Добавил:

Mmvauma uma.mmva@gmail.com Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.

Вуз:

Первый московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова

Предмет:

Микробиология

Файл:

Ответы к 5 коллоквиуму

.pdf

Скачиваний:

Добавлен:

22.05.2020

Размер:

7.74 Mб

Скачать

☆

<<< < Предыдущая 1 2 3 4 5 67 / 97 8 9 > Следующая >>>

№ 68 Анафилактический шок и сывороточная болезнь. Причины возникновения. Механизм. Их предупреждение.

Анафилаксия представляет собой реакцию немедленного типа, возникающую при парентеральном повторном введении антигена в ответ на повреждающее действие комплекса антиген — антитело и характеризующуюся стереотипно протекающей клинической и морфологической картиной.

Основную роль в анафилаксии играет цитотропный IgE, имеющий сродство к клеткам, в частности базофилам и тучным клеткам. После первого контакта организма с антигеном образуется IgE, который вследствие цитотропности адсорбируется на поверхности названных выше клеток. При повторном попадании в организм этого же антигена IgE связывает антиген с образованием на мембране клеток комплекса IgE — антиген. Комплекс повреждает клетки, которые в ответ на это выделяют медиаторы — гистамин и гистаминоподобные вещества (серотонин, кинин). Эти медиаторы связываются рецепторами, имеющимися на поверхности функциональных мышечных, секреторных, слизистых и других клеток, вызывая их соответствующие реакции. Это ведет к сокращению гладкой мускулатуры бронхов, кишечника, мочевого пузыря, повышению проницаемости сосудов и другим функциональным и морфологическим изменениям, которые сопровождаются клиническим проявлением. Клинически анафилаксия проявляется в виде одышки, удушья, слабости, беспокойства, судорог, непроизвольного мочеиспускания, дефекации и др. Анафилактическая реакция протекает в три фазы: в 1-й фазе происходит сама реакция антиген — антитело; во 2-й фазе выделяются медиаторы анафилактической реакции; в 3-й фазе проявляются функциональные изменения.

Анафилактическая реакция возникает спустя несколько минут или часов после повторного введения антигена. Протекает в виде анафилактического шока или как местные проявления. Интенсивность реакции зависит от дозы антигена, количества образующихся антител, вида животного и может закончиться выздоровлением или смертью. Анафилаксию легко можно вызвать в эксперименте на животных. Оптимальной моделью для воспроизведения анафилаксии является морская свинка. Анафилаксия может возникать на введение любого антигена любым способом (подкожно, через дыхательные пути, пищеварительный тракт) при условии, что антиген вызывает образование иммуноглобулинов. Доза антигена, вызывающая сенсибилизацию, т. е. повышенную чувствительность, называется сенсибилизирующей. Она обычно очень мала, так как большие дозы могут вызвать не сенсибилизацию, а развитие иммунной защиты. Доза антигена, введенная уже сенсибилизированному к нему животному и вызывающая проявление анафилаксии, называется разрешающей. Разрешающая доза должна быть значительно больше, чем сенсибилизирующая.

Состояние сенсибилизации после встречи с антигеном сохраняется месяцами, иногда годами; интенсивность сенсибилизации можно искусственно уменьшить введением малых разрешающих доз антигена, которые связывают и выводят из циркуляции в организме часть антител. Этот принцип был использован для десенсибилизации (гипосенсибилизации), т.е. предупреждения анафилактического шока при повторных введениях антигена. Впервые способ десенсибилизации предложил русский ученый А. Безредка (1907), поэтому он называется способом Безредки. Способ состоит в том, что человеку, ранее получавшему какой-либо антигенный препарат (вакцину, сыворотку, антибиотики, препараты крови и др.), при повторном введении (при наличии у него повышенной чувствительности к препарату) вначале вводят небольшую дозу (0,01; 0,1 мл), а затем, через 1—1'/2 ч, — основную. Таким приемом пользуются во всех клиниках для избежания развития анафилактического шока; этот прием является обязательным.

Возможен пассивный перенос анафилаксии с антителами.

Сывороточной болезнью называют реакцию, возникающую при разовом парентеральном введении больших доз сывороточных и других белковых препаратов. Обычно реакция возникает спустя 10—15 сут. Механизм сывороточной болезни связан с образованием антител против введенного чужеродного белка (антигена) и повреждающим действием на клетки комплексов антиген — антитело. Клинически сывороточная болезнь проявляется отеком кожи и слизистых оболочек, повышением температуры тела, при-пуханием суставов, сыпью и зудом кожи; наблюдаются изменения в крови (увеличение СОЭ, лейкоцитоз и др.). Сроки проявления и тяжесть сывороточной болезни зависят от содержания циркулирующих антител и дозы препарата. Это объясняется тем, что ко 2-й неделе после введения белков сыворотки вырабатываются антитела к белкам сыворотки и образуется комплекс антиген — антитело. Профилактика сывороточной болезни осуществляется по способу Безредки.

№ 69 Теории иммунитета.

Теория иммунитета Мечникова - теория, согласно которой решающая роль в антибактериальном иммунитете принадлежит фагоцитозу.

Сначала И.И.Мечников как зоолог экспериментально изучал морских беспозвоночных фауны Черного моря в Одессе и обратил внимание на то, что определенные клетки (целомоциты) этих животных поглощают инородные субстанции (твердые частицы и бактерий), проникшие во внутреннюю среду. Затем он увидел аналогию между этим явлением и поглощением белыми клетками крови позвоночных животных микробных телец. Эти процессы наблюдали и до И.И.Мечникова другие микроскописты. Но только И.И.Мечников осознал, что это явление не есть процесс питания данной единичной клетки, а есть защитный процесс в интересах целого организма. И.И.Мечников первым рассматривал воспаление как защитное, а не разрушительное явление. Против теории И.И.Мечникова в начале XX в. были большинство патологов, так как они наблюдали фагоцитоз в очагах воспаления, т.е. в больных местах, и считали лейкоциты (гной) болезнетворными, а не защитными клетками. Более того, некоторые полагали, что фагоциты — разносчики бактерий по организму, ответственные за диссеминацию инфекций. Но идеи И.И.Мечникова устояли; ученый назвал действующие таким образом защитные клетки "пожирающими клетками". Его молодые французские коллеги предложили использовать греческие корни того же значения. И.И.Мечников принял этот вариант, и появился термин "фагоцит". Эти работы и теория Мечникова чрезвычайно понравились Л.Пастеру, и он пригласил Илью Ильича работать в свой институт в Париже.

Теория иммунитета Эрлиха — одна из первых теорий антителообразования, согласно которой у клеток имеются антигенспецифические рецепторы, высвобождающиеся в качестве антител под действием антигена.

В статье Пауля Эрлиха противомикробные вещества крови автор назвал термином "антитело", так как бактерий в то время называли термином "korper" — микроскопические тельца. Но П.Эрлиха "посетило" глубокое теоретическое прозрение. Несмотря на то, что факты того времени свидетельствовали, что в крови неконтактировавшего с конкретным микробом животного или человека не определяются антитела против данного микроба, П.Эрлих каким-то образом осознал, что и до контакта с конкретным микробом в организме уже есть антитела в виде, который он назвал "боковыми цепями". Как мы теперь знаем, это именно так, и "боковые цепи" Эрлиха — это подробно изученные в наше время

рецепторы лимфоцитов для антигенов. Позже этот же образ мыслей П.Эрлих

"применил" к фармакологии: в своей теории химиотерапии он предполагал предсуществование в организме рецепторов для лекарственных веществ. В 1908 г. П.Эрлиху вручили Нобелевскую премию за гуморальную теорию иммунитета.

Также есть ещё некоторые теории.

Теория иммунитета Безредки - теория, объясняющая защиту организма от ряда инфекционных болезней возникновением специфической местной невосприимчивости клеток к возбудителям.

Инструктивные теории иммунитета — общее название теорий антителообразования, согласно которым ведущая роль в иммунном ответе отводится антигену, прямо участвующему в качестве матрицы при формировании специфической конфигурации антидетерминанты либо выступающему в качестве фактора, направленно изменяющего биосинтез иммуноглобулинов плазматическими клетками.

№ 70 Особенности противовирусного, противобактериального, противогрибкового, противоопухолевого, трансплантационного иммунитета.

Противовирусный иммунитет. Основой противовирусного иммунитета является клеточный иммунитет. Клетки-мишени, инфицированные вирусом, уничтожаются цитотоксическими лимфоцитами, а также NK-клетками и фагоцитами, взаимодействующими с Fc-фрагментами антител, прикрепленных к вирусспецифическим белкам инфицированной клетки. Противовирусные антитела способны нейтрализовать только внеклеточно расположенные вирусы, как и факторы неспецифического иммунитета — сывороточные противовирусные ингибиторы. Такие вирусы, окруженные и блокированные белками организма, поглощаются фагоцитами или выводятся с мочой, потом и др. (так называемый «выделительный иммунитет»). Интерфероны усиливают противовирусную резистентность, индуцируя в клетках синтез ферментов, подавляющих образование нуклеиновых кислот и белков вирусов. Кроме этого, интерфероны оказывают иммуномодулирующее действие, усиливают в клетках экспрессию антигенов главного комплекса гистосовместимости (МНС). Противовирусная защита слизистых оболочек обусловлена секреторными IgA, которые, взаимодействуя с вирусами, препятствуют их адгезии на эпителиоцитах.

Противобактериальный иммунитет направлен как против бактерий, так и против их токсинов (антитоксический иммунитет). Бактерии и их токсины нейтрализуются антибактериальными и антитоксическими антителами. Комплексы бактерия (антигены)-антитела активируют комплемент, компоненты которого присоединяются к Fc-фрагменту антитела, а затем образуют мембраноатакующий комплекс, разрушающий наружную мембрану клеточной стенки грамотрицательных бактерий. Пептидогликан клеточных стенок бактерий разрушается лизоцимом. Антитела и комплемент (СЗЬ) обволакивают бактерии и «приклеивают» их к Fc- и С3b-рецепторам фагоцитов, выполняя роль опсонинов вместе с другими белками, усиливающими фагоцитоз (С-реактивным белком, фибриногеном, маннансвязывающим лектином, сывороточным амилоидом).

Основным механизмом антибактериального иммунитета является фагоцитоз. Фагоциты направленно перемещаются к объекту фагоцитоза, реагируя на хемоаттрактанты: вещества микробов, активированные компоненты комплемента (С5а, С3а) и цитокины. Противобактериальная защита слизистых оболочек обусловлена секреторными IgA, которые, взаимодействуя с бактериями, препятствуют их адгезии на эпителиоцитах.

Противогрибковый иммунитет. Антитела (IgM, IgG) при микозах выявляются в низких титрах. Основой противогрибкового иммунитета является клеточный иммунитет. В тканях происходит фагоцитоз, развивается эпителиоидная гранулематозная реакция, иногда тромбоз кровеносных сосудов. Микозы, особенно оппортунистические, часто развиваются после длительной антибактериальной терапии и при иммунодефицитах. Они сопровождаются развитием гиперчувствительности замедленного типа. Возможно развитие аллергических заболеваний после реcпираторной сенсибилизации фрагментами условно-патогенных грибов родов Aspergillus, Penicillium, Mucor, Fusarium и др.

Противоопухолевый иммунитет основан на Th1-зависимом клеточном иммунном ответе, активирующем цитотоксические Т-лимфоциты, макрофаги и NK-клетки. Роль гуморального (антительного) иммунного ответа невелика, поскольку антитела, соединяясь с антигенными детерминантами на опухолевых клетках, экранируют их от цитопатогенного действиях иммунных лимфоцитов. Опухолевый антиген распознается антигенпрезентирующими клетками (дендритными клетками и макрофагами) и непосредственно или через Т-хелперы (Th1) представляется цитотоксическим Т-лимфоцитам, разрушающим опухолевую клетку-мишень.

Кроме специфического противоопухолевого иммунитета, иммунный надзор за нормальным составом тканей реализуется за счет неспецифических факторов. Неспецифические факторы, повреждающие опухолевые клетки: 1) NK-клетки, система мононуклеарных клеток, противоопухолевая активность которых усиливается под воздействием интерлейкина-2 (ИЛ-2) и α-, β-интерферонов; 2) ЛАК-клетки (мононуклеарные клетки и NK-клетки, активированные ИЛ-2); 3) цитокины (α - и β -интерфероны, ФНО- α и ИЛ-2).

Трансплантационным иммунитетом называют иммунную реакцию макроорганизма, направленную против пересаженной в него чужеродной ткани (трансплантата). Знание механизмов трансплантационного иммунитета необходимо для решения одной из важнейших проблем современной медицины — пересадки органов и тканей. Многолетний опыт показал, что успех операции по пересадке чужеродных органов и тканей в подавляющем большинстве случаев зависит от иммунологической совместимости тканей донора и реципиента.

Иммунная реакция на чужеродные клетки и ткани обусловлена тем, что в их составе содержатся генетически чужеродные для организма антигены. Эти антигены, получившие название трансплантационных или антигенов гистосовместимости, наиболее полно представлены на ЦПМ клеток.

Реакция отторжения не возникает в случае полной совместимости донора и реципиента по антигенам гистосовместимости — такое возможно лишь для однояйцовых близнецов. Выраженность реакции отторжения во многом зависит от степени чужеродности, объема трансплантируемого материала и состояния иммунореактивности реципиента.

При контакте с чужеродными трансплантационными антигенами организм реагирует факторами клеточного и гуморального звеньев иммунитета. Основным фактором клеточного трансплантационного иммунитета являются Т-киллеры. Эти клетки после сенсибилизации антигенами донора мигрируют в ткани трансплантата и оказывают на них антителонезависимую клеточноопосредованную цитотоксичность.

Специфические антитела, которые образуются на чужеродные антигены (гемагглютинины, гемолизины, лейкотоксины, цитотоксины), имеют важное значение в формировании трансплантационного иммунитета. Они запускают антителоопосредованный цитолиз трансплантата (комплементопосредованный и антителозависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность).

Возможен адоптивный перенос трансплантационного иммунитета с помощью активированных лимфоцитов или со специфической антисывороткой от сенсибилизированной особи интактному макроорганизму.

Механизм иммунного отторжения пересаженных клеток и тканей имеет две фазы. В первой фазе вокруг трансплантата и сосудов наблюдается скопление иммунокомпетентных клеток (лимфоидная инфильтрация), в том числе Т- киллеров. Во второй фазе происходит деструкция клеток трансплантата Т- киллерами, активируются макрофагальное звено, естественные киллеры, специфический антителогенез. Возникает иммунное воспаление, тромбоз кровеносных сосудов, нарушается питание трансплантата и происходит его гибель. Разрушенные ткани утилизируются фагоцитами.

В процессе реакции отторжения формируется клон Т- и В-клеток иммунной памяти. Повторная попытка пересадки тех же органов и тканей вызывает вторичный иммунный ответ, который протекает очень бурно и быстро заканчивается отторжением трансплантата.

С клинической точки зрения выделяют острое, сверхострое и отсроченное отторжение трансплантата. Различаются они по времени реализации реакции и отдельным механизмам.

№ 71 Понятие о клинической иммунологии. Иммунный статус человека и факторы, влияющие на него.

Клиническая иммунология - это клиническая и лабораторная дисциплина, занимающаяся изучением вопросов диагностики и лечения больных с различными заболеваниями и патологическими состояниями, в основе которых лежат иммунологические механизмы, а также состояниями, в терапии и профилактике которых иммунопрепараты играют ведущую роль. Иммунный статус — это структурное и функциональное состояние иммунной системы индивидуума, определяемое комплексом клинических и лабораторных иммунологических показателей.

Таким образом, иммунный статус характеризует анатомо-функциональное состояние иммунной системы, т. е. ее способность к иммунному ответу на определенный антиген в данный момент времени.

На иммунный статус оказывают влияние следующие факторы:

• климато-географические; • социальные; • экологические (физические, химические и биологические); • «медицинские» (влияние лекарственных веществ, оперативные вмешательства, стресс и т. д.).

Среди климато-географических факторов на иммунный статус оказывают влияние температура, влажность, солнечная радиация, длина светового дня и др. Например, фагоцитарная реакция и кожные аллергические пробы менее выражены у жителей северных регионов, чем у южан. Вирус Эпштейна— Барр у людей белой расы вызывает инфекционное заболевание — мононуклеоз, у лиц негроидной расы — онкопатологию (лимфома Беркитта), а у лиц желтой расы — совсем другую онкопатологию (назофарингеальная карцинома), причем только у мужчин. Жители Африки менее подвержены заболеванию дифтерией, чем европейское население.

К социальным факторам, оказывающим влияние на иммунный статус, относятся питание, жилищно-бытовые условия, профессиональные вредности и т. п. Важное значение имеет сбалансированное и рациональное питание, поскольку с пищей в организм поступают вещества, необходимые для синтеза иммуноглобулинов, для построения иммунекомпетентных клеток и их функционирования. Особенно важно, чтобы в рационе присутствовали незаменимые аминокислоть и витамины, особенно А и С.

Значительное влияние на иммунный статус организма оказывают жилищнобытовые условия. Проживание в плохих жилищных условиях ведет к снижению общей физиологической реактивности, соответственно иммунореактивности, что нередко сопровождается повышением уровня инфекционной заболеваемости.

