Витамины

Задание 21. Качественные реакции на жирорастворимые витамины Е (токоферол) и А (ретинол).

Оборудование и реактивы: пробирки, пипетки, водяная баня; 0,1%-ный раствор токоферола в 96% спирте или масляный раствор – промышленный препарат; раствор витамина А в масле - промышленный препарат; концентрированная HNO₃; 0,2%-ный спиртовой раствор хлорного железа; концентрированная H₂ SO ₄ .

Обнаружено несколько близких друг другу по химической структуре токоферолов: α-, β-, γ-.

Витамин Е участвует в окислительно-восстановительных реакциях, является антиоксидантом непредельных жирных кислот.

Витамин А является структурным компонентом биологических мембран, участвует в синтезе мукополисахаридов, в процессах светоощущения. Витамин А встречается в продуктах животного происхождения.

Ход работы:

1. В сухую пробирку вносят 3 капли токоферола в спирте, прибавляют под тягой 6 капель азотной кислоты и пробирку слегка встряхивают. Образующаяся эмульсия расслаивается, причём верхний маслянистый слой окрашивается в красный цвет. Реакция обусловлена окислением токоферола до окрашенного продукта, имеющего хиноидную структуру.

2. В две пробирки наливают по 2-3 капли масляного раствора витамина Е. В первую пробирку добавляют 1-2 мл воды, во вторую – такое же количество азотной кислоты. Обе пробирки нагревают на кипящей водяной бане 10 мин. В пробирке с азотной кислотой масляный слой витамина окрашивается в оранжево-красный цвет.

3. В пробирку вносят несколько капель спиртового раствора токоферола, прибавляют равное количество раствора хлорного железа, перемешивают и нагревают. Р аствор окрашивается в красный цвет.

4.В пробирку наливают 3 капли масляного раствора витамина А и добавляют 1 каплю серной кислоты. В пробирке появляется сине-фиолетовое окрашивание.

По результатам опыта записать выводы.

Задание 22. Качественные реакции на водорастворимые витамины: В₂ (рибофлавин), В₆ (пиридоксин), С (аскорбиновая кислота)

Оборудование и реактивы: пробирки, пипетки, 0,025%-ный раствор витамина В₂, концентрированная HCl, металлический цинк, 5%-ный раствор хлорного железа, ступки фарфоровые, воронки стеклянные, колбы конические на 100 мл, 0,1%-ный раствор йода в KI, насыщенный раствор K₃Fe(CN )₆ , 2%-ный раствор хлорного железа, свежеприготовленный 0,01%-ный раствор 2,6-дихлорфенолиндофенола, 10%-ный раствор HCl.

Материалы: клубни картофеля, капуста, растворы витаминов B₂ ,B₆ .

Рибофлавин входит в состав флавиновых нуклеотидов - ФМН и ФАД, являющихся коферментами многих дегидрогеназ. В окисленной форме рибофлавин окрашен в жёлтый цвет, а в восстановленной – бесцветный.

Пиридоксин является коферментом трансаминаз и других ферментов.

Аскорбиновая кислота участвует в окислительно-восстановительных реакциях . Она легко окисляется до дегидроаскорбиновой кислоты, которая в щелочной среде образует дикетогулоновую кислоту. Восстанавливающая способность аскорбиновой кислоты является основой большинства количественных методов её определения.

Ход работы:

1. В пробирку вносят 1 мл раствора рибофлавина, добавляют под тягой 5 капель концентрированной HCl и несколько кусочков металлического цинка. Жидкость постепенно окрашивается в розовый цвет, а затем обесцвечивается. Реакция обусловлена восстановлением рибофлавина.

2. В пробирку вносят 0,5 мл раствора пиридоксина, добавляют 1 каплю раствора хлорного железа и перемешивают. Жидкость окрашивается в красный цвет. Реакция основана на образовании комплексного соединения фенолята железа.

3. Растирают измельчённые клубни картофеля или листья капусты (5-10 г) в фарфоровой ступке, приливают 10 мл воды, перемешивают и фильтруют.

3.1. В две пробирки вносят по 1мл дистиллированой воды и по 2 капли 0,1%-ного раствора йода в KI. В одну пробирку добавляют 1 мл дистиллированной воды , а в другую – 1 мл фильтрата растительных тканей. Во второй пробирке раствор йода обесцвечивается вследствии окисления аскорбиновой кислоты в дегидроаскорбиновую и восстановления йода до йодоводородной кислоты.

3.2. К двум мл картофельного или капустного сока добавляют 1 каплю свежеприготовленного раствора K₃[Fe (CN)₆]_, а затем одну каплю раствора хлорного железа и 5 капель раствора HCl. В присутствии аскорбиновой кислоты происходит восстановление К₃ [Fe(CN)₆] в K ₄Fe(CN)₆], который с трёхвалентным железом образует окрашенный в голубой цвет продукт. В контроле вместо сока берут дистиллированную воду (появляется бурое окрашивание).

3.3. К 1-2 мл сока добавляют осторожно по каплям свежеприготовленный 0,01%-ный раствор 2,6- дихлорфенолиндофенола. Происходит обесцвечивание красителя.

Объяснить полученные результаты и записать выводы.