Биологическая активность флавоноидов и их производных.

Структурное многообразие этого класса позволило создать на их основе ряд высокоэффективных и малотоксических лекарственных препаратов, оказывающих капилляроукрепляющее, противовоспалительное, гепатопротекторное, антиаллергическое, антисклеротическое и другие виды действия.

Выступая в роли ловушек свободных радикалов, флавоноиды способны тормозить перекисное окисление липидов, благодаря чему они являются потенциальными антиоксидантными средствами.

Структура флавоноида значительно влияет на активность. Наличие большего числа гидроксигрупп в молекуле флавоноидов приводит к значительному увеличению антиоксидантной активности.

Гликозидирование флавонолов, так же как и флавонов, в целом, уменьшает их антиоксидантное действие.

Флавоноиды проявляют также выраженную противоопухолевую активность. Установлено, что более активны флавоноиды с максимально окисленным гетерокольцом – флавонолы. Среди флавонолов самый высокий противоопухолевый эффект проявляют вещества, содержащие три рядовые гидроксигруппы. Для флавонолов увеличение степени конденсации приводит к усилению противоопухолевых, антиокислительных и консервирующих средств [87; 160; 165; 181-183; 211-212; 222-224].

Спектр биологических эффектов флавоноидов достаточно широк и не ограничен только их антиоксидантным действием. В исследованиях in vivo и ex vivo флавоноиды обладают противоопухолевой, антиишемической, антиаллергической, противовоспалительной активностью выступают в качестве радиопротекторов [225-226].

Так, например, гепатопротекторный эффект силимарина и его главного изомера силибинина обусловлен не только антиоксидантной активностью данных флавоноидов, но и их мембрано-стабилизирующим и метаболическим действием [227].

1.4.3 Для выделения фенолов и фенолокислот из растительных экстрактов широко используют хроматографию на колонках с целлюлозой, силикагелем и полиамидом. Колонки с силикагелем элюируют обычно смесью диэтиловый эфир-петролейный эфир в соотношении (9:1), для колонок с целлюлозой используют 2% муравьиную кислоту, 2-10% уксусную кислоту, а также водно-спиртовые смеси в различных соотношениях. Полиамидные колонки элюируют обычно смесями хлороформ-метанол в различных соотношениях для полярных фенолов и фенолокислот, с увеличением полярности используют водноспиртовые и водно-ацетоновые смеси [228].

Изучение качественного и компонентного состава фенолов и фенолокислот часто проводят с использованием методов бумажной и тонкослойной хроматографии, а также ВЭЖХ.

Для хроматографирования фенолов на бумаге используют системы растворителей: н-бутиловый спирт-уксусная кислота-вода (40:12,5:29 и 4:1:5 органический слой), 2,6 и 15% уксусная кислота, фенол, насыщенный водой и этилацетат, насыщенный водой.

Для хроматографирования фенолокислот применяют системы растворителей: изопропиловый спирт-аммиак-вода (8:1:1), бензол-уксусная кислота-вода (6:7:3), бензол-пропионовая кислота-вода (2:2:1 верхний слой), бутанол-уксусная кислота-вода (8:2:2) [200].

Для ТСХ на готовых закрепленных сорбентах используют системы растворителей: толуол-этилацетат-муравьиная кислота (50:40:10), гексан-этилацетат (9:1), этилацетат-уксусная кислота-вода (2:1:1), бензол-диоксан-уксусная кислота (90:25:4), бензол-метанол-уксусная кислота (90:16:8).

В качестве сорбентов используется силикагель, целлюлоза, полиамид.

Для ВЭЖХ хроматографии фенолов используется колонка с YMC – AP сорбентом, и подвижной фазой ацетонитрил-вода (4:1), УФ-детектор при длинах волн 254 и 276 нм.

Системой, предназначенной для препаративного выделения фенолов, является колонка с LiChrosorbSi 60+хлороформ-метанол (9:1) в качестве подвижной фазы, с использованием фотодиодного детектора [200].

Фенолокислоты разделяют и анализируют на колонке с LiChrospher RP –C₁₈ с использованием подвижной фазы 0,1% трифторуксусная кислота-ацетонитрил с увеличением содержания последнего в смеси от 10 до 100% за 45 мин и фотодиодного детектора. Высокую селективность в исследовании фенолокислот показала система: колонка - LiChrospher RP –C₁₈, с линейным градиентом подвижной фазы метанол-уксусная кислота-вода от (10:2:88) до (90:2:8) за 30 мин и УФ детектирования при 276 нм [200].

Несмотря на большое разнообразие специфических реакций на все группы биологически активных веществ, они не могут дать полной информации о структуре веществ, поэтому более достоверным является комплексное использование специфических качественных реакций, химических и физико-химических методов.

В молекулах фенолов и фенолокислот в УФ-спектрах, как правило, наблюдается одна полоса: фенол – 272 нм, гидрохинон – 292 нм, резорцин – 276 нм, пирогаллол – 266 нм, галловая кислота – 270 нм, сиреневая кислота – 272 нм, протокатеховая кислота – 258, 292 нм, ванилиновая кислота – 257, 287 нм. [228].

Фенолкарбоновые кислоты обладают различными фармакологическими свойствами и некоторые из них используются в качестве лечебных средств. Так, бензойная, салициловая, хлорогеновая и кофейная кислоты проявляют антимикробную активность, производные кофейной кислоты оказывают желчегонное действие, соли салициловой и бензойной кислот обладают противовоспалительным действием, оксикоричные кислоты проявляют фунгицидную активность в отношении поверхностных дерматофитов [229].

Фенолкарбоновые кислоты обладают выраженным антиоксидантным действием и во многих окислительных системах по своей активности превосходят токоферолы и убихиноны [230].

Галловая кислота и ее сложные эфиры сочетают низкую токсичность и высокую антиокислительную активность [231], соли галловой кислоты обладают радиопротекторными свойствами и способны защищать геном клеток от лучевого поражения [232].

Эфиры галловой кислоты (метиловый, этиловый, пропиловый, бутиловый и додециловый) применяются в качестве пищевых антиоксидантов в США, Щвеции, Бельгии, Дании и других странах. Они, наряду с другими фенольными антиоксидантами, нашли широкое применение в парфюмерной промышленности в качестве добавок к кремам, а также в фармацевтической промышленности как соединения, повышающие устойчивость витаминов и других препаратов к окислению [232].

Эллаговая кислота проявляет выраженные антиоксидантные свойства, которые определяются наличием нескольких гидроксигрупп, способных инактивировать радикалы и связывать ионы железа [233 – 234].