Большое влияние на иммунный статус оказывают профессиональные вредности, поскольку человек проводит на работе значительную часть своей жизни. К производственным факторам, которые могут оказывать неблагоприятное воздействие на организм и снижать иммунореактивность, относят ионизирующую радиацию, химические вещества, микробы и продукты их жизнедеятельности, температуру, шум, вибрацию и т. д. Источники радиации получили в настоящее время очень широкое распространение в различных отраслях промышленности (энергетика, горнохимическая, аэрокосмическая и др.).

Неблагоприятное влияние на иммунный статус оказывают соли тяжелых металлов, ароматические, алкилирующие соединения и другие химические вещества, в том числе моющие средства, дезинфектанты, пестициды, ядохимикаты, широко применяемые в практике. Таким профессиональным вредностям подвержены работники химических, нефтехимических, металлургических производств и др.

Неблагоприятное влияние на иммунный статус организма оказывают микробы и продукты их жизнедеятельности (чаще всего белки и их комплексы) у работников биотехнологических производств, связанных с производством антибиотиков, вакцин, ферментов, гормонов, кормового белка и др.

Такие факторы, как низкая или высокая температура, шум, вибрация, недостаточная освещенность, могут снижать иммунореактивность, оказывая опосредованное действие на иммунную систему через нервную и эндокринную системы, которые находятся в тесной взаимосвязи с иммунной системой.

Глобальное действие на иммунный статус человека оказывают экологические факторы, в первую очередь, загрязнение окружающей среды радиоактивными веществами (отработанным топливом из ядерных реакторов, утечка радионуклидов из реакторов при авариях), широкое применение пестицидов в сельском хозяйстве, выбросами химических предприятий и автотранспорта, биотехнологических производств.

На иммунный статус оказывают влияние различные диагностические и лечебные медицинские манипуляции, лекарственная терапия, стресс.

Необоснованное и частое применение рентгенографии, радиоизотопного сканирования может влиять на иммунную систему. Иммунореактивность изменяется после травм и хирургических операций. Многие лекарственные препараты, в том числе антибиотики, способны оказывать побочное иммунодепрессивное действие, особенно при длительном приеме. Стресс приводит к нарушениям в работе Т-системы иммунитета, действуя, в первую очередь, через ЦНС.

№ 72 Оценка иммунного статуса: основные показатели и методы их

№ 73 Расстройства иммунной системы: первичные и вторичные

№ 74 Реакция агглютинации. Компоненты, механизм, способы

определения.

иммунодефициты.

постановки. Применение.

Несмотря на вариабельность иммунологических показателей в норме,

Иммунодефициты — это нарушения нормального иммунного статуса,

Реакция агглютинации — простая по постановке реакция, при которой

иммунный статус можно определить путем постановки комплекса

обусловленные дефектом одного или нескольких механизмов иммунного

происходит связывание антителами корпускулярных антигенов (бактерий,

лабораторных тестов, включающих оценку состояния факторов неспецифи-

ответа.

эритроцитов или других клеток, нерастворимых частиц с адсорбированными

ческой резистентности, гуморального (В-система) и клеточного (Т-система)

Различают первичные, или врожденные (генетические), и вторичные, или

на них антигенами, а также макромолекулярных агрегатов). Она протекает

иммунитета.

приобретенные, иммунодефициты.

при наличии электролитов, например при добавлении изотонического

Оценка иммунного статуса проводится в клинике при трансплантации

Первичные, или врожденные, иммунодефициты.

раствора натрия хлорида.

органов и тканей, аутоиммунных заболеваниях, аллергиях, для выявления

В качестве первичных иммунодефицитов выделяют такие состояния, при

Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая,

иммунологической недостаточности при различных инфекционных и сомати-

которых нарушение иммунных гуморальных и клеточных механизмов связано

ориентировочная, непрямая и др. Реакция агглютинации проявляется

ческих заболеваниях, для контроля эффективности лечения болезней,

с генетическим блоком, т. е. генетически обусловлено неспособностью

образованием хлопьев или осадка (клетки, «склеенные» антителами, име

связанных с нарушениями иммунной системы. В зависимости от возможностей

организма реализовывать то или иное звено иммунологической реактивности.

ющими два или более антигенсвязывающих центра — рис. 13.1). РА

лаборатории оценка иммунного статуса чаше всего базируется на определении

Расстройства иммунной системы могут затрагивать как основные

используют для:

комплекса следующих показателей:

специфические звенья в функционировании иммунной системы, так и

1) определения антител в сыворотке крови больных, например, при

1) общего клинического обследования;

факторы, определяющие неспецифическую резистентность. Возможны

бруцеллезе (реакции Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реак-

2) состояния факторов естественной резистентности;

комбинированные и селективные варианты иммунных расстройств. В

ция Видаля) и других инфекционных болезнях;

3) гуморального иммунитета;

зависимости от уровня и характера нарушений различают гуморальные,

определения возбудителя, выделенного от больного;

4) клеточного иммунитета;

клеточные и комбинированные иммунодефициты.

определения групп крови с использованием моноклональных антител

5) дополнительных тестов.

Врожденные иммунодефицитные синдромы и заболевания представляют собой

против алло-антигенов эритроцитов.

При общем клиническом обследовании учитывают жалобы пациента,

довольно редкое явление. Причинами врожденных иммунодефицитов могут

Для определения у больного антител ставят развернутую реакцию

анамнез, клинические симптомы, результаты общего анализа крови (включая

быть удвоение хромосом, точечные мутации, дефект ферментов обмена

агглютинации: к разведениям сыворотки крови больного добавляют

абсолютное число лимфоцитов), данные биохимического исследования.

нуклеиновых кислот, генетически обусловленные нарушения мембран,

диагностикум (взвесь убитых микробов,) и через несколько часов инкубации

Гуморальный иммунитет определяют по уровню иммуноглобулинов классов

повреждения генома в эмбриональном периоде и др. Как правило, первичные

при 37 ˚С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки),

G, M, A, D, Е в сыворотке крови, количеству специфических антител,

иммунодефицита проявляются на ранних этапах постнатального периода и

при котором произошла агглютинация, т. е. образовался осадок.

катаболизму иммуноглобулинов, гиперчувствительности немедленного типа,

наследуются по аутосомно-рецессивному типу. Проявляться первичные

Характер и скорость агглютинации зависят от вида антигена и антител.

показателю В-лимфоцитов в периферической крови, бласттрансформации В-

иммунодефициты могут в виде недостаточности фагоцитоза, системы комп-

Примером являются особенности взаимодействия диагностикумов (О- и H-

лимфоцитов под действием В-клеточных митогенов и другим тестам.

лемента, гуморального иммунитета (В-системы), клеточного иммунитета (Т-

антигенов) со специфическими антителами. Реакция агглютинации с О-

Состояние клеточного иммунитета оценивают по количеству Т-лимфоцитов,

системы) или же в виде комбинированной иммунологической

диагностикумом

(бактерии,

убитые

нагреванием,

сохранившие

а также субпопуляций Т-лимфоцитов в периферической крови,

недостаточности.

термостабильный О-антиген) происходит в виде мелкозернистой

бласттрансформации Т-лимфоцитов под действием Т-клеточных митогенов,

Вторичные, или приобретенные, иммунодефициты

агглютинации. Реакция агглютинации с Н-диагностикумом (бактерии,

определению гормонов тимуса, уровню секретируемых цитокинов, а также

Вторичные иммунодефициты в отличие от первичных развиваются у лиц с

убитые формалином, сохранившие термолабильный жгутиковый Н-антиген)

постановкой кожных проб с аллергенами, контактной сенсибилизацией

нормально функционировавшей от рождения иммунной системой. Они

— крупнохлопчатая и протекает быстрее.

динитрохлорбензолом. Для постановки кожных аллергических проб ис-

формируются под воздействием окружающей среды на уровне фенотипа и

Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят

пользуются антигены, к которым в норме должна быть сенсибилизация,

обусловлены нарушением функции иммунной системы в результате различных

ориентировочную реакцию агглютинации, применяя диагностические

например проба Манту с туберкулином. Способность организма к индукции

заболеваний или неблагоприятных воздействий на организм. При вторичных

антитела

(агглютинирующую сыворотку),

т. е. проводят серотипирование

первичного иммунного ответа может дать контактная сенсибилизация

иммунодефицитах могут поражаться Т- и В-системы иммунитета, факторы

возбудителя.

Ориентировочную

реакцию проводят на предметном стекле.

динитрохлорбензолом.

неспецифической резистентности, возможны также их сочетания. Вторичные

К капле диагностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10

В качестве дополнительных тестов для оценки иммунного статуса можно

иммунодефицита встречаются значительно чаще, чем первичные. Вторичные

или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больного.

использовать такие тесты, как определение бактерицидное™ сыворотки крови,

иммунодефицита, как правило, преходящи и поддаются иммунокоррекции, т.

Рядом ставят контроль: вместо сыворотки наносят каплю раствора натрия

титрование СЗ-, С4-компонентов комплемента, определение содержания С-

е. восстановлению нормальной деятельности иммунной системы.

хлорида. При появлении в капле с сывороткой и микробами хлопьевидного

реактивного белка в сыворотке крови, определение ревматоидных факторов и

Вторичные

иммунодефицита могут

быть:

после перенесенных инфекций

осадка ставят развернутую реакцию агглютинации в пробирках

с увели-

других аутоантител.

(особенно вирусных) и инвазий (протозойные и гельминтозы); при ожоговой

чивающимися

разведениями

агглютинирующей

сыворотки,

которым

Таким образом, оценка иммунного статуса проводится на основании

болезни; при уремии; при опухолях; при нарушении обмена веществ и

добавляют по 2—3 капли взвеси возбудителя. Агглютинацию учитывают по

постановки большого числа лабораторных тестов, позволяющих оценить

истощении; при дисбиозах; при тяжелых травмах, обширных хирургических

количеству осадка и степени просветления жидкости. Реакцию считают

состояние как гуморального и клеточного звеньев иммунной системы, так и

операциях, особенно выполняемых под общим наркозом; при облучении,

положительной, если агглютинация отмечается в разведении, близком к

факторов неспецифической резистентности. Все тесты разделены на две

действии химических веществ; при старении, а также медикаментозные,

титру диагностической сыворотки. Одновременно учитывают контроли:

группы: тесты 1-го и 2-го уровня. Тесты 1-го уровня могут быть выполнены в

связанные с приемом лекарств.

сыворотка, разведенная изотоническим раствором натрия хлорида, должна

любой клинической иммунологической лаборатории первичного звена здра-

По времени возникновения выделяют антенатальные (например,

быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе — равномерно мутной,

воохранения, они используются для первичного выявления лиц с явно

ненаследственные формы синдрома ДиДжорджи), перинатальные (например,

без осадка.

выраженной иммунопатологией. Для более точной диагностики используются

нейтропения новорожденного, вызванная изосенсибилизацией матери к

Разные родственные бактерии могут агглютинироваться одной и той же

тесты 2-го уровня.

антигенам нейтрофилов плода) и постнатальные вторичные иммунодефицита.

диагностической агглютинирующей сывороткой, что затрудняет их

По

клиническому

течению

выделяют

компенсированную,

идентификацию.

Поэтому

пользуются

адсорбированными

субкомпенсированную и декомпенсированную формы вторичных иммуноде-

агглютинирующими сыворотками, из которых удалены перекрестно

фицитов.

Компенсированная

форма

сопровождается

повышенной

реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактериями. В

восприимчивостью организма к инфекционным агентам, вызывающим

таких сыворотках сохраняются антитела, специфичные только к данной

оппортунистические инфекции. Субкомпенсированная форма характеризуется

бактерии.

склонностью к хронизации инфекционных процессов. Декомпенсированная

форма проявляется в виде генерализованных инфекций, вызванных условно-

патогенными микробами (УПМ) и злокачественными новообразованиями.

Известно разделение вторичных иммунодефицитов на:

Физиологические, новорожденные, пубертатного периода, беременности и

лактации, старения, биоритмичности, экологические, сезонные, эндогенные

интоксикации, радиационные, СВЧ, патологические, постинфекционные,

стрессовые, регуляторно-метаболические, медикаментозные, онкологические.

Иммунодефициты, как первичные, так и особенно вторичные, широко

распространены среди людей. Они являются причиной проявления многих

болезней и патологических состояний, поэтому требуют профилактики и

лечения с помощью иммунотропных препаратов.

№ 75 Реакция Кумбса. Механизм. Компоненты. Применение.

№ 76 Реакция пассивной гемагглютинации. Компоненты. Применение.

№ 77 Реакция коагглютинации. Механизм, компоненты. Применение.

Реакцию агглютинации

для определения антирезусных

антител

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана

Реакцию

коагглютинации применяют для определения антигенов с

(непрямую реакцию Кумбса) применяют у больных при внутрисосудистом

на использовании эритроцитов (или латекса) с адсорбированными на их

помощью

антител,

адсорбированных

на

белке

А клеток

стафилококка

гемолизе. У некоторых таких больных обнаруживают антирезусные антитела,

поверхности антигенами или антителами, взаимодействие которых с соот-

(антительный диагностикум).

которые являются неполными, одновалентными. Они специфически

ветствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных

Белок А имеет сродство к Fc-фрагменту иммуноглобулинов, поэтому такие

взаимодействуют с резус-положительными эритроцитами, но не вызывают их

вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в

бактерии, обработанные иммунной диагностической сывороткой

агглютинации. Наличие таких неполных антител определяют в непрямой

виде фестончатого осадка.

неспецифически адсорбируют антитела сыворотки, которые затем

реакции Кумбса. Для этого в систему антирезусные антитела + резус-

Компоненты. Для постановки РНГА могут быть использованы эритроциты

взаимодействуют активными центрами с соответствующими микробами,

положительные эритроциты

добавляют антиглобулиновую

сыворотку

барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека и другие, которые

выделенными от больных. В результате коагглютинации образуются хлопья,

(антитела против иммуноглобулинов человека), что вызывает агглютинацию

заготавливают впрок, обрабатывая формалином или глютаральдегидом. Ад-

состоящие из стафилококков, антител диагностической сыворотки и

эритроцитов. С помощью реакции Кумбса диагностируют патологические

сорбционная емкость эритроцитов увеличивается при обработке их растворами

определяемого микроба.

состояния, связанные с внутрисосудистым лизисом эритроцитов иммунного

танина или хлорида хрома.

Механизм. Основан на том, что находящийся на поверхности золотистого

генеза, например гемолитическую болезнь новорожденных: эритроциты резус-

Антигенами в РНГА могут служить полисахаридные АГ микроорганизмов,

стафилококка белок А селективно реагирует с Fc-фрагментом IgGl, G2, G4,

положительного плода соединяются с циркулирующими в крови неполными

экстракты бактериальных вакцин, АГ вирусов и риккетсий, а также другие

оставляя свободными антидетерминанты Ат, которые, взаимодействуя с

антителами к резус-фактору, которые перешли через плаценту от резус-

вещества.

гомологичным Аг, вызывают агглютинацию стафилококков. Для постановки

отрицательной матери.

Эритроциты, сенсибилизированные АГ, называются эритроцитарными

КОА применяют коммерческие стафилококковые реагенты, содержащиеся в

Механизм. Сложность выявления неполных (моновалентных) антител

диагностикумами. Для приготовления эритроцитарного диагностикума чаще

ампулах или высушенные в лунках полистироловых пластин или

связана с тем, что эти антитела, связываясь с эпитопами специфического

всего используют эритроциты барана, обладающие высокой адсорбирующей

предметных стекол. К реагенту добавляют 0,01-0,1 мл исследуемой

антигена, не образуют структуру решетки и реакция между антигенами и

активностью.

культуры или растворимого Аг, инкубируют при комнатной температуре 10-

антителами не выявляется ни агглютинацией, ни преципитацией, ни другими

Применение. РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней,

30 мин (в условиях постановки реакции на стекле) или 18 -20 ч (в условиях

тестами. Для выявления образовавшихся комплексов антиген — антитело

определения гонадотропного гормона в моче при установлении беременности,

постановки реакции в капиллярах). Учет проводят так же, как при обычной

приходится использовать дополнительные тест-системы. Для выявления

для выявления повышенной чувствительности к лекарственным препаратам,

РА. Агглютинацию учитывают по количеству осадка и степени

неполных антител, например к резус-антигену эритроцитов в сыворотке крови

гормонам и в некоторых других случаях.

просветления

жидкости.

Реакцию

считают

положительной, если

беременной женщины, реакция ставится в два этапа: 1) к двукратным

Механизм. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) отличается

агглютинация отмечается в разведении, близком к титру диагностической

разведениям испытуемой сыворотки добавляют эритроциты, содержащие

значительно более высокой чувствительностью и специфичностью, чем

сыворотки. Одновременно учитывают контроли: сыворотка, разведенная

резус-антиген, и выдерживают при 37 °С в течение часа; 2) к тщательно

реакция агглютинации. Ее используют для идентификации возбудителя по его

изотоническим раствором натрия хлорида, должна быть прозрачной, взвесь

отмытым после первого этапа эритроцитам добавляют кроличью

антигенной структуре или для индикации и идентификации бактериальных

микробов в том же растворе — равномерно мутной, без осадка.

античеловеческую анти-глобулиновую сыворотку (в заранее оттитрованном

продуктов — токсинов в исследуемом патологическом материале.

рабочем разведении). После инкубации в течение 30 мин при 37 °С результаты

Соответственно используют стандартные (коммерческие) эритроцитарные

оценивают по наличию гемагглютинации (положительная реакция).

