10. Пояснити суть серологічної ідентифікації мікроорганізмів. Підібрати препарати, які використовують з цією метою. Принципи їх одержання.

Серологічна ідентифікація - це визначення (ідентифікація) невідомого антигену за допомогою відомих антитіл з використанням серологічних реакцій

Аглютинація являє собою процес склеювання корпускулярних антигенів (бактерії, еритроцити) при дії на них специфічних антитіл у присутності електроліту з утворенням аглютинату. Аглютинація - це спосіб виявлення та кількісного визначення Аг або Ат, заснований на їх здатності до формування видимих конгломератів Реакція аглютинації та склі Матеріали:

• Культура бактерій

• Адсорбована імунна діагностична сироватка для РА на склі

• 0,5% розчин ИаСІ

• Предметне скло

• Бак. петля Хід роботи

Облік результатів.

Позитивна реакція - утворення аглютинату.

Провести ідентифікацію культури грибів роду Candida, що забарвлені імунною сироваткою, міченою флуорохромом, в препараті за допомогою імунофлуоресцснтного методу (демонстраційна робота). Зробити висновок.

Пра постановці прямої :ЙФ досліяжуьшсий матеріал (культури грибів роду Candida) бактеріологічною петлею наносять на знежирене предметне скло, готують тонкий мазок, висушують його на повітрі, фіксують. На зафіксований препарат наносіть 1-2 крали флуоресціюючої сироватки і фарбують Його у вологій камері 20-30 хв. при температурі 25 С. Після інкубації препарат промивають 2-4 рази забуфереягим ізотонічним розчином, впродовж 10-15 хв. прополіскують дистильованою водою, висушують, наносять креплю нефлуорссціюючої олії і розглядають п люмінесцентному мікроскопі за допомогою імерсійного об'єктиву. Г Гри ньому гриби роду Candida дають яскраве світіння на темному фоні.

. Розгорнута реакція аглютинації, поставлена і метою сероідмггнфікжиії культури бактерій

Матеріали:

• Культура бактерій (суспензія)

• Імунна діаі поетична сиронаїка а робочому ріхзаедемиі (Г50). ткгр • 1:3200

• 0,5% розчин NaCI

• Пробірки, піпетки

• 

• +-Н-+ - повна аглютинація, рідина прозора, а на дні значна кількість білого осаду;

• +++ - рідина не зовсім прозора, осад менший;

• ++ - рідина непрозора, осад ще менший;

• + - рідина мутна, дуже незначний осад;

• - - рідина рівномірно мутна, як в контролі антигену; осад відсутній. Результат в цьому випадку вважають негативним.

Реакція імунофлуоресценції (РІФ) заснована на властивості флуоресціюючих антитіл специфічно з'єднуватись з гомологічним антигеном і викликати їх світіння в фіолетовій і ультрафіолетовій частині спектру люмінесцентного мікроскопу. РІФ специфічна, високочутлива, використовується в основному для ідентифікації антигену і може бути здійснена в кількох варіантах.

1. Пряма РІФ — заснована на використанні імунофлуоресціюючих сироваток проти кожного досліджуваного антигену.

2. Непряма РІФ — заснована на використанні двох різних сироваток. Спочатку на першому етапі вживають немічені антитіла проти досліджуваного антигену, а на другому етапі реакції утворений комплекс антиген-антитіло обробляють флуоресціюючою сироваткою, що містить антитіла проти гамма-глобулінів того виду тварин, на яких була одержана специфічна немічена сироватка.