2 курс / Гистология / РУКОВОДСТВО_ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ_ММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ_МЕТОДЫ
.pdf
Словарь
Количественный продукт – оценка, насколько эффективно поглощенный флуорохромом свет преобразован в флуоресценцию. Это отношение количества испускаемых фотонов к количеству поглощенных.
Коэффициент поглощения (ε) – показатель эффективности поглощения света флуорохромом
и устойчивости в возбужденном состоянии.
Лиганд – молекула, атом или ион, который связан с центральным атомом (чаще, атом металла) в сложных соединениях или хитатных комплексах.
Меченные антитела – см. «вторичные антитела».
Моноклональные антитела – иммунохимические антитела, секретированные одной плазмати-
ческой клеткой, которая прореагировала со специфическим эпитопом на антигене. Производятся коммерчески с использованием гибридом.
Моноспецифичность – имеет эффект только на определенной группе клеток или тканей или взаимодействует с одним антигеном, как моноспецифическое антитело.
Неиммунизированная сыворотка – сыворотка не иммунизированного животного.
Отрицательный тканевой контроль – образец ткани того же органа, не содержащий целевого антигена, обработанный первичными антителами.
Первичные антитела – первые антитела, используемые в процессе окраски.
Перекрестные взаимодействия – возможность антител взаимодействовать с другими антителами, кроме иммуногена. Термин не применим для характеристики взаимодействия антител между собой и с компонентами другой клетки или ткани.
Поглощающее покрытие – тонкая оптическая пленка, позволяющая минимизировать рефлекс, возникающий при перемещении света.
Поликлональные антитела – иммунохимически разные антитела, секретированные разными плазматическими клетками и взаимодействующие с несколькими эпитопами антигена.
Положительный контроль ткани – образец ткани, доказано положительно окрашивающийся при использовании первичных антител. При этом неспецифическое фоновое окрашивание должно быть сведено к минимуму. Отметьте, что для некоторых антигенов (например, простатспецифиче-
ский антиген), важно оценить вариабельность окрашивания ткани, для чего интенсивность окраски должна быть немаксимальная.
Синглетное и триплетное состояние – состояние электронов большинства органических молекул может быть описано как синглетное и триплетное. Синглетные молекулы содержат электроны с анти-
параллельными спинами (обозначается как ↑↓). Триплетное состояние молекулы характеризуется
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ | 219
Словарь
наличием непарных электронов с параллельными спинами (↑↑). Молекула переходит в более возбужденное синглетное состояние под воздействием света. Достаточно часто времени жизни молекулы в таком состоянии хватает на то, чтобы спин одного из двух электронов, поменялся, молекула, таким образом, переходит в триплетное состояние.
Сканер – автоматизированный микроскоп, который сканирует препарат целиком и составляет цифровое изображение его в виде виртуального препарата.
Специфическое окрашивание – положительное окрашивание ткани или клеток при применении первичных антител. Может выявляться диффузно распределенный, абсорбированный или фагоцитированный антиген, что называют «нежелательным» окрашиванием. Окрашивание, полученное в результате взаимодействия ткани с загрязненными первичными антителами должно расцениваться как неспецифическое.
Срок годности – минимальный срок годности биологического материала, в том числе иммунореактивов.
Срок хранения продукта – термин, характеризующий ожидаемую стабильность/устойчивость биологического вещества, в том числе иммунореактивов, чаще всего установлен экспериментальным путем, наблюдениями и в результате обобщения данных. В результате ряда сравнений установлено, что в лаборатории жидкие реагенты лучше хранить при температуре -20° С. Срок хранения ограничен сроком годности.
Стандартизация – процедура стандартизации предполагает сравнение с известным стандартом. В количественной работе в сравнении помогают числа. Полуколичественные и качественные методы
анализа, к которым относится иммуногистохимия, которые часто оцениваются субъективно, могут быть стандартизованы по тщательному отбору тканей и реагентов.
Телепатология – использование электронных технологий для передачи информации о пациенте, в том числе изображений.
Титр – в иммуногистохимии, максимальное разведение иммунной сыворотки, обеспечивающее оптимальное специфическое окрашивание с минимальным фоном.