антительные диагностикумы, полученные путем адсорбции специфических

Необходимо ставить контроль ингредиентов реакции: 1) антиглобулиновая

антител на поверхности танизированных (обработанных танином)

сыворотка + заведомо сенсибилизированные специфическими антителами

эритроцитов. В лунках пластмассовых пластин готовят последовательные

эритроциты; 2) обработанные нормальной сывороткой эритроциты +

разведения исследуемого материала. Затем в каждую лунку вносят одинаковый

антиглобулиновая сыворотка; 3) обработанные исследуемой сывороткой резус-

объем 3 % суспензии нагруженных антителами эритроцитов. При

отрицательные эритроциты + антиглобулиновая сыворотка.

необходимости реакцию ставят параллельно в нескольких рядах лунок с

эритроцитами, нагруженными

антителами

разной

групповой

специфичности.

Через 2 ч инкубации при 37 °С учитывают результаты, оценивая внешний вид

осадка эритроцитов (без встряхивания): при отрицательной реакции

появляется осадок в виде компактного.диска или кольца на дне лунки, при

положительной реакции — характерный кружевной осадок эритроцитов,

тонкая пленка с неровными краями.

№ 78 Реакция торможения гемагглютинации. Механизм. Компоненты.

№ 80 Реакция связывания комплемента. Механизм. Компоненты.

№ 81 Реакция нейтрализации токсина антитоксином. Механизм.

Применение.

Способы постановки, применение.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) - метод идентификации

Реакция связывания комплемента (РСК) заключается в том, что при

В основе этой реакции лежит способность специфической антитоксической

вируса или выявления противовирусных антител в сыворотке крови больного,

соответствии друг другу антигены и антитела образуют иммунный комплекс, к

сыворотки нейтрализовать экзотоксин.

основанный на феномене отсутствия агглютинации эритроцитов препаратом,

которому через Fc-фрагмент антител присоединяется комплемент (С), т. е.

Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее

содержащим вирус, в присутствии иммунной к нему сыворотки крови.

происходит связывание комплемента комплексом антиген—антитело. Если же

действие микробов или их токсинов на чувствительные клетки и ткани, что

Реакция

торможения

гемагглютинации (РТГА) основана на блокаде,

комплекс антиген—антитело не образуется, то комплемент остается

связано с блокадой микробных антигенов антителами, т. е. их

подавлении антигенов вирусов антителами иммунной сыворотки, в результате

свободным.

нейтрализацией.

чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты.

Специфическое

взаимодействие

АГ

сопровождается

адсорбцией

Реакцию нейтрализации (РН) проводят путем введения смеси антиген—

РТГА применяют для диагностики многих вирусных болезней, возбудители

(связыванием) комплемента. Поскольку процесс связывания комплемента не

антитело животным или в чувствительные тест-объекты (культуру клеток,

которых (вирусы гриппа, кори, краснухи, клещевого энцефалита и др.) могут

проявляется визуально, Ж. Борде и О.Жангу предложили использовать в

эмбрионы). При отсутствии у животных и тест-объектов повреждающего

агглютинировать эритроциты различных животных.

качестве индикатора гемолитическую систему (эритроциты барана +

действия микроорганизмов или их антигенов, токсинов говорят о

Механизм. Типирование вируса проводят в реакции торможения гемаг-

гемолитическая сыворотка), которая показывает, фиксирован ли комплемент

нейтрализующем действии иммунной сыворотки и, следовательно, о спе-

глютинации (РТГА) с набором типоспецифических сывороток. Результаты

комплексом АГ-АТ. Если АГ и AT соответствуют друг другу, т. е. образовался

цифичности взаимодействия комплекса антиген—антитело.

реакции учитывают по отсутствию гемагглютинации. Подтипы вируса А с

иммунный комплекс, то комплемент связывается этим комплексом и гемолиза

Для проведения реакции исследуемый материал, в котором предполагается

антигенами H0N1, H1N1, Н2N2, H3N2 и др. могут быть дифференцированы в

не происходит. Если AT не соответствует АГ, то комплекс не образуется и

наличие экзотоксина, смешивают с антитоксической сывороткой,

РТГА с набором гомологичных типоспецифических сывороток.

комплемент, оставаясь свободным, соединяется со второй системой и вызывает

выдерживают в термостате и вводят животным (морским свинкам, мышам).

гемолиз.

Контрольным животным вводят фильтрат исследуемого материала, не

Компоненты. Реакция связывания комплемента (РСК) относится к сложным

обработанный сывороткой. В том случае, если произойдет нейтрализация

серологическим реакциям. Для ее проведения необходимы 5 ингредиентов, а

экзотоксина антитоксической сывороткой, животные опытной группы

именно: АГ, AT и комплемент (первая система), эритроциты барана и

останутся живыми. Контрольные животные погибнут в результате действия

гемолитическая сыворотка (вторая система).

экзотоксина.

Антигеном для РСК могут быть культуры различных убитых

микроорганизмов, их лизаты, компоненты бактерий, патологически

измененных и нормальных органов, тканевых липидов, вирусы и

вирусосодержащие материалы.

В качестве комплемента используют свежую или сухую сыворотку морской

№ 79

Реакция преципитации.

Механизм.

Компоненты.

Способы

свинки.

Механизм. РСК

проводят в две фазы:

1-я

фаза

— инкубация смеси,

постановки. Применение.

содержащей три компонента антиген + антитело + комплемент; 2-я фаза (инди-

Реакция преципитации (РП) - это формирование и осаждение комплекса

каторная) — выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к

ней

гемолитической

системы,

состоящей

из эритроцитов

барана,

растворимого

молекулярного

антигена с антителами в виде

помутнения,

называемого

преципитатом.

Он образуется

при

смешивании

антигенов и

гемолитической сыворотки, содержащей антитела к ним. В 1-й фазе реакции

при

образовании

комплекса антиген—антитело происходит

связывание

им

антител в эквивалентных количествах; избыток одного из них снижает уровень

комплемента, и тогда во 2-й фазе гемолиз сенсибилизированных антителами

образования иммунного комплекса.

РП ставят в пробирках (реакция кольцепреципитации), в гелях, питательных

эритроцитов не произойдет; реакция положительная. Если антиген и антитело

средах и др. Широкое распространение получили разновидности РП в

не соответствуют друг другу (в исследуемом образце нет антигена или

полужидком геле агара или агарозы: двойная иммунодиффузия по Оухтерлони,

антитела), комплемент остается свободным и во 2-й фазе присоединится к

радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и др.

комплексу эритроцит

— ан-тиэритроцитарное

антитело, вызывая гемолиз;

реакция отрицательная.

Механизм.

Проводится

прозрачными

коллоидными растворимыми

Применение. РСК

применяют

для

диагностики

многих

инфекционных

антигенами,

экстрагированными из

патологического материала,

объектов

внешней среды или чистых культур бактерий. В реакции используют

болезней, в частности сифилиса (реакция Вассермана).

прозрачные диагностические преципитирующие сыворотки с высокими

титрами антител. За титр преципитирующей сыворотки принимают то

наибольшее разведение антигена, которое при взаимодействии с иммунной

сывороткой вызывает образование видимого преципитата — помутнение.

Реакция кольцепреципитации ставится в узких пробирках (диаметр 0,5 см), в

которые вносят по 0,2—0,3 мл преципити-рующей сыворотки. Затем

пастеровской пипеткой медленно наслаивают 0,1—0,2 мл раствора антигена.

Пробирки осторожно переводят в'вертикальное положение. Учет реакции

производят через 1—2 мин. В случае положительной реакции на границе

между сывороткой и исследуемым антигеном появляется преципитат в виде

белого кольца. В контрольных пробирках преципитат не образуется.

№ 82 Реакция иммунофлюоресценции. Механизм, компоненты,

№ 83 Иммуноферментный анализ, иммуноблоттинг. Механизм,

№ 84 Серологические реакции, используемые для диагностики

применение.

компоненты, применение.

вирусных инфекций.

Иммунофлюоресцентный метод (РИФ, реакция иммунофлюоресценции,

Иммуноферментный анализ или метод — выявление антигенов с помощью

Иммунные реакции используют при диагностических и иммунологических

реакция Кунса) - метод выявления специфических Аг с помощью Ат,

соответствующих им антител, конъюгированных

ферментом-меткой

исследованиях у больных и здоровых людей. С этой целью применяют

конъюгированных с флюорохромом. Обладает высокой чувствительностью и

(пероксидазой хрена, бета-галактозидазой или щелочной фосфатазой). После

серологические методы, т. е. методы изучения антител и антигенов с помо-

специфичностью.

соединения антигена с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь

щью реакций антиген—антитело, определяемых в сыворотке крови и других

Применяется

для

экспресс-диагностики инфекционных

заболеваний

добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и

жидкостях, а также тканях организма.

(идентификация возбудителя в исследуемом материале), а также для

изменяется цвет продукта реакции — интенсивность окраски прямо

Обнаружение в сыворотке крови больного антител против антигенов

определения

Ат и

поверхностных

рецепторов

и маркеров

лейкоцитов

пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител. ИФА

возбудителя позволяет поставить диагноз болезни. Серологические

(иммунофенотипирование) и др. клеток.

применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных бо-

исследования применяют также для идентификации антигенов микробов,

Обнаружение бактериальных и вирусных антигенов в инфекционных

лезней, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита В и др., а также

различных биологически активных веществ, групп крови, тканевых и

материалах, тканях животных и культурах клеток при помощи

определения гормонов, ферментов, лекарственных препаратов и других

опухолевых антигенов, иммунных комплексов, рецепторов клеток и др.

флюоресцирующих антител (сывороток) получило широкое применение в

биологически активных веществ, содержащихся в исследуемом материале в

При выделении микроба от больного проводят идентификацию

диагностической практике. Приготовление флюоресцирующих сывороток

минорных концентрациях (1010-1012 г/л).

возбудителя путем изучения его антигенных свойств с помощью иммунных

основано на способности некоторых флюорохромов (например, изотиоцианата

Твердофазный ИФА — вариант теста, когда один из компонентов иммунной

диагностических сывороток, т. е. сывороток крови гипериммунизированных

флюоресцеина) вступать в химическую связь с сывороточными белками, не

реакции (антиген или антитело) сорбирован на твердом носителе, напр., в

животных, содержащих специфические антитела. Это так называемая

нарушая их иммунологической специфичности.

лунках планшеток из полистирола. Компоненты выявляют добавлением

серологическая идентификация микроорганизмов.

Различают три разновидности метода: прямой, непрямой, с комплементом.

меченых антител или антигенов. При положительном результате изменяется

В микробиологии и иммунологии широко применяются реакции

Прямой метод РИФ основан на том, что антигены тканей или микробы,

цвет хромогена. Каждый раз после добавления очередного компонента из

агглютинации, преципитации, нейтрализации, реакции с участием

обработанные иммунными сыворотками с антителами, меченными

лунок удаляют несвязавшиеся реагенты путем промывания,

комплемента, с использованием меченых антител и антигенов

флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного

I. При определении антител (левый рисунок) в лунки планшеток с

(радиоиммунологический, иммуноферментный, иммунофлюоресцентный

микроскопа. Бактерии в мазке, обработанные такой люминесцирующей

сорбированным

антигеном

методы). Перечисленные реакции различаются по регистрируемому эффекту

сывороткой, светятся по периферии клетки в виде каймы зеленого цвета.

последовательно

добавляют

сы-

и технике постановки, однако, все они основаны на реакции взаимодействия

Непрямой метод РИФ заключается в выявлении комплекса антиген - антитело

воротку

крови

больного,

антигена с антителом и применяются для выявления как антител, так и

с помощью антиглобулиновой (против антитела) сыворотки, меченной

антиглобулиновую сыворотку, ме-

антигенов. Реакции иммунитета характеризуются высокой чувствительнос-

флюорохромом. Для этого мазки из взвеси микробов обрабатывают

ченную

ферментом,

тью и специфичностью.

антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки. Затем

субстрат/хромоген для фермента.

Особенности взаимодействия антитела с антигеном являются основой

антитела, не связавшиеся антигенами микробов, отмывают, а оставшиеся на

II. При

определении

антигена

диагностических реакций в лабораториях. Реакция in vitro между антигеном

микробах антитела

выявляют,

обрабатывая мазок

антиглобулиновой

(правый рисунок)

в лунки с сорби-

и антителом состоит из специфической и неспецифической фазы. В специ-

(антикроличьей) сывороткой, меченной флюорохромами. В результате

рованными

антителами

вносят

фическую фазу происходит быстрое специфическое связывание активного

образуется комплекс микроб + антимикробные кроличьи антитела +

антиген (напр., сыворотку крови с

центра антитела с детерминантой антигена. Затем наступает

антикроличьи антитела, меченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдают

искомым

антигеном),

добавляют

неспецифическая фаза — более медленная, которая проявляется видимыми

в люминесцентном микроскопе, как и при прямом методе.

диагностическую

сыворотку против

физическими явлениями, например образованием хлопьев (феномен

Механизм. На предметном стекле готовят мазок из исследуемого материала,

него и вторичные антитела (против

агглютинации) или преципитата в виде помутнения. Эта фаза требует

фиксируют на пламени и обрабатывают иммунной кроличьей сывороткой,

диагностической

сыворотки),

наличия определенных условий (электролитов, оптимального рН среды).

содержащей антитела против антигенов возбудителя. Для образования

меченные ферментом, а затем

Связывание детерминанты антигена (эпитопа) с активным центром Fab-

комплекса антиген — антитело препарат помещают во влажную камеру и

субстрат/хромоген для фермента.

фрагмента антител обусловлено ван-дер-ваальсовыми силами, водородными

инкубируют при 37 °С в течение 15 мин, после чего тщательно промывают

Конкурентный

ИФА

для

связями и гидрофобным взаимодействием. Прочность и количество

изотоническим раствором хлорида натрия для удаления не связавшихся с

определения

антигенов:

искомый

связавшегося антигена антителами зависят от аффинности, авидности

антигеном антител. Затем на препарат наносят флюоресцирующую

антиген

меченный ферментом

антител и их валентности.

антиглобулиновую сыворотку против глобулинов кролика, выдерживают в

антиген конкурируют друг с другом

течение 15 мин при 37 °С, а затем препарат тщательно промывают

за связывание ограниченного количества антител иммунной сыворотки.

изотоническим раствором хлорида натрия. В результате связывания

Другой тест - Конкурентный ИФА для определения антител: искомые антитела

флюоресцирующей антиглобулиновой сыворотки с фиксированными на

и меченные ферментом антитела конкурируют друг с другом за антигены,

антигене специфическими анти телами

образуются

светящиеся

комплексы

сорбированные на твердой фазе.

антиген — антитело, которые

обнаруживаются

при

люминесцентной

Иммуноблоттинг — высокочувствительный метод выявления белков,

микроскопии.

основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА. Иммуноблоттинг

используют как диагностический метод при ВИЧ-инфекции и др.

Антигены возбудителя разделяют с помощью электрофореза в

полиакриламидном геле, затем переносят их из геля на активированную

бумагу или нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА.

Фирмы выпускают такие полоски с «блотами» антигенов. На эти полоски

наносят сыворотку больного. Затем, после инкубации, отмывают от

несвязавшихся антител больного и наносят сыворотку против

иммуноглобулинов человека, меченную ферментом. Образовавшийся на

полоске комплекс [антиген + антитело больного + антитело против Ig

человека] выявляют добавлением хромогенного субстрата, изменяющего

окраску под действием фермента.

№ 85 Диагностикумы. Получение, применение.

№ 86 Моноклональные антитела. Получение, применение.

№ 87 Методы приготовления и применения агглютинирующих,

адсорбированных сывороток.

В диагностических целях при обнаружении антител в сыворотке крови

Моноклональные антитела. Каждый В-лимфоцит и его потомки,

больных,

реконвалесцентов

бактерионосителей

используются

образовавшиеся в результате пролиферации (т.е. клон), способны

В диагностике инфекционных болезней широко применяются иммунные

серологические реакции.

синтезировать антитела с паратопом строго определенной специфичности.

реакции при идентификации возбудителя: при установлении родовой,

Для постановки таких реакций применяются диагностикумы - препараты,

Такие антитела получили название моноклональных. В природных условиях

видовой и типовой принадлежности микроба (вируса). Для постановки таких

содержащие взвесь обезвреженных микроорганизмов или определенные

макроорганизма получить моноклональные антитела практически невозможно.

реакций необходимы специфические диагностические сыворотки, которые в

антигены.

Дело в том, что на одну и ту же антигенную детерминанту одновременно

зависимости от содержания соответствующих антител называются

Необходимость использования диагностикумов для серологических реакций

реагируют до 100 различных клонов В-лимфоцитов, незначительно

агглютинирующие, преципитирующие, гемолитические, противовирусные.

связана не только с явным их преимуществом перед живыми культурами

различающихся антигенной специфичностью рецепторов и, естественно,

Агглютинирующие сыворотки. Агглютинирующую сыворотку получают

микробов (безопасность в работе), но еще и потому, что для приготовления

аффинностью. Поэтому в результате иммунизации даже монодетерминантным

иммунизацией Кроликов (внутривенно, подкожно или внутрибрюшинно)

диагностикумов подбираются штаммы микроорганизмов с высокой чувст-

антигеном мы всегда получаем политональные антитела.

взвесью убитых бактерий, начиная с дозы 200 млн., затем 500 млн., 1 млрд.,

вительностью к антителам и способностью длительно сохранять антигенные

Принципиально получение моноклональных антител выполнимо, если

2 млрд., микробных тел в 1 мл, с интервалами 5 дней. Через 7—8 дней после

свойства.

