (новый состав питат. средыдля каждого вида свой). р: получить солеустойчивые растения→ среда с ↑содержанием солей (NaCl) до 1000 раст.кл. Большинство кл., не выдерживая ↑концентрации солей, гибнет, но отдельные выживают →целые растения. → селекции подвергаются КЛЕТКИ.

метод гаплоидов Гаметы (р: пыльцевые зерна) гаплоидны. Был разработан метод проращивания пыльцевых зерен на питательных средах в и получения из них гапл. раст. Затем удваивают (р: колхицин)→гомозиготные диплоидные растения готовые к селекции.

При методе комбинационной селекциив чистом виде гаметы берутся у гибридов. Гибридизация → гетерозиготные организмы→ длит. гомозиготизация → получение стабильных нерасщепляющихся форм (уходит ок. 10 лет.)

Хромосомная инженерия.

Замещение (замены) отдельных хромосом у растений или добавления новых. У диплоидного организма имеются пары гомологичных хромосом ( дисомик). Если в паре хромосом остается 1 → моносомик. 2+3 → трисомик, нет→ одной пары гомологичных хромосом нуллисомик. Такие манипуляции с хромосомами дают возможность заменять одну или обе гомологичные хромосомы, одного сорта (вида) на ту же пару хромосом, но из другого сорта (близкородственного вида). Полученные таким путем формы называются замещенными линиями. Другой методический прием состоит во введении (внедрении) в геном дополнительной пары хромосом другого вида растений, которые определяют развитие признака, отсутствующего у первого вида→ дополненные линии.

Генная инженерия. искусственный перенос нужных генов от одного вида живых организмов (бактерий, животных, растений) в другой вид, часто очень далекий во своему происхождению. Чтобы осуществить перенос генов (или трансгенез), необходимо выполнить следующие сложные операции:

  • выделение из клеток бактерий, животных или растений тех генов, которые намечены для переноса (или искусственный синтез генов)

  • создание векторов , в составе которых намеченные гены будут внедряться в геном другого вида. Такие конструкции кроме самого гена должны содержать все необходимое для управления его работой (промоторы, терминаторы) и гены-«репортеры», которые будут сообщать, что перенос успешно осуществлен; или встраивание гена-мишени в плазмиды бактерий, поражающих растения.

  • встраивание рекомбинантных ДНК (р РНК) в кл бактерий.

  • заражение растения.

  • внедрение генетических векторов сначала в клетку, а затем в геном другого вида и выращивание измененных клеток в целые организмы (регенерация).

  • Растения и животные, геном которых изменен в результате таких генно-инженерных операций, получили название трансгенных растений или животных.

  • В ГИобратную транскриптазу используют для получениякДНК— копииэукариотическогогена, не содержащейинтронов. Для этого из организма выделяют зрелуюмРНК, кодирующую соответствующий генный продукт (белок, РНК) и проводят с ней в качестве матрицы обратную транскрипцию. Полученную кДНК можнотрансформироватьв клетки бактерий для получения трансгенного продукта.