Тушение/охлаждение – инактивация химической активности из-за повышения концентрации реагентов. В энзимологии, избыток продукта или субстрата может ингибировать ферментативную активность.
Феномен прозоны – феномен агглютинации при разведении в 100 и 1000 раз, и ее отсутствия при использовании неразведенных или слабо разведенных антител. Феномен связан не только с избытком антител, но часто вовлекает специфические классы антител (блокирующие или неполные),
которые взаимодействуют с антигеном необычным образом. Связывание антитела не только препят-
220 | ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
Словарь
ствует выявлению агглютинации, но активно ингибирует ее. Феномен может проявляться преципитацией или другой иммунной реакцией.
Фоновое окрашивание – под фоновым окрашиванием подразумевают любое неспецифическое артифициальное окрашивание. Фоновое окрашивание может включать «нежелательное» окраши-
вание, возникшее в результате диффузии антигена.
Хромоген – химическое соединение, которое может образовывать цветной осадок или может быть выявлено при помощи специфических реакций.
Эпитоп – структурный компонент антигена, взаимодействующий с антителом. Представлен группировками аминокислот глобулярных белков и боковыми цепями полисахаридов. Наиболее значимый участок называется иммунодоминантой.
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ | 221
Указатель
Аберрации сферические – 135 Автоматический анализ изображений – 155, 193 Антигены, демаскировка – 80
Антитела – 15, 173
Антитела моноклональные – 19 Антитела первичные – 43 Антитела поликлональные – 18
Антитела, афинность – 21
Антитела, инкубация – 31-32 Антитела, использование и уход – 27
Антитела, контаминация – 171
Антитела, обращение – 25
Антитела, перекрестная реактивность – 23
Антитела, получение – 25 Антитела, разведение – 29
Антитела, скорость реакции – 24
Антитела, стабильность – 24 Антитела, титр – 29
Антитела, хранение – 25-26
Аутофлуоресценция – 102, 109
Биннинг – 134
Блокаторы эндогенных ферментов – 159, 213 Буферные растворы – 162-164
Взаимодействия гидрофобные – 172 Взаимодействия ионные – 174 Взаимодействия электростатические – 174 Виртуальные препараты – 191 Вырезка – 64
Гибридизация зонда – 177
Гибридизация зондов – 111 Гибридизация флуоресцентная – 105 Гибридизация хромогенная – 142
Демаскировка – 82-89, 169 Депарафинация – 59, 106
Диапазон динамический – 134
Диффузия антигенов – 170
Идентификация ткани – 60
Иммуногистохимия, методы – 91
Иммуноглобулины – 15
Иммунофлуоресценция – 97 Иммунофлуоресценция, применение – 103 Иммунохимия, основы – 29 Контроли – 47, 183
Контроли, программы – 186
Контроль внутренний – 185
Контроль линии клеток – 186
Контроль обработки образца – 185
Контроль отрицательный – 183, 185, 211
Контроль положительный – 184 Контроль реагентов – 183
Контрольные образцы – 184
Красители флуоресцентные – 154
Метод авидин-биотиновый – 92
Метод биотин-стрептовидиновый – 168 Метод тканевых мульти-блоков – 69
Методы амплификации – 94-95
Микроскоп, конфокальный – 129, 138 Микроскоп, характеристики – 124
Микроскопия виртуальная – 189
Микротомия – 64-65
Мульти-блоки – 69
Мульти-блоки, конструирование – 73-78
Мульти-блоки, типы – 71
Нафтол AS MX фосфат – 37
Неисправности – 196 Обозначения – 13 Обработка ферментом – 107, 157
Образцы, контроль забора – 61-63 Образцы, манипуляции – 55 Образцы, подготовка – 57, 106, 212 Образцы, проводка – 58, 64
Образцы, регистрация –63
Образцы, сбор и идентификация – 60