провести предварительную селекцию антителопродуцирующих клеток и их

последней иммунизации берут кровь и определяют титр антител. Титром

Для инактивации микроорганизмов при приготовлении диагностикумов

клонирование (т.е. выделение отдельных клонов в чистые культуры). Однако

агглютинирующей сыворотки называется то максимальное разведение

чаще всего используются химические вещества, особенно формалин,

задача осложняется тем, что В-лимфоциты, как и другие эукариотические

сыворотки, при котором происходит агглютинация с соответствующим

являющийся лучшим консервантом. Убитые нагреванием микробы хуже

клетки, имеют ограниченную продолжительность жизни и число возможных

микроорганизмом.

сохраняют антигенные свойства и применяются редко.

митотических делений.

Агглютинирующие сыворотки применяются при идентификации микроба в

В серологических реакциях (реакции агглютинации, реакции пассивной

Проблема получения моноклональных антител была успешно решена Д.

развернутой реакции агглютинации. Если изучаемый микроорганизм

гемагглютинации, реакции связывания комплемента, реакции торможения

Келлером и Ц. Милыптейном. Авторы получили гибридные клетки путем

агглютинируется сывороткой до титра или до половины значения титра, его

гемагглютинации) для выявления специфических антител применяются:

слияния иммунных В-лимфоцитов с миеломной (опухолевой) клеткой.

можно считать принадлежащим к тому виду, название которого указано на

бактериальные, эритроцитарные и вирусные диагностикумы.

Полученные гибриды обладали специфическими свойствами антителопро-

этикетке ампулы.

Бактериальные диагностикумы могут содержать инактивированную

дуцента и «бессмертием» раковотрансформированной клетки. Такой вид

Неадсорбированные агглютинирующие сыворотки обладают высоким

микробную взвесь или отдельные антигенные компоненты бактерий: О, Н или

клеток получил название гибридом. Гибридома хорошо размножается в

титром — до 1 : 12 800 — 1 : 25 600.

Vi-антигены и используются в реакциях агглютинации.

искусственных питательных средах и в организме животных и в неогра-

Недостатком таких сывороток является то, что они способны давать

Эритроцитарные

диагностикумы

представляют

собой

эритроциты

ниченном количестве вырабатывает антитела. В результате дальнейшей

групповые реакции агглютинации, так как они содержат антитела к

(обработанные танином или формалином) с адсорбированными на них

селекции были отобраны отдельные клоны гибридных клеток, обладавшие

бактериям, имеющим общие антигены в пределах семейства, группы и рода.

антигенами, извлеченными из бактерий, и применяются в РПГА (реакции

наивысшей продуктивностью и наибольшей аффинностью специфических

Поэтому в настоящее время большинство агглютинирующих сывороток

пассивной гемагглютинации). В том случае, когда РПГА используется для

антител.

выпускаются адсорбированиими, монорецепторными и адсорбированными

выявления

антигена в выделениях больных, в тканях и

др.,

применяют

Гибридомы, продуцирующие моноклональые антитела, размножают или в

поливалентными, содержащими только типовые или видовые антитела и

«антительные диагностикумы», т. е. эритроциты, сенсибилизированные

аппаратах, приспособленных для выращивания культур клеток или же вводя

соответствующими или определенному типу или виду микроорганизма. Эти

антителами.

их внутрибрюшинно особой линии (асцитным) мышам. В последнем случае

сыворотки не подлежат разведению.

Вирусные диагностикумы — препараты, содержащие инактированные

моноклональные антитела накапливаются в асцитной жидкости, в которой

Для получения таких сывороток нрименяют метод Кастелляни — метод

вируссодержащие жидкости (культуральные, из куриных эмбрионов или

размножаются губридомы. Полученные как тем, так и другим способом

адсорбции, который состоит в том, что при насыщении агглютинирующей

организма животных, зараженных соответствующим вирусом), применяются в

моноклональные антитела подвергают очистке, стандартизации и используют

сыворотки родственными гетерогенными бактериями происходит адсорбция

РСК

(реакции

связывания

комплемента),

реакции

торможения

для создания на их основе диагностических препаратов.

группоных антител, а специфические антитела остаются в сыворотке. В

гемагглютинации (РТГА) и реакции нейтрализации.

Гибридомные моноклональные антитела нашли широкое применение при

зависимости от полноты истощения групповых агглютининов можно

В настоящее время в лабораториях используются следующие диагноста кумы.

создании диагностических и лечебных иммунобиологических препаратов.

получить монорецепторные сыворотки — сыворотки, имеющие антитела

1. Бактериальный диагностикум сальмонелл тифа. Применяется в реакции

только к одному рецептору-антигену или адсорбированные, поливалентные,

агглютинации для обнаружения антител в сыворотке больных.

дающие реакции агглютинации с двумя — тремя родственными бактериями,

2. Сальмонеллезные О-диагностикумы содержат О-антигены различных групп

имеющими общий антиген, в отношении которого проводилась адсорбция.

сальмонелл (инактивированных 15%-ным раствором глицерина). Применяются

Адсорбированные сыворотки применяют при идентификации

для выявления О-аптител при сальмонеллезных инфекциях в реакции агглю-

выделенных возбудителей в реакции агглютинации на стекле (пластинчатый

тинации с сывороткой больных.

метод).

3. Сальмонеллезные Н-монодиагностикумы. Используются в реакции

Агглютинирующие сыворотки наиболее широко применяются при

агглютинации для определения заболевания в прошлом (анамнестическая

диагностике

заболеваний,

вызываемых

бактериями

семейства

реакция агглютинации) и реже с диагностической целью.

Enferobacferiaceae. Так, при идентификации эшерихий используются

4. Vi — брюшнотифозный диагностикум. Применяется в реакции

поливалентные и типовые ОК-сыворотки; при дифференциации сальмонелл

агглютинации при выявлении брюшнотифозного бактерионосительства.

— набор сывороток: агглютинирующая адсорбированная поливалентная

5. Единый бруцеллезный диагностикум — взвесь бруцелл (инактивированных

сальмонеллезная О-сыворотка (групп А, В, С, Д, Е) — для определения

фенолом), подкрашенная метиленовым синим. Применяется для определения

принадлежности к роду Salmonella, при положительном результате —

антител в сыворотках крови больных бруцеллезом людей и животных в

определяют отдельно с каждой сывороткой (входящей в смесь)

реакциях агглютинации Райта и Хеддльсона.

серологическую группу и в заключение определяется серологический тип

6. Эритроцитарный сальмонеллезный О-диагностикум — взвесь эритроцитов с

выделенного возбудителя с моно-рецепторными Н-сыворотками сальмонелл,

адсорбированными на них О-антигенами различных групп сальмонелл.

входящих в данную группу.

Используется для постановки РПГА с сывороткой больного при уточнении

клинического диагноза сальмонеллеэной инфекции.

7. Эритроцитарный Vi-диагностикум — эритроциты, сенсибилизированные

очищенным Vi-антигеиом S. typhi, применяется в РПГА при выявлении

брюшнотифозного бактерионосительства.

8. Гриппозный диагностикум представляет собой аллантоисную жидкость

инфицированных вирусом гриппа (типов А, В) куриных эмбрионов и

инактивированную мертиолатом или формалином. Диагностикумы

необходимы при постановке РТГА с парными сыворотками больных для

уточнения клинического диагноза и циркулирующего типа вируса гриппа.

9. Диагностикум вируса клещевого энцефалита получают из суспензии мозга

белых мышей, зараженных вирусом клещевого энцефалита. Суспензию

подвергают центрифугированию (для осветлення) и инактивируют

химическими веществами.

Диагностикум используется в РТГА и РСК с сывороткой больных при

диагностике заболевания.

№ 88 Вакцины. Определение. Современная классификация вакцин.

№ 89 Живые вакцины. получение, применение. Достоинства и недостатки.

№ 90 Инактивированные (корпускулярные) вакцины. Применение.

Требования, предъявляемые к современным вакцинным препаратам.

Недостатки.

Живые вакцины - препараты, действующим началом в которых являются

Вакцина — медицинский препарат, предназначенный для создания

ослабленные тем или иным способом, потерявшие свою вирулентность, но

Инактивированные (убитые, корпускулярные или молекулярные)

иммунитета к инфекционным болезням.

сохранившие специфическую антигенность штаммы патогенных бактерий.

вакцины – препараты, в качестве действующего начала включающие

Классификации вакцин:

Аттенуация (ослабление) возможна путём воздействия на штамм химических

убитые

химическим

или

физическим

способом культуры

патогенных

1.Живые вакцины

- препараты, действующим началом в которых являются

(мутагены) и физических (температура) факторов или посредством длительных

вирусов или бактерий, (клеточные, вирионные) или же извлечённые из

ослабленные тем или иным способом, потерявшие свою вирулентность, но

пассажей через невосприимчивый организм. Так же в качестве живых вакцин

патогенных микробов комплексы антигенов, содержащие в своём составе

сохранившие специфическую антигенность штаммы патогенных бактерий.

используются дивергентные штаммы (непатогенные для человека), имеющие

проективные антигены (субклеточные, субвирионные вакцины).

Примером таких вакцин являются БЦЖ и вакцина против натуральной оспы

общие протективные антигены с патогенными для человека микробами.

Для выделения из

бактерий

и вирусов

антигенных

комплексов

человека, в качестве которой используется непатогенный для человека вирус

Примером такой вакцины является БЦЖ и вакцина против натуральной оспы.

(гликопротеинов, ЛПС, белков) применяют трихлоруксусную кислоту,

оспы коров.

Возможно получение живых вакцин генно-инженерным способом. Принцип

фенол, ферменты, изоэлектрическое осаждение.

2.Инактивированные (убитые) вакцины – препараты, в качестве

получения таких вакцин сводится к созданию непатогенных для человека

Их получают путем выращивания патогенных бактерий и вирусов на

действующего начала включающие убитые химическим или физическим

рекмбинантных штаммов, несущих протективные антигены патогенных

искусственных питательных средах, инактивируют, выделяют антигенные

способом культуры патогенных вирусов или бактерий, (клеточные,

микробов и способных при введении в орг. человека размножаться и создавать

комплексы, очищают, конструируют в виде жидкого или лиофильного

вирионные) или же извлечённые из патогенных микробов комплексы

иммунитет. Такие вакцины называют векторными.

препарата.

антигенов, содержащие в своём составе проективные антигены (субклеточные,

Вне зависимости от того, какие штаммы включены в вакцины,

бактерии

Преимуществом данного типа вакцин является относительная простота

субвирионные вакцины). В препараты иногда добавляют консерванты и

получают путём выращивания на искусственных питательных средах,

получения (не требуется длительного изучения и выделения штаммов). К

адьюванты.

культурах клеток или куриных эмбрионах. В живую вакцину, как правило,

недостаткам же относятся низкая иммуногенность, потребность в

Молекулярные вакцины – в них антиген находится в молекулярной форме

добавляют стабилизатор, после чего подвергают лиофильному высушиванию.

трехкратном применении и высокая реактогенность формализированных

или даже в виде фрагментов его молекул, определяющих специфичность т. е. в

В связи с тем, что живые вакцины способны вызывать вакцинную инфекцию

вакцин. Так же, по сравнению с живыми вакцинами, иммунитет,

виде эпитопов, детерминант.

(живые аттенуированные микробы размножаются в организме, вызывая

вызываемый ими, непродолжителен.

Корпускулярные вакцины – содержащие в своем составе протективный

воспалительный процесс проходящий без клинических проявлений), они

В настоящее время применяются следующие убитые вакцины:

антиген

всегда вызывают перестройку иммунобиологического статуса организма и

брюшнотифозная, обогащенная Vi антигеном; холерная вакцина, коклюшная

3.Анатоксины относятся к числу наиболее эффективных препаратов. Принцип

образование специфических антител. Это так же может являться недостатком,

вакцина

получения – токсин соответствующей бактерии в молекулярном виде

т. к. живые вакцины чаще вызывают аллергические реакции.

превращают в нетоксичную, но сохранившую свою антигенную

Вакцины данного типа, как правило, вводятся однократно.

специфичность форму путем воздействия 0.4% формальдегида при 37t в

Примеры: сибиреязвенная вакцина, чумная вакцина, бруцеллёзная вакцина,

течение 3-4 недель, далее анатоксин концентрируют, очищают, добавляют

БЦЖ вакцина, оспенная дермальная вакцина.

адьюванты.

№ 91 Субклеточные и субъединичные вакцины. Получение.

№ 92 Молекулярные вакцины. Анатоксины. Получение, очистка,

4.Синтетические вакцины. Молекулы эпитопов сами по себе не обладают

Преимущество. Применение. Роль адъювантов.

титрование. Применение.

высокой иммуногенностью для повышения их антигенных свойств эти

Действующим началом этого типа препаратов являются протективные

Молекулярные вакцины – в них антиген находится в молекулярной форме

молекулы сшиваются с полимерным крупномолекулярным безвредным

антигены бактерий, полученные путем воздействия ультразвука на

или даже в виде фрагментов его молекул, определяющих специфичность т. е.

веществом, иногда добавляют адьюванты.

бактериальные клетки.

в виде эпитопов, детерминант.

5.Ассоциированные вакцины – препараты, включающие несколько

Главным преимуществом данного типа вакцин является их низкая

В процессе культивирования природных патогенных микробов можно

разнородных антигенов.

реактогеннность.

получить протективный антиген, синтезируемый этими бактериями токсин

Требования, предъявляемые к современным вакцинам:

Адьюванты применяются для усиления иммуногенности вакцин.

В качестве

затем

превращается

анатоксин,

сохраняющий

специфическую

Иммуногенность;

адъювантов используют минеральные сорбенты (гели гидрата окиси и фосфата

антигенность

иммуногенность.

Анатоксины

являются

одним из видов

Низкая реактогенность (аллергенность);

аммония), полимеры, и др. хим. соединения, бактерии и компоненты бактерий,

молекулярных

вакцин.

Анатоксины

–

препараты,

полученные

из

Не должны обладать тератогенностью, онкогенностью;

липиды, вещества, вызывающие воспалительную реакцию. Они действуют на

бактериальных

экзотоксинов,

полностью

лишенные своих

токсических

Штаммы,

из которых приготовлена

вакцина, должны быть

генетически

антиген и организм в целом. Действие на антиген сводится к укрупнению

свойств, но сохранившие антигенные и иммуногенные свойства. Получение:

стабильны;

молекул антигена, т. е. превращению растворимых антигенов в

токсигенные бактерии выращивают на жидких средах, фильтруют с

Длительный срок хранения;

корпускулярные, в результате чего антиген лучше захватывается

помощью бактериальных фильтров для удаления микробных тел, к

Технологичность производства;

иммунокомпетентными клетками. При воздействии на организм в месте

фильтрату добавляют 0,4% формалина и выдерживают в термостате при 30-

Простота и доступность в применении.

инъекции адьюванты вызывают воспалительный процесс образование

40t на 4 недели до полного исчезновения токсических свойств, проверяют на

фиброзной капсулы, что способствует более длительному сохранению

стерильность, токсигенность и иммуногенность. Эти препараты называются

антигена в «депо» и суммации антигенных раздражений. Адьюванты так же

нативными анатоксинам, в настоящее время почти не используются, т. к.

непосредственно активируют пролиферацию В, Т и А систем иммунитета.

содержат большое количество балластных веществ, неблагоприятно

влияющих на организм. Анатоксины подвергаю физической и химической

очистке, адсорбируют на адъювантах. Такие препараты называются

адсорбированными

высокоочищенными

концентрированными

анатоксинами.

Титрование

анатоксинов

реакции

фолликуляции

производят

по

стандартной

фолликулирующей

атитоксической сыворотке,

в которой

известно количество антитоксических единиц. 1 антигенная единица

анатоксина обозначается Lf, это то количество анатоксина, которое вступает

в реакцию фолликуляции с 1 единицей дифтерийного анатоксина.

Анатоксины применяются для профилактики и реже, для лечения

токсинемических инфекций дифтерия, газовая гангрена, ботулизм,

столбняк). Так же анатоксины применяются для получения антитоксических

сывороток путем гипериммунизации животных.

Примеры препаратов: АКДС, АДС, адсорбированный стафилококковый

анатоксин, ботулинистический анатоксин, анатоксины из экзотоксинов

возбудителей газовых инфекций.

