Билет №6

1)

Ферменты катализируют окислительно-восстановительные ре­акции, лежащие в основе биологического окисления. Класс насчи­тывает 17 подклассов.

Подклассы 1.1. Дегидрогеназы: ферменты катализирующие реакции перено­са атомов водорода. а) Аэробные дегидрогеназы (катализируют перенос протонов и электронов непосредственно на кислород). Коферментами аэробных дегидрогеназ являются ФАД (флавинадениндинук-леотид) и ФМН (флавинмононуклеотид). Пример:

D-глюкопиранозаD-глюконолактон

Фермент: глюкозооксидаза. Кофермент: ФАД.Витамин: Рибофлавин.

б) Анаэробные дегидрогеназы катализируют перенос протонов

и электронов на промежуточный субстрат, но не на кислород.

Коферментами анаэробных дегидрогеназ являются НАД (нико-

тинамиддинуклеотид) и ФАД. fL^*/ рр Пример 1

Реакция:

СНоСНо

нс-он₊.. с=о

I+ НАД⁺ „ ,»|+ НАДН + Н⁺

соонсоон

МолочнаяПировиноградная

кислотакислота

Фермент: лактатдегидрогеназа. Кофермент: НАД.

Пример 2 Реакция:

соонсоон

^сн2_+ФАДjсн_+фАдн^

СНоНС

I^lI

соонсоон

СукцинатФумарат

Фермент: сукцинатдегидрогеназа. Кофермент: ФАД. ^uf(^

1.2. Цитохромы - ферменты, катализирующие перенос электро­нов. Они являются гемопротейнами, отличающимися друг от друга не только строением простетических групп, но и белковы­ми компонентами. В ходе каталитического процесса валентность железа, входящего в состав гема цитохромов, обратимо изме­няется:

Fe³⁺<^+e>Fe²⁺.Цитохромы Ь, с,, с, а и а₃ выполняют функцию переноса элект­ронов в митохондриях дыхательной цепи. Цитохром Р₄₅₀ - компо­нент микросомальной цепи окисления. 1.3. Каталаза и пероксидаза - ферменты, катализирующие раз

ложение пероксида водорода. Эти ферменты являются слож

ными белками-гемопротеинами. Пероксидаза для своей рабе

ты нуждаются в присутствии субстрата - донора водорода.

Пример 1

Реакция:

Н₂0₂+ Н₂0₂-> 2Н₂0 + 0₂-

Фермент: каталаза. Пример 2

Реакция:

2 Глутатион-SH+ Н₂0₂-» Глутатион-З-в-Глутатион + 2Н₂0

Фермент: глутатионпероксидаза.

3) Свидетельствует о наличии аминокислот и белков в моче

Биуретовая реакция

Универсальная реакция на обнаружение пептидной связи в бел­ках и пептида^. Биуретовую реакцию дают вещества, содержащие не менее двух пептидных группировок.

Принцип реакции Пептидная группа образует в щелочной среде с ионами Си²⁺ комплексное соединение фиолетового цвета с красным или синим оттенком в зависимости от числа пептидных связей. Интенсивность окрашивания пропорциональна количеству пептидных групп.

Проведение анализа В пробирку с раствором белка вносят 3 капли 10% NaOHи 1 каплюCuS0₄.

Нингидриновая реакция

Это универсальная реакция для обнаружения любых а-амино-групп, содержащихся в аминокислотах, пептидах, белках.

Принцип сс-Аминогруппа аминокислот, взаимодействуя с нингидрином, образует комплекс синего или сине-фиолетового цвета. При нагре­вании аминокислот с нингидрином происходит окислительное дез

минирование ос-аминогрупп и восстановление нингидрина. Вос­становленный нингидрин реагирует с аммиаком и другой молеку­лой окисленного нингидрина с образованием окрашенного продук-iii. Пролин и оксипролин дают продукт желтого цвета. Проведение анализа Раствор белка смешивают с 5 каплями раствора нингидрина.Пробирки нагревают и кипятят 1 минуту. Отмечают появление сине-фиолетового окрашивания.