Окраска DAPI – 109
Окраска обзорная – 65 Окрашивание множественное – 148
222 | ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
Указатель
Окрашивание неадекватное – 197
Окрашивание специфическое – 205
Окрашивание фоновое – 166, 201, 203, 207 Оптимизация исследований – 157 Освещение по Koehler – 125
Оценка изображений – 189
Пептидные нуклеиновые кислоты – 177
Пероксидаза хрена – 34
Проводка материала – 53
Протеиновый блок – 160
Разрешение – 139
Растворители антител – 161 Реагенты RTU – 42, 48
Реагенты валидация качества – 43
Реагенты для демаскировки – 81 Реагенты для мечения – 45
Реакции перекрестные – 171
Связывание комплемент-обусловленное – 174
Сигнал, распределение – 111
Системы детекции – 166 Системы полимерные – 93, 169
Сканирование микропрепарата – 190
Скорость считывания – 134
Спектральное совмещение – 130 Стабильность источника света – 128 Стандартизация – 40
Стекло покровное – 128
Субстрат-хромоген – 38-39 Субстраты – 36
Технологический процесс, управление – 66
Усиление хромогенного сигнала – 164
Фаза аналитическая – 41 Фаза постаналитическая – 40
Фаза преаналитическая – 40
Ферменты – 33
Фиксаторы ртутные – 56
Фиксаторы спиртовые – 57
Фиксация материала – 53
Фильтры возбуждающие – 135
Фильтры эмиссионные – 135 Флуоресценция, перекрытие – 102 Флуоресценция, принцип метода – 98 Формалин – 55
Фосфатаза щелочная – 35
Фотообесцвечивание – 101 Фуксин новый – 37 Функция рассеивания точки – 139
Хромогены – 36
Частота дискретизации – 140
Числовая апертура – 125
Энзимология, основы – 33
CISH, анализ – 142
CISH, двухцветный – 142
FISH, анализ – 105
FISH, визуализация – 113, 124
FISH, конвертация в CISH – 142 FISH, смешанный зонд – 105 FISH, фильтры – 115
FISH, колокализация – 130
FISH, детекция – 133
FISH, деконволюция – 135-136
IgG – 16
IgM – 17
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ | 223
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
РУКОВОДСТВО
Edited by
George L. Kumar, Lars Rudbeck
Русское издание под редакцией
Г.А.Франка и П.Г.Малькова
Типография Издательско-Полиграфического объединения «У Никитских ворот»
121069, Москва, Большая Никитская ул., д. 50А/5, стр. 1 (тел. 495-6906719)
Сдано в набор |
02.03.2011 |
Формат |
70 х 100 |
1/ |
|
|
|
|
16 |
Подписано к печати |
24.06.2011 |
Печ.л. |
14,0 |
|
Заказ |
147 |
Усл.печ.л |
18,2 |
|
Тираж |
1000 экз. |
Уч.-изд.л. |
17,45 |
|
Гарнитура |
Helvetica LT Std |
Бумага |
мелованная |
|
Оформление и верстка |
ИПО «У Никитских ворот» |
Печать |
офсетная |
|
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
Система гистологического окрашивания Dako CoverStainer
НАГРЕВАНИЕ |
ДЕПАРАФИ- |
ОКРАСКА |
ДЕГИДРАТАЦИЯ ЗАКЛЮЧЕНИЕ ВЫСУШИВАНИЕ |
|
НИЗАЦИЯ |
||||
|
|
|
- Встроенный модуль заключения под покровное стекло
- Сенсорный дисплей для управления и контроля - Модуль высушивания препаратов
- 36 станций для реагентов в 18 емкостях (по 2 станции на емкость)
- емкости с реагентами
- Желоб для загрузки штативов с препаратами - Нагревательная камера для подогрева
120 препаратов одновременно
- Отсек выгрузки препаратов по мере их готовности
Реагенты
поставляются в готовом виде
Высококачественная воспроизводимость окрашивания:
Тел./факс:
+7 (495) 921-35-78 e-mail: ab@amteo.ru www.amteo.ru
РУКОВОДСТВО ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
© Г.А.Франк, П.Г.Мальков, Ю.Ю.Андреева, Л.Э.Завалишина, Н.В.Данилова, Л.В.Москвина, Н.М.Гайфуллин
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/