№ 93 Ассоциированные и комбинированные вакцинные препараты.	№ 94 Генно-инженерные вакцины. Принципы получения, применение.	№ 95 Иммунные сыворотки. Классификация. Получение, очистка.
Достоинства. Вакцинотерапия.		Применение.
Ассоциированные вакцины – препараты, включающие несколько	Генно-инженерные вакцины – это препараты, полученные с помощью
разнородных антигенов и позволяющие проводить иммунизацию против	биотехнологии, которая по сути сводиться к генетической рекомбинации .	Иммунные сыворотки: иммунологические препараты на основе антител.
нескольких инфекций одновременно. Если в препарат входят однородные	Для начала получают ген, который должен быть встроен в геном реципиента.	1.Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма,
антигены, то такую ассоциированную вакцину называют поливакциной. Если	Небольшие гены могут быть получены методом химического синтеза. Для	газовой гангрены, т.е. сыворотки, содержащие в качестве антител
же ассоциированный препарат состоит из разнородных антигенов, то его	этого расшифровывается число и последовательность аминокислот в белковой	антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.
целесообразно называть комбинированной вакциной.	молекуле вещества, затем по этим данным узнают очерёдность нуклеотидов в	2.Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины,
Возможна так же комбинированная иммунизация, когда одновременно вводят	гене, далее следует синтез гена химическим путем.	комплементсвязывающие антитела к возбудителям брюшного тифа,
несколько вакцин в различные участки тела, например, против оспы(накожно)	Крупные структуры, которые довольно сложно синтезировать получаются	дизентерии, чумы, коклюша.
и чумы(подкожно)	путем выделения(клонирования), прицельного выщепления этих генетических	3.Противовирусные сыворотки (коревая, гриппозная, антирабическая)
Примером поливакцины можно считать живую полиомиелитную поливакцину,	образований с помощью рестриктаз.	содержат	вируснейтрализующие,	комплементсвязывающие
содержащую аттенуированные штаммы вируса полиомиелита I, II, III типов.	Полученный одним из способов целевой ген с помощью ферментов сшивается	противовирусные антитела.
Примером комбинированной вакцины является АКДС, куда входят	с другим геном, который используется в качестве вектора для встраивания	Иммунные сыворотки получают путем гипериммунизации животных (ло-
инактивированная корпускулярная коклюшная вакцина, дифтерийный и	гибридного гена в клетку. Вектором могут служить плазмиды, бактериофаги,	шади) специфическим антигеном (анатоксином, бактериальными или
столбнячный анатоксин.	вирусы человека и животных. Экспрессируемый ген встраивается в	вирусными культурами и их антигенами) с последующим, в период
Комбинированные вакцины применяются в сложной противоэпидемической	бактериальную или животную клетку, которая начинает синтезировать	максимального антителообразования, выделением из крови иммунной
обстановке. В основе их действия лежит способность иммунной системы	несвойственное ей ранее вещество, кодируемое эксперссируемым геном.	сыворотки. Иммунные сыворотки, полученные от животных, называют
отвечать на несколько антигенов одновременно	В качестве реципиентов экспрессируемого гена чаще всего используется E.	гетерогенными, так как они содержат чужеродные для человека
	coli, B. subtilis, псевдомонады, дрожжи, вирусы. некоторые штаммы способны	сывороточные белки.
	переключаться на синтез чужеродного вещества до 50% своих синтетических	Для получения гомологичных нечужеродных иммунных сывороток
	возможностей – эти штамм называются суперпродуцентами.	используют сыворотки переболевших людей (коревая, оспенная сыворотки)
	Иногда к генно-инженерным вакцинам добавляется адъювант.	или специально иммунизированных людей-доноров (противостолбнячная,
	Примерами таких вакцин служат вакцина против гепатита В (энджерикс),	противоботулиническая), содержащие антитела к ряду возбудителей
	сифилиса, холеры, бруцеллёза, гриппа, бешенства.	инфекционных болезней вследствие вакцинации или перенесенного
	Есть определённые сложности в разработке и применении:	заболевания.
	- длительное время к генно-инженерным препаратам относились	Нативные иммунные сыворотки содержат ненужные белки (альбумин), из
	настороженно.	этих сывороток выделяют и подвергают очистке специфические белки-
	- на разработку технологии для получения вакцины затрачиваются	иммуноглобулины. Методы очистки: осаждение спиртом, ацетоном на
	значительные средства	холоде, обработка ферментами.
	- при получении препаратов данным способом возникает вопрос об	Иммунные сыворотки создают пассивный специфический иммунитет сразу
	идентичности полученного материала природному веществу.	после введения. Применяют с лечебной и профилактической целью. Для
		лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая
		гангрена), а также для лечения бактериальных и вирусных инфекций (корь,
		краснуха, чума, сибирская язва). С лечебной целью сывороточные препараты
		в/м. Профилактически: в/м лицам, имевшим контакт с больным, для
		создания пассивного иммунитета.

№ 96 Антитоксические сыворотки. Получение, очистка, титрование.						№ 97 Препараты иммуноглобулинов. Получение, очистка, показания к	№ 98 Понятие об иммуномодуляторах. Принцип действия. Применение.
Применение. Осложнения при использовании и их предупреждение.						применению.
							Иммуномодуляторы – вещества, оказывающие влияние на функцию
Антитоксические	гетерогенные	сыворотки	получаются		путем	Нативные иммунные сыворотки содержат ненужные белки (альбумин), из этих	иммунной системы, изменяющие активность иммунной системы в сторону
гипериммунизации различных животных. Они называются гетерогенными т.к.						сывороток выделяют и подвергают очистке специфические белки-	повешения (иммуностимуляторы) или понижения (иммунодепрессанты) её
содержат чужеродные для человека сывороточные белки. Более						иммуноглобулины.	активности.
предпочтительным является применение гомологичных антитоксических						Иммуноглобулины, иммунные сыворотки подразделяют на:	К экзогенным иммуномодуляторам относится большая группа веществ
сывороток, для получения которых используется сыворотка переболевших						1.Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма,	различной химической природы и происхождения, оказывающих
людей (коревая,	паротидная), или специально иммунизированных					газовой гангрены, т.е. сыворотки, содержащие в качестве антител	неспецифическое активирующее или супрессивное действие на иммунную
доноров(противостолбнячная, противоботулинистическая), сыворотка из						антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.	систему, но являющихся чужеродными для организма. Антибиотики,
плацентарной а так же абортивной крови, содержащие антитела к ряду						2.Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины,	левамизол, полисахариды, ЛПС, адъюванты.
возбудителей инфекционных болезней вследствие вакцинации или						комплементсвязывающие антитела к возбудителям брюшного тифа,	Эндогенные иммуномодуляторы представляют собой достаточно большую
перенесенного заболевания.						дизентерии, чумы, коклюша.	группу олигопептидов, синтезируемых самим организмом, его
Для очистки и концентрирования антитоксических сывороток используют						3.Противовирусные сыворотки (коревая, гриппозная, антирабическая)	иммунокомпетентными клетками, и способных активировать иммунную сис-
методы: осаждение спиртом или ацетоном на холоде, обработка ферментами,						содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные	тему путем усиления функции иммунокомпетентных клеток. К ним
аффинная хроматография, ультрафильтрация.						антитела.	относятся регуляторные пептиды: интерлейкины, интерфероны, гормоны
Активность иммунных антитоксических сывороток выражают в						Методы очистки: осаждение спиртом, ацетоном на холоде, обработка	тимуса.
антитоксических единицах, т.е. тем наименьшим кол-вом антител, которое						ферментами, аффинная хроматография, ультрафильтрация.	Применение иммуномодуляторов: при первичных и вторичных имму-
вызывает видимую или регистрируемую соответствующим способом реакцию						Активность иммуноглобулинов выражают в антитоксических единицах, в	нодефицитах различного происхождения, при онкологических болезнях, при
с определённым	кол-вом специфического		антигена.	активность		титрах вируснейтрализующей, гемагглютинирующей, агглютинирующей	трансплантации органов и тканей, при лечении иммунопатологических и
антитоксической противостолбнячной сыворотки и соответствующего Ig						активности, т.е. тем наименьшим количеством антител, которое вызывает	аллергических болезней, в иммунопрофилактике и лечении инфекционных
выражается в антитоксических единицах.						видимую реакцию с определенным количеством специфического антигена.	болезней.
Антитоксические сыворотки применяются для лечения токсинемических						Иммуноглобулины создают пассивный специфический иммунитет сразу после	Созданы препараты, обладающие иммуномодулирующим действием:
инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена).						введения. Применяют с лечебной и профилактической целью. Для лечения	интерферон, лейкоферон, виферон.
После введения антитоксических сывороток возможны осложнения в виде						токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена),
анафилактического шока и сывороточной болезни, поэтому пред введением						а также для лечения бактериальных и вирусных инфекций (корь, краснуха,
препаратов ставят аллергическую пробу на чувствительность к ним пациента, а						чума, сибирская язва). С лечебной целью сывороточные препараты в/м.
вводят их дробно, по Безредке.						Профилактически: в/м лицам, имевшим контакт с больным, для создания
						пассивного иммунитета.
						При необходимости экстренного создания иммунитета, для лечения
						развивающейся инфекции применяют иммуноглобулины, содержащие готовые
						антитела.

№ 99 Интерфероны. Природа, способы получения. Применение.

№ 100 Иммунотерапия и иммунопрофилактика инфекционных болезней.

№ 101 Методы микробиологической диагностики инфекционных

болезней

Интерфероны — гликопротеины, вырабатываемые клетками в ответ на

Иммунопрофилактика и иммунотерапия являются разделами иммунологии,

вирусную инфекцию и другие стимулы. Блокируют репродукцию вируса в

которые изучают и разрабатывают способы и методы специфической

Микробиологические

(бактериологические,

микологические,

других клетках и участвуют во взаимодействии клеток иммунной системы.

профилактики, лечения и диагностики инфекционных и неинфекционных

вирусологические) методы основаны на выделении чистой культуры

Различают две серологические группы интерферонов: I тип — ИФН-α и ИФН -

болезней с помощью иммунобиологических препаратов, оказывающих

возбудителя и ее последующей идентификации на основании

β; II тип — ИФН-.γ Интерфероны I типа оказывают противовирусные и

влияние на функцию иммунной системы, или действие которых основано на

морфологических,

культуральных,

биохимических,

антигенных

противоопухолевые эффекты, в то время как интерферон II типа регулирует

иммунологических принципах.

(серологических) и других признаков. Располагая чистой культурой

специфический иммунный ответ и неспецифическую резистентность.

Иммунопрофилактика направлена на создание активного или пассивного

бактерий, можно определить их родовую и видовую принадлежность,

α- интерферон (лейкоцитарный) продуцируется лейкоцитами, обработанными

иммунитета к возбудителю инфекционной болезни, его антигену с целью

факторы патогенности, а также чувствительность к антибиотикам и

вирусами и другими агентами. β-интерферон (фибробластный) продуцируется

предупреждения

возможного

заболевания

путем

формирования

химиотерапевтическим препаратам.

фибробластами, обработанными вирусами.

невосприимчивости к ним организма.

Микологические

исследования

осуществляются

реже,

чем

ИФН I типа, связываясь со здоровыми клетками, защищает их от вирусов.

Иммунотерапия направлена на лечение уже развившейся болезни, в основе

бактериологические, поскольку микроскопическая диагностика микозов

Антивирусное действие ИФН I типа может обуславливаться и тем, что он

которой лежит нарушение функции иммунной системы.

достаточно надежна. Микологические исследования проводят при

способен угнетать клеточную пролиферацию, препятствуя синтезу аминокис-

Иммунопрофилактика и иммунотерапия применяются, когда необходимо:

диагностике кандидозов путем определения нарастания количества клеток

лот.

а)сформировать, создать специфический иммунитет, активизировать

дрожжеподобных грибов рода Candida, а также глубоких микозов.

ИФН-γ продуцируется Т-лимфоцитами и NK. Стимулирует активность Т- и В-

деятельность иммунной системы;

Вирусологический метод является наиболее достоверным в диагностике

лимфоцитов, моноцитов/макрофагов и нейтрофилов. Индуцирует апоптоз

б) подавить активность звеньев иммунной системы;

вирусных инфекций. Однако его трудоемкость, связанная с приготовлением

активированных макрофагов, кератиноцитов, гепатоцитов, клеток костного

в)нормализовать работу иммунной системы.

культуры клеток, обработкой исследуемого материала, а также со

мозга, эндотелиоцитов и подавляет апоптоз периферических моноцитов и

Иммунопрофилактика и иммунотерапия применяются в профилактике и

сравнительно частым получением отрицательных результатов, ограничивают

герпес-инфицированных нейронов.

лечении инфекционных болезней, аллергий, иммунопатологических состо-

применение данного метода. Кроме того, он требует затраты сравнительно

Генно-инженерный лейкоцитарный интерферон получают в прокариотических

яний, в онкологии, трансплантологии, при первичных и вторичных

большого времени, особенно при проведении «слепых» пассажей. Во многих

системах (кишечной палочке). Биотехнология получения лейкоцитарного

иммунодефицитах.

случаях вирусологический метод используют для ретроспективной

интерферона включает следующие этапы: 1) обработка лейкоцитарной массы

В лечении токсинемических инфекций (ботулизм, столбняк) значение имеет

диагностики вирусных инфекций.

индукторами интерферона; 2) выделение из обработанных клеток смеси иРНК;

серотерапия, т.е. применение антитоксических сывороток, и иммуноглобулин.

Все микробиологические методы имеют определяющее значение в

3) получение суммарных комплементарных ДНК с помощью обратной

В терапии онкологических болезней применяются иммуноцитокины.

лабораторной диагностике, являются наиболее информативными и

транскриптазы; 4) встраивание кДНК в плазмиду кишечной палочки и ее

Для всего этого – иммунобиологические препараты.

достоверными, особенно если они подтверждены дополнительными

клонирование; 5) отбор клонов, содержащих гены интерферона; 6) включение

серологическими данными.

в плазмиду сильного промотора для успешной транскрипции гена; 7)

экспрессия гена интерферона, т.е. синтез соответствующего белка; 8)

разрушение прокариотических клеток и очистка интерферона с помощью

аффинной хроматографии.

Интерфероны применяются для профилактики и лечения ряда вирусных

инфекций. Их эффект определяется дозой препарата, однако высокие дозы

интерферона оказывают токсическое действие. Интерфероны широко

применяются при гриппе и других острых респираторных заболеваниях.

Препарат эффективен на ранних стадиях заболевания, применяется местно.

Интерфероны оказывают терапевтическое действие при гепатите В, герпесе, а

также при злокачественных новообразованиях.

№ 102 Возбудители брюшного тифа и паратифов. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

Брюшной тиф и паратифы А и В — острые кишечные инфекции, характеризующиеся поражением лимфатического аппарата кишечника, выраженной интоксикацией. Их возбудителями являются соответственно

Salmonella typhi, Salmonella paratyphi А и Salmonella schottmuelleri.

Таксономическое положение. Возбудители брюшного тифа и паратифов А и В относятся к отделу Gracilicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду Salmonella.

Морфологические и тинкториальные свойства. Сальмонеллы — мелкие грамотрицательные палочки с закругленными концами. В мазках располагаются беспорядочно. Не образуют спор, имеют микрокапсулу, перитрихи.

Культуральные свойства. Сальмонеллы — факультативные анаэробы. Оптимальными для роста являются температура 37С. Растут на простых питательных средах. Элективной средой для сальмонелл является желчный бульон.

Биохимическая активность сальмонелл достаточно высока, но они не сбраживают лактозу. S.typhi менее активна, чем возбудители паратифов. Антигенные свойства и классификация. Сальмонеллы имеют О- и H- антигены, состоящие из ряда фракций. Каждый вид обладает определенным набором антигенов. Все виды сальмонелл, имеющие общую так называемую групповую фракцию 0-антигена, объединены в одну группу. Таких групп в настоящее время насчитывается около 65. S.typhi и некоторые другие сальмонеллы имеют Vi-антиген (разновидность К-антигена), с этим антигеном связывают вирулентность бактерий, их устойчивость к фагоцитозу.

Факторы патогенности. Сальмонеллы образуют эндотоксин, обладающий энтеротропным, нейротропным и пирогенным действием. С белками наружной мембраны связаны адгезивные свойства, наличие микрокапсулы обусловливает устойчивость к фагоцитозу.

Резистентность. Сальмонеллы довольно устойчивы к низкой т-ре. Очень чувствительны к дезинфицирующим веществам, высокой температуре, ультрафиолетовым лучам. В пищевых продуктах (мясе, молоке) сальмонеллы могут не только долго сохраняться, но и размножаться.

Эпидемиология. Брюшной тиф и паратиф А — антропонозные инфекции; источником заболевания являются больные люди и бактерионосители. Источником паратифа В могут быть также сельскохозяйственные животные. Механизм заражения фекально-оральный. Среди путей передачи преобладает водный.

Патогенез. Возбудители попадают в организм через рот, достигают тонкой кишки, где в ее лимфатических образованиях размножаются и затем попадают в кровь (стадия бактериемии). С током крови они разносятся по всему организму, внедряясь в паренхиматозные органы (селезенку, печень, почки, костный мозг). При гибели бактерий освобождается эндотоксин, вызывающий интоксикацию. Из желчного пузыря, где С. могут длительно сохраняться, они вновь попадают в те же лимфатические образования тонкой кишки. В результате повторного поступления С. может развиться аллергическая реакция, проявляющаяся в виде воспаления, а затем некроза лимфатических образований. Сальмонеллы выводятся из организма с мочой и калом.

Клиника. Клинически брюшной тиф и паратифы неразличимы. Инкубационный период составляет 12 дней. Болезнь начинается остро: с повышения температуры тела, появления слабости, утомляемости; нарушаются сон и аппетит. Для брюшного тифа характерны помутнение сознания, бред, галлюцинации, сыпь. Очень тяжелыми осложнениями являются прободение стенки кишки, перитонит, кишечное кровотечение, возникающие в результате некроза лимфатических образований тонкой кишки.

Иммунитет. После перенесенной болезни иммунитет прочный и продолжительный.

Микробиологическая диагностика. Основной метод диагностики —

бактериологический: посев и выделение S. typhi из крови (гемокультура), фекалий (копрокультура), мочи (урино-культура), желчи, костного мозга. РИФ для обнаружения антигена возбудителя в биологических жидкостях. Серологический метод обнаружения 0- и Н- антител в РПГА. Бактерионосителей выявляют по обнаружению Vi-антител в сыворотке крови с помощью РПГА и положительному результату бактериологического; выделения возбудителя. Для внутривидовой идентификации применяют фаготипирование.

