6 курс / Гастроэнтерология / Российский_журнал_гастроэнтерологии,_гепатологии,_колопроктологии (61)

4, 2010

Информация

Цель работы – изучить клинические аспекты

лизы крови, мочи, биохимический анализ крови,

болезни Крона (БК) во взаимосвязи с носитель-

коагулограмма, исследование кала. Колоноскопия

ством основных четырех полиморфных вариан-

с осмотром терминального отдела подвздошной

тов (P268S, R702W, G908R и c.3020insC) гена

кишки (при левостороннем колите – сигмоско-

NOD2/CARD15.

пия, ректороманоскопия) и биопсия выполнялись

Изложены результаты обследований 122 паци-

по общепринятым методикам. Эзофагогастродуо-

ентов с БК. В качестве группы популяционного

деноскопия проводилась с целью исключения

контроля использовалась ДНК 54 человек из

поражения верхних отделов желудочно-кишечного

банка ДНК лаборатории ДНК-диагностики ГУ

тракта. Рентгенологическое исследование (обзор-

«Медико-генетический научный центр РАМН».

ное исследование брюшной полости, ирригоско-

Диагноз БК основывался на данных анам-

пия, рентгенография пищевода, желудка и тонкой

неза, характерных клинико-лабораторных, рент­

кишки), ультразвуковое исследование тонкой и

генологических, эндоскопических критериях,

толстой кишки, печени, желчного пузыря, почек

в большинстве случаев подтверждался резуль-

выполнялись всем пациентам на разных стадиях

татами морфологического исследования, УЗИ

заболевания

-VESTI

органов брюшной полости, тонкой и толстой

В группе.RUиз 122 пациентов с диагностированной

кишки. Локализацию воспалительного процесса

БК проведено молекулярно-генетическое исследо-

определяли по классификации М.Х. Левитана и

вание образцов ДНК, выделенных из цельной

В.Д. Федорова (1982). По ней БК подразделяется

крови (забор которой производился с информиро-

на илеит, илеоколит и колит. Форма заболевания

ванного согласия больного) и парафиновых бло-

устанавливалась согласно Венской классификации

ков (биоптаты слизистой оболочки толстой кишки

.M

и операционный материал), на наличие полиморф-

1998 г.: стенозирующая (с образованием стрик-

тур), пенетрирующая (перфоративная), не стено-

ных аллелей 268S, 702W, 908R и c.3020insC гена

зирующая и не пенетрирующая. Тяжесть течения

NOD2/CARD15. Следующим этапом проведе-

определялась по индексу активности БК-СDА1,

ния ДНК-диагностики была полимеразная цепная

называемому индексом Беста, включающему ряд

реакция фрагментов изучаемого гена с анализом

клинических проявлений в течение 7 дней, данные

полиморфизма длины амплифицированных/рест-

объективного осмотра и показатели гематокрита,

рикционных фрагментов (ПДАФ/ПДРФ-анализ).

оценивающиеся в зависимости WWWот выраженности

ПДАФ-анализ выполнялся для идентификации

количеством баллов.

полиморфного варианта c.3020insС. ПДРФ-анализ

Использовались критерии достоверного диаг­

использовался для идентификации полиморфных

ноза, предложенные J. Lennard-Jones в 1989 г:

вариантов P268S, R702W, G908R гена NOD2/

1) поражение от полости рта до анального канала;

CARD15. Для оценки результатов амплификации,

2) прерывистый характер поражения; 3) транс-

рестрикции проводили электрофорез с использо-

муральный характер поражения: язвы, трещины,

ванием полиакриламидного геля Манна–Уитни

абсцессы, свищи; 4) фиброз: стриктуры; 5) лим-

(для количественных признаков).

фоидная ткань (гистология): афтозные язвы или

По результатам исследования, для пациентов

трансмуральные лимфоидные скопления; 6) муцин

с БК, проживающих на территории РФ, харак-

(гистология): нормальное содержание муцина в

терны: начало болезни в молодом возрасте (до 40

зоне активного воспаления слизистой оболочки

лет), у большинства (74%) больных ассоциация

толстой кишки; 7) гранулемы.

ее с носительством полиморфных вариантов гена

Достоверный диагноз БК устанавливался при

NOD2/CARD15, преобладание колита у 43%

наличии, как минимум, 3 относительных критери-

больных (с аноректальными проявлениями) над

ев (от 1 до 6), а при выявлении гранулемы – еще

другими формами локализации и среднетяжелой

одного относительного критерия (от 1 до 6).

формы БК (у 54% больных), высокая частота раз-

Пациентам исследуемой группы после сбора

вития осложнений (у 74% больных).

жалоб, анамнеза, физикального обследования,

Полиморфные варианты гена NOD2/CARD15

проктологического осмотра с пальцевым исследо-

достоверно ассоциированы с БК: аллели 268S,

ванием per rectum проводились клинические ана-

702W, c.3020insC гена при БК встречались досто-

РЖГГК он-лайн – www.gastro-j.ru

91

Информация

4, 2010

верно чаще (p=0,02; 0,00015 и 10-7 соответ­

С носительством полиморфных вариантов гена

ственно) по сравнению с группой популяционного

NOD2/CARD15 (преимущественно c.3020insC,

контроля.

G908R) ассоциирован повышенный риск хирурги-

Наличие одного полиморфного аллеля гена

ческого лечения БК и ее осложнений.

NOD2/CARD15 в генотипе не оказывает значи-

Исследование основных полиморфных вариан-

тельного влияния на риск развития БК, а двух

тов гена NOD2/CARD15 необходимо для опре-

полиморфных аллелей повышает риск БК в

деления прогноза течения заболевания и тактики

2 раза. Носительство трех и более полиморфных

лечения пациентов.

аллелей гена NOD2/CARD15 увеличивает риск

Исследовать основные полиморфные варианты

развития БК в 38 раз.

NOD2/CARD15 рекомендуется с целью диффе-

Развитие илеита при БК ассоциировано с выяв-

ренциальной диагностики БК с язвенным колитом,

лением инсерции c.3020insC в гомозиготном состо-

недифференцируемым неспецифическим колитом.

янии или сочетания c.3020insC в гетерозиготном

Диссертация на соискание ученой степени

состоянии с другими полиморфными варианта-

кандидата медицинских наук выполнена в ГОУ

ми. Аноректальные проявления, развитие колита

ДПО «Российская медицинская академия после-

имеют отрицательную корреляцию с носитель­

дипломного образования Росздрава».

ством полиморфного варианта c.3020insC.

Научные руководители: доктор медицинских

Хроническое непрерывное течение БК в отли-

наук, профессор И.Д. Лоранская, доктор биоло-

чие от рецидивирующего достоверно ассоцииро-

гических наук, профессор А.В. Поляков.

вано с носительством полиморфных вариантов

Дата защиты: 26.02.2009 на заседании диссер-

R702W, c.3020insC в гомозиготном состоянии или

тационного совета Д 208.071.02 при ГОУ ДПО

сочетания их гетерозиготного состояния с другими

«Российская медицинская академия последиплом-

полиморфными вариантами.

RU

ного образования Росздрава».

.

-VESTI

.M

WWW

92

РЖГГК он-лайн – www.gastro-j.ru