Задание 18. Определение сахарозы в сахарной свекле на поляриметре

Оборудование и реактивы. Часовые стекла, круглодонные колбы на 200 мл, водяная баня, серный эфир, 10% раствор (CH₃ COO)₂Pb.

Оптический метод определения сахаров основан на способности растворов сахара вращать плоскость поляризации. Многие углеводы обладают такой способностью благодаря наличию у них в молекуле асимметричного атома углерода, т.е. имеющего четыре различных радикала и лежащих в разных плоскостях. Поэтому угол вращения поляризованного луча пропорционален количеству молекул вещества, находящихся на пути луча света. Сахара имеют неодинаковую способность вращения. При получении сравнительных данных пользуются понятием “удельное вращение”. Удельное вращение – это угол отклонения, получаемый при пропускании поляризованного луча через слой жидкости 10 см длиной при концентрации, равной единице, т.е. 1 г/мл. Удельное вращение определяется при стандартных длине волны и температуре. Для анализа используют прибор, называемый поляриметром, в котором измеряется в градусах угол отклонения поляризованного света.

Схема поляриметра:

1, 5, 6, 8 – диафрагмы; 2 – осветительная линза;

3, 4, 7 – призмы Николя; 9 – зрительная труба.

Перед определением угла вращения надо проверить нулевую точку прибора. Для этого поляриметрическую трубку заполняют дистиллированной водой, укладывают в ложе прибора. Окуляр устанавливают на резкость по глазу и вращают винт анализатора влево или вправо, добиваясь равномерности освещения. Пользуясь вмонтированной в прибор лупой, делают несколько отсчетов с возможной точностью. Если нулевые деления круга не совпадают с нулевыми делениями нониуса, то, сделав несколько отсчетов, устанавливают среднее отклонение прибора от нулевой точки со знаком “+” или “-”. Эту поправку следует учитывать при снятии показаний. Исследуемые растворы должны быть прозрачными, бесцветными или слабо окрашенными.

Поляриметрическую трубку наполняют исследуемым раствором до краев так, чтобы образовался выпуклый мениск, затем накрывают круглым стеклышком , осторожно подвигая его от края трубки, чтобы не образовался пузырек воздуха, и завинчивают его шайбой с резиновой прокладкой. При наличии в трубке сферического расширения на одном конце пузырек воздуха загоняют в расширение, тогда он не мешает определению. Перед определением поляризационную трубку промывают дистиллированной водой, при необходимости используют деревянную палочку с тряпочным тампоном и споласкивают испытуемым раствором. Круглые стеклышки шайб чисто моют после каждого определения, просушивают фильтровальной бумагой, протирают насухо льняной тканью. Поверхность стекла должна быть абсолютно чистой и сухой.

Ход работы:

Сахарную свеклу измельчить до получения мезги, перемешать на часовом стекле, взять на технических весах навеску 25-30 г. Навеску перенести в круглодонную колбу на 200 мл, предварительно залив в нее около 100мл дистиллированной воды, довести объем воды до 150 мл. Колбу с раствором поместить в водяную баню при 80С, экстрагировать сахарозу в течение 30 мин при перемешивании содержимого колбы, осадить пену, добавив несколько капель эфира. Долить в колбу почти до метки 7 мл 10% раствора уксусно-кислого свинца для осаждения белков, перемешать и оставить на 0,5-1 ч. Раствор в колбе довести дистиллированной водой до метки, перемешать и отфильтровать в сухую посуду через складчатый фильтр, отбрасывая первые мутные порции фильтрата. Раствор залить в поляметрическую трубу и последовательно снять по шкале пять отсчетов. Средний показатель использовать для расчетов.

Вычисление результатов.

Х = ,

Х - % сахарозы

– отсчет в градусах по шкале;

0,75 – количество сахара, соответствующее 1 шкалы прибора, г;

0,9925 – поправка на объем мерных колб;

Н – навеска мезги;

p – разведение из расчета 200/100.

ЛИПИДЫ

Задание 19. Физико-химические свойства жиров.

Оборудование и реактивы: пипетки, пробирки, 1%-ный раствор Na₂ CO₃, эфир, ацетон, бензин, кристаллическая соль KHCO₃ , бромная вода.

Материал: растительное масло.

Ход работы:

1. Растворение жира. В пробирку вносят 0,5 мл масла, добавляют 2-3 мл бензина, перемешивают. Жир растворяется. Жир также хорошо растворяется в эфире, ацетоне, бензоле и других органических растворителях. Для растворения жира в спирте прибегают к подогреванию.

2. Получение эмульсии жира. К 2-3 мл воды приливают 0,5 мл масла, 3-5 капель 1%-ного раствора Na₂CO₃ и взбалтывают. Образуется стойкая эмульсия за счёт частичного образования мыла, являющегося хорошим эмульгатором.

3. Акролеиновая проба. Реакция основана на отщеплении от глицерина под влиянием водоотнимающих веществ двух молекул воды с образованием непредельного альдегида акролеина CH₂ = CH-COH, имеющего специфический запах.

В пробирку наливают 0,5-1 г масла, прибавляют на кончике ножа сухой соли KHSO₄ и нагревают на пламени горелки до появления специфического запаха акролеина.

4. Определение непредельности жира. В свободных и связанных с глицерином жирных кислотах некоторых жиров, в особенности растительных масел, имеются ненасыщенные связи, благодаря которым жиры способны присоединять галоиды. В пробирку вносят 0,5-1 г масла, приливают 0, 5-1 мл бромной воды и тщательно взбалтывают. Происходит обесцвечивание бромной воды.

По проведённой работе сформулировать и записать выводы.