Лечение. Антибиотики. Иммуноантибиотикотерапия.

Профилактика. Санитарно-гигиенические мероприятия. Вакцинация - брюшнотифозная химическая и брюшно-тифозная спиртовая вакцина,

обогащенная Vi-антигеном. Для экстренной профилактики	-
брюшнотифозный бактериофаг.

№ 103 Возбудители эшерихиозов. Таксономия. Характеристика. Роль кишечной палочки в норме и патологии. Микробиологическая диагностика эшерихиозов.

Эшерихиозы - инфекционные болезни, возбудителем которых является

Escherichia coli.

Различают энтеральные (кишечные) и парентеральные эшерихиозы. Энтеральные эшерихиозы — острые инфекционные болезни, характеризующиеся преимущественным поражением ЖКТ. Они протекают в виде вспышек, возбудителями являются диареегенные штаммы E.coli. Парентеральные эшерихиозы — болезни, вызываемые условно-патогенными штаммами E.coli — представителями нормальной микрофлоры толстой кишки. При этих болезнях возможно поражение любых органов.

Таксономическое положение. Возбудитель — кишечная палочка — основной представитель рода Escherichia, семейства Enterobacteriaceae, относящегося к отделу Gracilicutes.

Морфологические и тинкториальные свойства. E.coli — это мелкие грамотрицательные палочки с закругленными концами. В мазках они располагаются беспорядочно, не образуют спор, перитрихи. Некоторые штаммы имеют микрокапсулу, пили.

Культуральные свойства. Кишечная палочка — факультативный анаэроб, оптим. темп. для роста - 37С. E.coli не требовательна к питательным средам и хорошо растет на простых средах, давая диффузное помутнение на жидких и образуя колонии на плотных средах. Для диагностики эшерихиозов используют дифференциально-диагностические среды с лактозой — Эндо, Левина.

Ферментативная активность. E.coli обладает большим набором различных ферментов. Наиболее отличительным признаком E.coli является ее способность ферментировать лактозу.

Антигенная структура. Кишечная палочка обладает соматическим О-, жгутиковым Н и поверхностным К -антигенами. О-антиген имеет более 170 вариантов, К-антиген — более 100, Н-антиген — более 50. Строение О- антигена определяет принадлежность к серогруппе. Штаммы E.coli, имеющие присущий им набор антигенов (антигенную формулу), называются

серологическими вариантами (серовары).

По антигенным, токсигенным, свойствам различают два биологических варианта E.coli: 1) условно-патогенные кишечные палочки; 2) «безусловно» патогенные, диареегенные.

Факторы патогенности. Образует эндотоксин, обладающий энтеротропным, нейротропным и пирогенным действием. Диареегенные эшерихии продуцируют экзотоксин вызывающий значительное нарушение водносолевого обмена. Кроме того, у некоторых штаммов, как и возбудителей дизентерии, обнаруживается инвазивный фактор, способствующий проникновению бактерий внутрь клеток. Патогенность диареегенных эшерихии - в возникновении геморрагии, в нефро-токсическом действии. К факторам патогенности всех штаммов E.coli относятся пили и белки наружной мембраны, способствующие адгезии, а также микрокапсула, препятствующая фагоцитозу.

Резистентность. E.coli отличается более высокой устойчивостью к действию различных факторов внешней среды; она чувствительна к дезинфектантам, быстро погибает при кипячении.

Роль E.coli. Кишечная палочка — представитель нормальной микрофлоры толстой кишки. Она является антагонистом патогенных кишечных бактерий, гнилостных бактерий и грибов рода Candida. Кроме того, она участвует в синтезе витаминов группы В, Е и К, частично расщепляет клетчатку.

Штаммы, обитающие в толстой кишке и являющиеся условно-патогенными, могут попасть за пределы ЖКТ и при снижении иммунитета и их накоплении стать причиной различных неспецифических гнойно-воспалительных болезней (циститов, холециститов) - парентеральных эшерихиозов.

Эпидемиология. Источник энтеральных эшерихиозов - больные люди. Механизм заражения — фекально-оральный, пути передачи—алиментарный, контактно-бытовой.

Патогенез. Полость рта. Попадает в тонкую кишку, адсорбируется в клетках эпителия с помощью пилей и белков наружной мембраны. Бактерии размножаются, погибают, освобождая эндотоксин, который усиливает перистальтику кишечника, вызывает диарею, повышение температуры тела и другие симптомы общей интоксикации. Выделяет экзотоксин - тяжелая диарея, рвоту и значительное нарушение водно-солевого обмена.

Клиника. Инкубационный период составляет 4 дн. Болезнь начинается остро, с повышения температуры тела, болей в животе, поноса, рвоты. Отмечаются нарушение сна и аппетита, головная боль. При геморрагической форме в кале обнаруживают кровь.

Иммунитет. После перенесенной болезни иммунитет непрочный и непродолжительный.

Микробиологическая диагностика. Основной метод — бактериологический.

Определяют вид чистой культуры (грамотрицательные палочки, оксидазоотрицательные, ферментирующие глюкозу и лактозу до кислоты и газа, образующие индол, не образующие сероводород) и принадлежность к серогруппе, что позволяет, отличить условно-патогенные кишечные палочки от диареегенных. Внутривидовая идентификация, имеющая эпидемиологическое значение, заключается в определении серовара с помощью диагностических адсорбированных иммунных сывороток.

№ 104 Возбудители кишечного иерсиниоза. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

Кишечный иерсиниоз — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением ЖКТ, тенденцией к генерализации с различных органов и систем.

Возбудитель кишечного иерсиниоза Yersinia enterocolitica.

Таксономия. Y.enterocolitica относится к отделу Gracilicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду Yersinia.

Морфологические и тинкториальные свойства. Возбудитель полиморфен: он может иметь форму либо палочки с закругленными концами, либо овоидную с биполярным окрашиванием. Спор не имеет, иногда образует капсулу. Перитрих есть. Некоторые штаммы имеют пили. Грамотрицателен.

Культуральные свойства. Y.enterocolitica — факультативный анаэроб. Наиб. благоприятная темп. 25С. Возбудитель неприхотлив и растет на простых питательных средах.

Биохимическая активность. Биохимическая активность возбудителя высокая. Внутри вида по спектру б/х активности: индолообразованию, утилизации эскулина, реакции Фогеса – Проскауэра подразделяются на 5 хемоваров.

Основные б/х признаки: расщепление мочевины, ферментация сахарозы, отсутствие ферментации рамнозы, продукция орнитиндекарбоксилазы. Антигенная структура. О- и Н-антигены, у некоторых штаммов обнаружен К- антиген. По 0-антигену различают более 30 серогрупп, из которых от больных чаще всего выделяют представителей серогрупп 03, 09, 05.

Факторы патогенности. Образует термостабильный эндотоксин. Некоторые штаммы выделяют вещество, соответствующее экзотоксину и обладающее энтеро- и цитотоксическим действием. У иерсиний обнаружены также инвазивный белок и белки, препятствующие фагоцитозу. Адгезивная активность иерсиний связана с пилями и белками наружной мембраны.

Резистентность. Чувствителен к высокой температуре, солнечным лучам, дезинфицирующим веществам, но очень устойчив к действию низких температур: хорошо переносит температуру -20 °С.

Эпидемиология. Источники болезни для человека - крысы, мыши, животные и птицы,. Механизм заражения иерсиниозом фекально-оральный, основным путем передачи является алиментарный: болезнь может возникнуть при употреблении фруктов, овощей, молока, мяса. Но возможны также контактный (при контакте людей с больными животными) и водный пути передачи.

Патогенез. Возбудитель попадает в организм через рот, в нижних отделах тонкой кишки прикрепляется к эпителию слизистой оболочки, внедряется в клетки эпителия, вызывая воспаление. Под действием токсинов усиливается перистальтика кишечника и возникает диарея. Иногда в патологический процесс вовлекается аппендикс, развивается аппендицит. Незавершенный фагоцитоз способствует генерализации процесса. У людей со сниженным иммунитетом могут развиться сепсис с образованием вторичных гнойных очагов в мозге, печени и селезенке.

Клиника. Различают гастроэнтероколитическую, аппендикулярную и септическую формы. Инкубационный период составляет от 1 до 4 дней. Болезнь начинается остро с повышения температуры тела до 39С, общей интоксикации, рвоты, болей в животе, поноса. Течение продолжительное.

Микробиологическая диагностика. Используют бактериологический и серологический методы исследования. Цель бактериологического метода являются идентификация возбудителя, определение антибиотикограммы, внутривидовая идентификация (установление серовара, биохимического варианта, фаговара).Материалом для бактериологического метода исследования служат испражнения, ликвор, кровь, моча, иногда червеобразный отросток. Материал для исследования помешают в фосфатный буфер и подвергают холодовому обогащению. Серологическая диагностика проводится постановкой РНГА, с диагностическим титром 1:160. Важное диагностическое значение имеет наблюдение за нарастанием титра антител в динамике.

Лечение. Этиотропная антибиотикотерапия.

№105 Возбудители шигеллеза. Таксономия. Характеристика. № 106 Возбудители сальмонеллезов. Таксономия. Характеристика. № 107 Возбудители холеры. Таксономия. Характеристика.

Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и

Микробиологический диагноз сальмонеллезов. Лечение.

Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и

лечение.

Острая кишечная зоонозная инфекция, вызываемая сероварами сальмонелл,

Род Shigella включает 4 вида: S. dysenteriae — 12 сероваров, S.flexneri — 9

характеризующаяся поражением ЖКТ.

Возбудитель – Vibrio cholerae, серогрупп О1 и О139, характеризуется

сероваров, S. boydii — 18 сероваров, S. sonnei — 1 серовар.

Морфологические свойства: подвижные, грам «-» палочки, капсулы нет.

токсическим поражением тонкого кишечника, нарушением водно-солевого

Морфология. Шигеллы представлены неподвижными палочками. Спор и

Хорошо растут на простых питательных и желчесодержащих средах. На

баланса.

капсул не образуют.

плотных – образуют колонии в R-и S-формах, на жидких – помутнение. На

Морфологические и культуральные свойства. Вибрион имеет один полярно

Культуральные свойства. Хорошо культивируются на простых питательных

лактозособержащих средах образуют бесцветные колонии.

расположенный жгутик. Под действием пенициллина образуются L-формы.

средах. На плотных средах образуют мелкие гладкие, блестящие,

Биохимическая активность: ферментация глк. до кислоты и газа, отсутствие

Грамотрицательны, спор не образуют. Факультативный анаэроб. Не

полупрозрачные колонии; на жидких — диффузное помутнение. Жидкой

ферментации

лактозы,

продукция

сероводорода,

отсутствие

требователен к питательным средам. Температурный оптимум 37C.

средой обогащения является селенитовый бульон. У S. sonnei отмечена при

индолообразования.

На плотных средах вибрионы образуют мелкие круглые прозрачные S-

росте на плотных средах S R-диссоциация.

Антигенная структура: соматический О-антиген, жгутиковый Н-антиген,

колонии с ровными краями. На скошенном агаре образуется желтоватый

Биохимическая активность: слабая; отсутствие газообразования при

Некоторые – К-антиген. Род Salmonella состоит из двух видов — вида S.

налет. В непрозрачных R-колониях бактерии становятся устойчивыми к

ферментации глюкозы, отсутствие продукции сероводорода, отсутствие

enterica, в который включены все сальмонеллы, являющиеся возбудителями

действию бактериофагов, антибиотиков и не агглютинируются О-

ферментации лактозы.

человека и теплокровных животных, и вида S. bongori, который

сыворотками.

Резистентность. Наиболее неустойчив во внешней среде вид S. dysenteriae.

подразделяется на 10 сероваров.

Биохимические свойства. Активны: сбраживают до кислоты глюкозу,

Шигеллы переносят высушивание, низкие температуры, быстро погибают при

Вид S. enterica разделен на 6 подвидов, которые подразделены на серовары.

мальтозу, сахарозу, маннит, лактозу, крахмал. Все вибрионы делятся на

нагревании. S. sonnei в молоке способны не только длительно переживать, но

Некоторые серовары сальмонелл, в частности S. Typhi, имеют

шесть групп по отношению к трем сахарам (манноза, сахароза, арабиноза).

и размножаться. У S. dysenteriae отмечен переход в некультивируемую форму.

полисахаридный Vi-антиген, являющийся разновидностью К-антигена.

Первую группу, к которой относятся истинные возбудители холеры,

Антигенная структура. Соматический О-антиген, в зависимости от строения

Эпидемиология. Возбудителями сальмонеллеза является большая группа саль-

составляют вибрионы, разлагающие маннозу и сахарозу и не разлагающие

которого происходит их подразделение на серовары, a S. flexneri внутри

монелл, входящая в подвид enterica. Наиболее часто возбудителями

арабинозу: разлагают белки до аммиака и индола. H2S не образуют.

сероваров подразделяется на подсеровары. S. sonnei обладает антигеном 1-й

сальмонеллезов у человека являются серовары S. Typhimurium, S. Dublin, S.

Антигенная структура. Термостабильный О-антиген и термолабильный Н-

фазы, который является К-антигеном.

Choleraesuis. Основные факторы передачи — мясо, молоко, яйца, вода.

антиген. Н-АГ являются общими для большой группы вибрионов.

Факторы патогенности. Способность вызывать инвазию с последующим

Патогенез и клиника. Заболевание протекает в локальной форме гастроэнтери-

Возбудители классической холеры и холеры Эль-Тор объединяются в

межклеточным распространением и размножением в эпителии слизистой

та, ведущий синдром - диарейный. Инвазировав слизистую тонкого

серогруппу 01. Антигены серогруппы 01 включают в различных сочетаниях

толстого кишечника. Функционирование крупной плазмиды инвазии, которая

кишечника через М-клетки и проникнув в подслизистую, сальмонеллы

А-, В- и С-субъединицы. Сочетание субъединиц АВ называется сероваром

имеется у всех 4 видов шигелл. Плазмида инвазии детерминирует синтез

захватываются макрофагами, переносясь ими в пейеровы бляшки, где

Огава, сочетание АС — сероваром Инаба, сочетание ABC — Гикошима. R-

белков, входящих в состав наружной мембраны, которые обеспечивают

формируют первичный очаг инфекции. При этом выделяются эндотоксин и

формы колоний утрачивают О-АГ.

процесс инвазии слизистой. Продуцируют шига и шигаподобные белковые

белковый энтеротоксин. Энтеротоксин активирует поступление в просвет

Резистентность. Вибрионы плохо переносят высушивание. Долго

токсины. Эндотоксин защищает шигеллы от действия низких значений рН и

кишечника большого количества жидкости, К,Na. Понос, рвота.

сохраняются в водоемах, пищевых продуктах.. Биовар Эль-Тор более

желчи.

Иммунитет:

Ненапряженный,

серовароспецифический,

опосредован

устойчив в окружающей среде, чем классический вибрион.

Эпидемиология: Заболевания - шигеллезы, антропонозы с фекально-оральным

секреторным IgA, который предотвращает процесс пенетрации сальмонеллами

Эпидемиология. Острая кишечная инфекция с фекально-оральным

механизмом передачи. Заболевание, вызываемое S. dysenteriae, имеет

слизистой тонкого кишечника. В крови могут определяться антитела.

механизмом передачи. Путь передачи - водный, пищевой. Источник

контактно-бытовой путь передачи. S. flexneri — водный, a S. sonnei —

Микробиологическая диагностика. Бактериологическому исследованию

инфекции — больной человек или вибрионоситель.

алиментарный.

подвергают рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, желчь,

Факторы патогенности. Пили адгезии; фермент муциназа, разжижающий

Патогенез и клиника: Инфекционные заболевания, характеризующиеся

мочу, кровь. При идентификации выделенных культур необходим широкий

слизь и обеспечивающий доступ к эпителию. Эпителиальные клетки

поражением толстого кишечника, с развитием колита и интоксикацией.

набор диагностических О- и Н- сывороток.

выделяют щелочной секрет, который в сочетании с желчью является

Шигеллы взаимодействуют с эпителием слизистой толстой кишки.

Для серологического исследования применяют РНГА, ИФА. Важное

прекрасной

питательной

средой

для

размножения

вибрионов.

Прикрепляясь инвазинами к М-клеткам, шигеллы поглощаются макрофагами.

диагностическое значение имеет нарастание титра антител в динамике

Токсинообразование вибрионов, которые вырабатывают эндо- и

Взаимодействие шигелл с макрофагами приводит к их гибели, следствием

заболевания.

экзотоксины. Экзотоксин (энтеротоксин) холероген — термолабильный

чего является выделение ИЛ-1, который инициирует воспаление в

Лечение. Применяется патогенетическая терапия, направленная на

белок, чувствителен к протеолитическим ферментам. Холероген содержит 2

подслизистой. При гибели шигелл происходит выделение шига токсинов,

нормализацию водно-солевого обмена. При генерализованных формах —

субъединицы: А и В. А активизирует внутриклеточную аденилатциклазу,

действие которых приводит к появлению крови в испражнениях.

этиотропная антибиотикотерапия.

происходит повышение выхода жидкости в просвет кишечника. Диарея,

Иммунитет. Секреторные IgA, предотвращающие адгезию, и цитотоксическая

Сальмонеллезные групповые, адсорбированные О- и Н-агглютинирующие

рвота. Фермент нейраминидаза усиливает связывание холерного экзотоксина

антителозависимая активность лимфоцитов.

сыворотки. Применяются для установления серогрупп и сероваров

с эпителием слизистой кишечника. Эндотоксин запускает каскад

Микробиологическая диагностика.

сальмонелл в реакции агглютинации.

арахидоновой кислоты, которая запускает синтез простагландинов (Е, F).

Бактериологический: материалом для исследования - испражнения. Для

Сальмонеллезные О- и Н-монодиагностикумы представляют собой взвеси

Они вызывают сокращение гладкой мускулатуры тонкого кишечника и

посева отбираются гнойно-кровяные образования из кала, которые при

сальмонелл, убитых нагреванием (О-диагностикумы) или обработкой

подавляют иммунный ответ, чем обусловлены диарея.

диагностике

заболевания

высеваются

на

лактозосодержащие

формалином (Н-диагностикумы). Применяются для серодиагностики

Клинические проявления. Инкубационный период 2—3 дня. Боль в животе,

дифференциальные питательные плотные среды. В случае выявления

брюшного тифа.

рвота, диарея.

бактерионосителей посев испражнений проводится в селенитовый бульон с

Профилактика. Специфическая профилактика сальмонеллеза у с/х животных и

Иммунитет. Гуморально-клеточный. При выздоровлении возникает

выделением возбудителя на плотных лактозосодержащих дифференциальных

птиц. Неспецифическая профилактика - проведение ветеринарно-санитарных

напряженный непродолжительный иммунитет.

питательных средах. Среди выросших на этих средах отбирают

мероприятий.

Микробиологическая диагностика. Выделение и идентификация

лактозонегативные колонии, которые идентифицируют до вида и серовара, а

возбудителя. Материал для исследования - выделения от больных (кал,

выделенные культуры S. flexneri — до подсероваров, S. sonnei — до

рвота), вода.

хемоваров. В качестве вспомогательного используют серологический метод с

Для экспресс-диагностики используют РИФ, ПЦР. Бактериоскопический

постановкой РНГА.

метод в настоящее время не используется.

Лечение и профилактика: Для лечения - бактериофаг орального применения,

Лечение: а)регидратация (восполнение потерь жидкости и электролитов

антибиотики после определения антибиотикограммы; в случае возникновения

введением изотонических, растворов, а также плазмозаменяющих жидкостей

дисбактериоза — препараты пробиотиков для коррекции микрофлоры. Не

внутривенно;б) антибактериальная терапия (тетрациклины, фторхинолоны).

специфическая профилактика.

Профилактика. Санит.-гиг. мероприятия. Экстренная профилактика антибио-

№ 109 Стрептококки. Таксономия. Характеристика. Микро-

тиками широкого спектра действия, а также вакцинопрофилактика.

биологическая диагностика стрептококковых инфекций. Лечение.

Современная вакцина представляет собой комплексный препарат, состоящий

из холероген-анатоксина и химического О-антигена, обоих биоваров и

Таксономия. Стрептококки относятся к отделу Firmicutes, роду Streptococcus.

сероваров Огава и Инаба. Прививка обеспечивает выработку вибриоцидных

Род состоит из более чем 20 видов, среди которых есть представители

антител и антитоксинов в высоких титрах.

нормальной микрофлоры человеческого тела и возбудители тяжелых

инфекционных эпидемических болезней человека.

Морфологические и культуральные свойства. Стрептококки — это мелкие

шаровидные клетки, располагающиеся цепочками, грамположительные, спор

не образуют, неподвижные. Большинство штаммов образует капсулу,

состоящую из гиалуроновой кислоты. Клеточная стенка содержит белки (М-,

Т- и R-антигены), углеводы (группоспецифические) и пептидогликаны. Легко

переходят в L-формы. Возбудители растут на средах, обогащенных

углеводами, кровью, сывороткой, асцитической жидкостью. На плотных

средах обычно образуют мелкие серые колонии. Капсульные штаммы

стрептококков группы А образуют слизистые колонии. На жидких средах

стрептококки обычно дают придонный рост. Стрептококки —

факультативные анаэробы. По характеру роста на кровяном агаре они делятся

на культуральные варианты: а-гемолитические (зеленящие), в-гемолитические

(полный гемолиз) и негемолитические.

Резистентность. Чувствительны к физическим и химическим факторам

окружающей среды, могут длительно сохранять жизнеспособность при низких

температурах. Устойчивость к антибиотикам приобретается медленно.

Патогенность. На основе полисахаридного антигена делятся на серогруппы

(А, В, С...О). Стрептококки группы А вырабатывают более 20 веществ,

обладающих антигенностью и агрессивностью. На поверхности клетки

имеется

белковый

антиген М,

который тесно

связан

вирулентностью

(препятствует фагоцитозу). Этот белок определяет типовую принадлежность

стрептококков.

Кофакторам

патогенности

относят

стрептокиназу

(фибринолизин), ДНКазу, гиалуронидазу, эритрогенин. Наиболее патогенны

для человека гемолитические стрептококки группы А, называемые S.

pyogenes. Этот вид вызывает у человека многие болезни: скарлатину, рожу,

ангину, острый эндокардит, послеродовой сепсис, хронический тонзиллит,

ревматизм.

Иммунитет: постинфекционный нестойкий, ненапряженный.

Микробиологическая диагностика. Материал для исследования – гной,

моча, кровь, мокрота.

Бактериоскопический метод: окраска по Граму мазков из патологического ма-

териала. При положительном результате обнаруживают цепочки грам «+»

кокков.

Бактериологический метод: Исследуемый материал засевают на кровяной агар

в чашку Петри. После инкубации при 37 °С в течение 24 ч отмечают характер

колоний и наличие вокруг них зон гемолиза. Из части материала, взятого из

колоний, готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. Для

получения чистой культуры 1—3 подозрительные колонии пересевают в

пробирки со скошенным кровяным агаром и

сахарным

бульоном. На

кровяном агаре Streptococcus pyogenes образует мелкие мутноватые круглые

колонии.

В бульоне стрептококк дает придонно-пристеночный рост в виде

хлопьев,

оставляя среду прозрачной. По характеру гемолиза на кровяном

агаре стрептококки делятся на три группы: 1) негемолитические; 2) а-

гемолитиче-ские 3) β-гемолитические, образующие вокруг колонии пол-

ностью

прозрачную

зону

гемолиза.

Заключительным

этапом

бактериологического исследования является идентификация выделенной

культуры по антигенным свойствам. По данному признаку все стрептококки

делят на серологические группы (А, В, С, D и т. д.). Серогруппу определяют в

реакции преципитации с полисахаридным преципитиногеном С. Серовар

определяют в реакции агглютинации. Выявленную культуру стрептококка

проверяют на чувствительность к антибиотикам методом дисков.

Серодиагностика: устанавливают наличие специфических антигенов в крови

больного с помощью РСК или реакции преципитации. Антитела к О-

стрептолизину определяют для подтверждения диагноза ревматизма.

Лечение: Антибиотики широкого спектра действия (пенициллины,

устойчивые к в-лактамазе).При выделении стрептококка А – пенициллин.

Химиотерапия антибиотиками, к которым выявлена чувствительность

микроба – левомицетин, рифампицин.

Профилактика: специфической – нет. Неспецифическая - выявление, лечение

больных; проведение планового обследования медперсонала, вакцинация

стрептококковый

бактериофаг(жидкий)

– фильтрат

фаголизата

стрептококка. Применятся наружно, внутрикожно, в/м., О-стрептолизин

сухой (лиофильно высушенный фильтрат бульонной культуры стрептококка –

активного продуцента О-стрептолизина. Применяется для постановки

серологических реакций – определения анти-О-стрептолизина в сыворотке

крови больных).

№ 108 Стафилококки. Таксономия. Характеристика. Микроби-

№ 110 Менингококки. Таксономия. Характеристика. Микро-

№ 111 Гонококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая

ологическая диагностика заболеваний, вызываемых стафилококками.

биологическая диагностика стрептококковых инфекций. Лечение.

диагностика гонореи. Лечение.

Специфическая профилактика и лечение.

Менингококковая

инфекция

—

острая

инфекционная

болезнь,

Нейсcерии – грамотрицательные аэробные кокки, относящиеся к роду

Таксономия: относятся к отделу Firmicutes, семейству Мicrococcacae, роду

характеризующаяся поражением слизистой оболочки носоглотки, оболочек

Neisseria, включающему 8 видов: Neisseria meningitides, Niesseria

gonorrhoeae,

Staphylococcus. К данному роду относятся 3 вида: S.aureus, S.epidermidis и

головного мозга и септицемией; антропоноз.

N. flava, N. subflava, N. perflava, N. sicca.

S.saprophyticus.

Таксономия: возбудитель Neisseria meningitidis (менингококк) относится к

Морфология: неподвижные неспорогенные грамотрицательные диплококки,

Морфологические свойства: Все виды стафилококков представляют собой

отделу Gracilicutes, семейству Neisseriaceae, роду Neisseria.

образующие капсулу, полиморфны – встречаются в виде мелких или крупных

округлые клетки. В мазке располагаются несимметричными гроздьями.

Морфологические свойства. Мелкие диплококки. Характерно расположение в

форм а так же в виде полочек, хорошо окрашиваются анилиновыми

Клеточная стенка содержит большое количество пептидогликана, связанных с

виде пары кофейных зерен, обращенных вогнутыми поверхностями друг к

красителями (метиленовым синим, бриллиантовым зелёным и т. д.), под

ним тейхоевых кислот, протеин А. Грамположительны. Спор не образуют,

другу. Неподвижны, спор не образуют, грамотрицательные, имеют пили,

действием пенициллина образуют L-формы, могут менять свойства и

жгутиков не имеют. У некоторых штаммов можно обнаружить капсулу. Могут

капсула непостоянна.

превратиться в грамположительную форму.

образовывать L-формы.

Культуральные свойства. Относятся к аэробам, культивируются на средах,

Культуральные свойства: аэробы, хемоорганотрофы; для роста требуют

Культуральные свойства: Стафилококки — факультативные анаэробы. Хорошо

содержащих нормальную сыворотку или дефибринированную кровь лошади,

свежеприготовленные влажные среды с добавлением нативных белков крови,

растут на простых средах. На плотных средах образуют гладкие, выпуклые

растут на искусственных питательных средах, содержащих специальный набор

сыворотки или асцитической жидкости . Не вызывают гемолиза на средах,

колонии с различным пигментом, не имеющим таксономического значения.

аминокислот. Элективная среда должна содержать ристомицин. Повышенная

содержащих кровь; на средах с добавлением молока, желатина и картофеля не

Могут расти на агаре с высоким содержанием NaCl. Обладают сахаролитичес-

концентрация СО2 в атмосфере стимулирует рост менингококков.

растут. На плотных питательных средах через 24ч, при содержании протеина

кими и протеолитическими ферментами. Стафилококки могут вырабатывать

Антигенная структура: Имеет несколько АГ: родовые, общие для рода

II образуют слегка мутные бесцветные колонии, не содержащие его образуют

гемолизины,

фибринолизин,

фосфатазу,

лактамазу,

бактериоцины,

нейссерии (белковые и полисахаридные, которые представлены полимерами

круглые прозрачные колонии в виде капель росы, на жидких питательных

энтеротоксины, коагулазу.

аминосахаров

сиаловых

кислот);

видовой

(протеиновый);

средах растут диффузно и образуют плёнку, через несколько часов оседающую

Стафилококки

пластичны,

быстро

приобретают

устойчивость

группоспецифические (гликопротеидный

комплекс);

типоспецифические

на дно.

антибактериальным препаратам. Существенную роль в этом играют плазмиды,

(белки наружной мембраны), которые разграничивают серотипы внутри

Биохимическая активность: крайне низкая – разлагают только глюкозу,

передающиеся с помощью трансдуцирующих фагов от одной клетки к другой.

серогрупп В и С. По капсульным АГ выделяют девять серогрупп (А, В, С, D,

продуцируют каталазу и цитохромоксидазу, протеолитическая активность

R-плазмиды детерминируют устойчивость к одному или нескольким

X, Y, Z, W135 и Е). Капсульные АГ некоторых серогрупп иммуногенны для

отсутствует, H2S, аммиака, индола не образует.

антибиотикам, за счет продукции в-лактамазы.

человека. Штаммы серогруппы А вызывают эпидемические вспышки. В, С и Y

Антигенная структура: Содержит А и К антигены, ЛПС обладают сильной

Антигенная структура. Около 30 антигенов, представляющих собой белки,

- спорадические случаи

заболевания. На основании различий

иммуногенностью, основную антигенную нагрузку несут пили и белки

полисахариды и тейхоевые кислоты. В составе клеточной стенки стафилококка

типоспецифических АГ выделяют серотипы, которые обозначают арабскими

мембраны. Наружная мембрана содержит протеины I, II, III классов,

содержится протеин А, который может прочно связываться с Fc-фрагментом

цифрами (серотипы выявлены в серогруппах В, С, Y, W135). Наличие АГ

проявляющих сильные иммуногеннные свойства

молекулы иммуноглобулина, при этом Fab-фрагмент остается свободным и

серотипа 2 рассматривается как фактор патогенности. Во время эпидемий

Факторы патогенности: капсула, пили, эндотоксин, белки мембраны

может соединяться со специфическим антигеном. Чувствительность к

преобладают менингококки групп А и С, которые являются наиболее

Капсула обладает антифагоцитарным действием. Пили обеспечивают адгезию

бактериофагам (фаготип) обусловлена поверхностными рецепторами. Многие

патогенными.

к эпителию. Клеточная стенка содержит эндотоксин. Поверхностный белок I

штаммы стафилококков являются лизогенными(образование некоторых

Биохимическая активность: низкая. Разлагает мальтозу и глк. До кислоты, не

класса – обеспечивает устойчивость к бактерицидным факторам слизистых

токсинов происходит с участием профага).

образует индол и сероводород. Ферментация глк. и мальтозы – диф.-

оболочек. Класса II – (протеины мутности, ОРА-протеины) обуславливают

Факторы патогенности: Условно – патогенные. Микрокапсула защищает от

диагностический признак. Не образует крахмалоподобный полисахарид из

прикрепление к эпителию, препятствуют фагоцитозу. N. синтезируют IgA

фагоцитоза, способствует адгезии микробов; компоненты клеточной стенки –

сахарозы. Обладает цитохромоксидазой и каталазой. Отсутствие β-

протеазу, расщепляющую Ig.

стимулируют развитие воспалительных процессов. Ферменты агрессии:

галактозидазы, наличие γ-глютаминтрансферазы.

Резистентность: очень неустойчивы в окружающей среде, чувствительны к

каталаза – защищает бактерии от действия фагоцитов, в-лактамаза – разрушает

Факторы патогенности: капсула – защищает от фагоцитоза. AT, образующиеся

действию антисептиков, высокочувствительны к пенициллинам, тетрациклину,

молекулы антибиотиков.

к полисахаридам капсулы, проявляют бактерицидные свойства. Токсические

стрептомицину. Способны к утилизации пенициллинов при приобретении

Резистентность. Устойчивость в окружающей среде и чувствительность к

проявления менингококковой инфекции обусловлены высокотоксичным

бета-лактамаз.

дезинфектантам обычная.

эндотоксином. Для генерализованных форм менингококковой инфекции

Патогенез: Входные ворота – цилиндрический эпителий мочеполовых путей.

Патогенез. Источником инфекции стафилококков - человек и некоторые виды

характерны кожные высыпания, выраженное пирогенное действие,

Гонококки прикрепляются к эпителию посредством поверхностных белков,

животных (больные или носители). Механизмы передачи — респираторный,

образование AT. Пили, белки наружной мембраны, наличие гиалуронидазы и

вызывают гибель и слущивание клеток, захватываются клетками, где

контактно-бытовой, алиментарный.

нейроминидазы. Пили являются фактором адгезии к слизистой оболочке

размножаются, попадают на БМ, после чего попадают на соед. ткань и

Иммунитет: Постинфекционный – клеточно-гуморальный, нестойкий,

носоглотки и тканях мозговой оболочки. Менингококки выделяют IgA-

вызывают воспаление или попадают в кровь с возможным

ненажряженный.

протеазы, расщепляющие молекулы IgA, что защищает бактерии от действия

дессиминированием.

Клиника. Около 120 клинических форм проявления, которые имеют местный,

Ig.

Иммунитет – почти отсутствует.

системный или генерализованный характер. К ним относятся гнойно-

Резистентность. Малоустойчив во внешней среде, чувствителен к

Микробиологическая диагностика:

воспалительные болезни кожи и мягких тканей (фурункулы, абсцессы),

высушиванию и охлаждению. В течение нескольких минут погибает при

Бактериоскопическоеисследование: Материаломдля исследования служитгнойноеотделяемое

поражения глаз, уха, носоглотки, урогенитального тракта, пищеварительной

повышении температуры более 50 °С и ниже 22 °С. Чувствительны к

из уретры, влагалища, примой кишки, глотки, сыворотки крови. Готовят мазки, окраска по

системы (интоксикации).

пенициллинам, тетрациклинам, эритромицину, устойчивы к ристомицину и

Граму, При «+» результате – обнаруживают гонококки – грам+ диплококки бобовидной

Микробиологическая диагностика. Материал для исследования – гной,

сульфамидам. Чувствительны к 1 % раствору фенола, 0,2 % раствору хлорной

формы., находятся внутри лейкоцитов. Положительный диагноз ставится при острой форме

кровь, моча, мокрота, испражнения.

извести, 1 % раствору хлорамина.

гонореидо применения антибиотиков.

Бактериоскопический метод: из исследуемого материала (кроме крови) готовят

Эпидемиология, патогенез и клиника. Человек — единственный природный

Бактериологическое исследование. Материал засевают на чашки Петри со специальными

мазки, окрашивают по Граму. Наличие

грам «+» гроздевидных кокков,

хозяин менингококков. Носоглотка служит входными воротами инфекции,

питательными средами — КДС, сывороточным агаром. Среда КДС содержит питательный

располагающихся в виде скоплений.

здесь возбудитель

может длительно

существовать, не вызывая воспаления

агар с добавлением в определенной концентрации казеина, дрожжевого экстракта и сыворотки

Бактериологический метод: Материал засевают петлей на чашки с кровяным и

(носительство). Механизм передачи инфекции от больного или носителя воз-

крови. Посевы инкубируют при 37°С в течение 24—72 ч. Гонококки образуют круглые

желточно-солевым агаром для получения изолированных колоний. Посевы

душно-капельный.

прозрачные колонии, напоминающие капли росы, в отличие от более мутных колоний

инкубируют при 37С в течении суток. На следующий день исследуют

Инкубационный период составляет 1—10 дней (чаще 2—3 дня). Различают

стрептококков или пигментированных колоний стафилококков, которые также могут расти на

выросшие колонии на обеих средах. На кровяном агаре отмечают наличие или

локализованные

(назофарингит)

генерализованные

(менингит,

этих средах. Подозрительные колонии пересевают в пробирки на соответствующие среды для

отсутствие гемолиза. На ЖСА S. aureus образует золотистые круглые

менингоэнцефалит) формы менингококковой инфекции. Из носоглотки

получения чистых культур, которые идентифицируют по сахаролитическим свойствам на

выпуклые непрозрачные колонии. Вокруг колоний стафилококков,

бактерии попадают в кровяное русло (менингококкемия) и вызывают

средах «пестрого» ряда (полужидкий агар с сывороткой и углеводом). Гонококк ферментирует

обладающих лецитиназной активностью, образуются зоны помутнения с

поражение мозговых и слизистых оболочек с развитием лихорадки,

толькоглюкозусобразованиемкислоты..

перламутровым оттенком. Для окончательного установления вида ста-

геморрагической сыпи, воспаления мозговых оболочек.

Серодиагностика. В некоторых случаях ставят РСК Борде — Жангу. В качестве антигена

филококка 2—3 колонии пересевают в пробирки со скошенным питательным

Иммунитет. Постинфекционный иммунитет при генерализованных формах

используют взвесь убитых гонококков. Реакция Борде—Жангу имеет вспомогательное

агаром для получения чистых культур с последующим определением их

болезни стойкий, напряженный.

значение при диагностике гонореи. Она положительна при хронической и осложненной

дифференциальных признаков. S.aureus – «+»: образование плазмокоагулазы,

Микробиологическая диагностика: Материал для исследования - кровь,

гонорее.

летициназы. Ферментация:глк, миннита, образование а-токсина.

спинномозговая жидкость, носоглоточные смывы.

Лечение: антибиотикотерапия (пенициллин,

тетрациклин,

канамицин),

Для установления источника госпитальной инфекции выделяют чистые

Бактериоскопический метод – окраска мазков из ликвора и крови по Граму для

иммунотерапия - Гонококковая вакцина - взвесь

гонококков, убитых нагреванием,

культуры стафилококка от больных и бактерионосителей, после чего проводят

определения лейкоцитарной формулы, выявления менингококков и их

используетсядля вакцинотерапиихроническойгонореи.

их фаготипирование с помощью набора типовых стафилофагов. Фаги разводят

количества. Наблюдают полинуклеарные лейкоциты, эритроциты, нити

до титра, указанного на этикетке. Каждую из исследуемых культур засевают на

фибрина, менингококки – грам «-», окружены капсулой.

питательный агар в чашку Петри газоном, высушивают, а затем петлей каплю

Бактериологический метод – выделение чистой культуры. Носоглоточная

соответствующего фага наносят на квадраты (по числу фагов, входящих в

слизь, кровь, ликвор. Посев на плотные, полужидкие питательные среды,

набор), предварительно размеченные карандашом на дне чашки Петри. Посевы

содержащие сыворотку, кровь. Культуры инкубируют в течение 20 ч. При 37С

инкубируют при 37 °С. Результаты оценивают на следующий день по наличию

с повышенным содержанием СО2.Оксидазаположительные колонии –

лизиса культуры.

принадлежат в данному виду. Наличие N.meningitidis подтверждают

Серологический метод: в случаях хронической инфекции, определяют титр

образованием уксусной кислоты при ферментации глк. и мальтозы.

анти-а-токсина в сыворотке крови больных. Определяют титр АТ к

Принадлежность к серогруппам – в реакции агглютинации (РА).

риботейхоевой кислоте( компонент клеточной стенки).

Серологический метод – используют для обнаружения растворимых

Лечение

профилактика.

Антибиотики

широкого

спектра действия

бактериальных АГ в ликворе, или АТ в сыворотке крови. Для обнаружения АГ

(пенициллины, устойчивые к в-лактамазе). В случае тяжелых стафилококковых

применяют ИФА,РИА. У больных, перенесших менингококк – в сыворотке

инфекций, не поддающихся лечению антибиотиками, может быть

специфические АТ: бактерицидные, аггютинины, гемаггютинины.

использована антитоксическая противостафилококковая плазма или

Лечение. В качестве этиотропной терапии используют антибиотики -

иммуноглобулин, иммунизированный адсорбированным стафилококковым

бензилпенициллин (пенициллины, левомицетин, рифампицин), сульфамиды.

анатоксином. Выявление, лечение больных; проведение планового

Профилактика. Специфическую профилактику проводят менингококковой

обследования медперсонала, вакцинация стафилококковым анатоксином.

химической полисахаридной вакциной серогруппы А и дивакциной серогрупп

Стафилококковый анатоксин: получают из нативного анатоксина путем

А и С по эпидемическим показаниям. Неспецифическая профилактика

осаждения

трихлоруксусной

кислотой

адсорбцией

на

гидрате оксида

сводится к соблюдению санитарно-противоэпидемического режима в

алюминия.

дошкольных, школьных учреждениях и местах постоянного скопления людей.

Стафилококковая вакцина: взвесь коагулазоположительных стафилококков,

инактивированных нагреванием. Применяют для лечения длительно текущих

заболеваний.

Иммуноглобулин человеческий противостафилококковый: гамма-

глобулиновая фракция сыворотки крови, содержит стафилококковый

анатоксин. Готовят из человеч. крови, с высоким содержанием антител.

Применяется для специфического лечения.

№112 Возбудитель туляремии. Таксономия. Характеристика. № 113 Возбудитель сибирской язвы. Таксономия и характеристика. № 114 Возбудитель бруцеллеза. Таксономия и характеристика.

Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и

лечение.

Таксономия:

отдел Gracilicutes, род Francisella. Возбудитель – Francisella

Сибирская язва - острая антропонозная инфекционная болезнь, вызываемая

Таксономия: Возбудители бруцеллеза B.melitensis, B.abortus, B.suis, B.canis,

tularensis.

Bacillus anthracis, характеризуется тяжелой интоксикацией, поражением кожи,

B.ovis относятся к отделу Gracilicutes, роду Brucella.

Морфология: мелкие кокковидные полиморфные палочки, неподвижные,

лимфатических узлов.

Морфологические и тинкториальные свойства: Мелкие, грамотрицательные

грамотрицательные, не образующие спор, могут образовывать капсулу.

Таксономия. Возбудитель относится к отделу Firmicutes, роду Bacillus.

палочки овоидной формы. Не имеют спор, жгутиков, иногда образуют

Культуральные свойства: Факультативный аэроб, оптим. температура+37С. На

Морфологические свойства. Очень крупные грамположительные палочки с

микрокапсулу.

простые питательных средах не растет. Культивируется на желточных средах,

обрубленными концами, в мазке из чистой культуры располагаются короткими

Культуральные свойства: облигатные аэробы. B.abortus для своего роста

на средах с добавлением крови и цистеина. Рост медленный. Образуют мелкие

цепочками (стрептобациллы). Неподвижны; образуют расположенные

нуждается в присутствии 5—10 % углекислого газа. Оптимальными для роста

колонии, круглые с ровным краем, выпуклые, блестящие.

центрально споры, а также капсулу.

являются температура 37С. Требовательны к питательным средам и растут на

Биохимические свойства: слабо ферментируют до кислоты без газа глюкозу,

Культуральные свойства. Аэробы. Хорошо растут на простых питательных

специальных средах (печеночных, кровяной агар). Их особенностью является

мальтозу, левулезу, маннозу, образуют сероводород. Туляремийный микроб по

средах в диапазоне температур 10—40С, температурный оптимум роста 35С.

медленный (в течение 2 нед) рост. В жидких средах – равномерное помутнение

вирулентности разделен на подвиды: голарктическую (не ферментирует

На жидких средах дают придонный рост; на плотных средах образуют

с небольшим осадком. На плотных – мелкие, круглые гладкие голубые

глицерин, цитруллин), неарктическую (ферментирует глицерин, не

крупные, с неровными краями, шероховатые матовые колонии (R-форма). На

колонии. Диссоциация от S- к R-формам колоний.

ферментирует цитруллин; среднеазиатскую (ферментирует глицерин и

средах, содержащих пенициллин, через 3ч роста сибиреязвенные бациллы

Биохимическая активность: очень низкая; содержат каталазу и оксидазу,

цитруллин, мало вирулентен).

образуют сферопласты, расположенные цепочкой и напоминающие в мазке

нитраты редуцируют в нитриты, цитраты не утилизируют, продуцируют Н2S.

Антигенные свойства: Содержит соматический О-и поверхностный Vi-

жемчужное ожерелье.

Антигенная структура. O-антиген – соматический, и капсульный антигены. Две

антигены. Имеют антигенную близость с бруцеллами. В R- форме теряют Vi-

Биохимические свойства. Ферментативная активность достаточно высока: воз-

разновидности О-антигена — А(абортус) и М(мелитензис). Иногда

антиген, а вместе с ним вирулентность и иммуногенность.

будители ферментируют до кислоты глюкозу, сахарозу, мальтозу, крахмал,

обнаруживают К-антиген.

Факторы патогенности: неарктический подвид – высокая патогенность для

инулин; обладают протеолитической и липолитической активностью.

Факторы патогенности: Образуют эндотоксин, обладающий высокой

человека при кожном заражении, голарктический и среднеазиатский подвиды –

Выделяют желатиназу, обладают слабой гемолитической, лецитиназной и

инвазивной активностью. Продуцируют один из ферментов агрессии — гиалу-

умеренно патогенны. Вирулентными являются S-формы колоний. Патогенные

фосфатазной активностью.

ронидазу. Их адгезивные свойства связаны с белками наружной мембраны.

свойства связаны с оболоченным антигенным комплексом и токсическими

Выделяют желатиназу, проявляют низкую гемолитическую, лецитиназную и

Резистентность. Быстро погибают при кипячении, при действии

веществами типа эндотоксина. Вирулентность обусловлена:капсулой,

фосфатазную активность.

дезинфицирующих веществ, устойчивы к низкой температуре: в замороженном

угнетающей фагоцитоз; нейраминидазой, способствующей адгезии;

Антигены и факторы патогенности. Содержат родовой соматический

мясе они сохраняются до 5 мес, в молочных продуктах — до 1,5 мес.

эндотоксином (интоксикация); аллергенными свойствами клеточной стенки;

полисахаридный и видовой белковый капсульный антигены. Образуют

Эпидемиология. Зоонозная инфекция. Источник - крупный и мелкий рогатый

Эпидемиология: природно-очаговое заболевание. Источник инфекции –

белковый экзотоксин, обладающий антигенными свойствами и состоящий из

скот, свиньи, овцы, выделяющие B.melitensis. Люди более восприимчивы к

грызуны. Множественность механизмов передачи. Передача возбудителя через

нескольких компонентов (летальный, протективный и вызывающий отеки).

этому виду возбудителя. Реже заражение происходит от коров (B.abortus) и

клещей, комаров. Человек заражается контактным, алиментарным,

Вирулентные штаммы в восприимчивом организме синтезируют сложный

свиней (B.suis). Больные люди не являются источником заболевания.

трансмиссивными путями.

экзотоксин и большое количество капсульного вещества с выраженной

Патогенез. Проникают в организм через слизистые оболочки или

Резистентность: в окружающей среде сохраняется долго, нестоек к высокой

антифагоцитарной активностью.

поврежденную кожу, попадают сначала в регионарные лимфатические узлы,

температуре, чувствителен к антибиотикам (тетрациклин, левомицетин).

Резистентность. Вегетативная форма неустойчива к факторам окружающей

затем в кровь, разносятся по всему организму и внедряются в органы

Патогенез: На месте внедрения возбудителя (кожа, слизистые оболочки глаз,

среды, споры чрезвычайно устойчивы и сохраняются в окружающей среде,

ретикулоэндотелиальной системы (печень, селезенку, костный мозг). Там они

дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта) развивается первичный

выдерживают кипячение. Чувствительны к пенициллину и другим

могут длительное время сохраняться и вновь попадать в кровь. При гибели

воспалительный очаг, откуда возбудитель распространяется по лимфатическим

антибиотикам; споры устойчивы к антисептикам.

освобождается эндотоксин, вызывающий интоксикацию.

сосудам и узлам, поражая их с образованием первичных бубонов; в различных

Эпидемиология и

патогенез. Источник инфекции — больные животные,

Клиника: Инкубационный период составляет обычно 1—3 нед. Длительная

органах формируются гранулемы. Микроб и его токсины проникают в кровь,

чаще крупный рогатый скот, овцы, свиньи. Человек заражается в основном

лихорадка, озноб, потливость, боли в суставах, радикулиты.

что приводит к бактериемии и генерализации процесса, метастазированию и

контактным путем, реже алиментарно, при уходе за больными животными,

Иммунитет: После перенесенного заболевания формируется непрочный

развитию вторичных туляремийных бубонов.

переработке животного сырья, употреблении мяса. Входными воротами

иммунитет. Клеточно-гуморальный, нестерильный, относительный.

Клиника. Инкубационный период 3—7 дней. Болезнь начинается остро,

инфекции в большинстве случаев являются поврежденная кожа, значительно

Микробиологическая диагностика:

внезапно с повышения температуры тела. Различают бубонную, язвенно-

реже слизистые оболочки дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта.

Микробиологическая диагностика обычно проводится путем серологических

бубонную, глазо-бубонную, абдоминальную, легочную и генерализованную

В основе патогенеза лежит действие экзотоксина, который вызывает

исследований (реакция Райта и Хеддлсона).

(септическую) клинические формы туляремии.

коагуляцию белков, отек тканей, приводят к развитию токсико-инфекционного

Бактериологическое исследование. Для получения гемокультуры кровь

Иммунитет. После перенесенной инфекции иммунитет сохраняется длительно,

шока.

засевают в два флакона печеночного бульона. Один из них (для выделения

иногда пожизненно; развивается аллергизация организма к антигенам

Клиника. Различают кожную, легочную и кишечную формы сибирской язвы.

культуры В. melitensis) инкубируют в обычных аэробных условиях, другой

возбудителя.

При кожной (локализованной) форме на месте внедрения возбудителя

(для выделения первичной культуры В. abortus) —с СО2. В первых генерациях

Микробиологическая диагностика:

появляется характерный сибиреязвенный карбункул, сопровождается отеком.

бруцеллы растут очень медленно. На агаре бруцеллы образуют бесцветные

Бактериоскопическое исследование: Из исследуемого материала готовят мазки,

Легочная и кишечная формы относятся к генерализованным формам и

колонии, в бульоне — помутнение и слизистый осадок. В мазках, окрашенных

окрашивают по Грамму. В чистой культуре - мелкие кокки. В мазках из

выражаются геморрагическим и некротическим поражением соответствующих

по Граму, обнаруживаются мелкие грамотрицательные формы. Они

органов преобладают палочковидные формы. Спор не образуют,

органов.

неподвижны, спор не образуют, в определенных условиях появляется видимая

грамотрицательные, иногда выражена биполярная окраска.

Иммунитет. После перенесенной болезни развивается стойкий клеточно-

капсула.

Бактериологическое исследование и биопроба. Применяются для выделения

гуморальный иммунитет.

Для быстрой идентификации бруцелл ставят реакцию агглютинации со

чистой культуры бактерий туляремии. Наиболее чувствительными животными

Микробиологическая диагностика:

специфическими агглютинирующими сыворотками на стекле и определяют

являются мыши и морские свинки, которые погибают даже при подкожном

Наиболее достоверным методом лабораторной диагностики сибирской язвы

чувствительность к специфическому фагу. Все виды бруцелл не ферментируют

введении единичных бактерий. Выделение бактерий туляремии проводят на

является выделение из исследуемого материала культуры возбудителя.

углеводы. Их дифференцируют по образованию

H2S,

чувствительности к

свернутой яично-желточной среде, глюкозоцистиновом кровяном агаре.

Диагностическую ценность представляют также реакция термопреципитации

СО2, действию анилиновых красителей (основной фуксин).

Вирулентные

штаммы образуют S-формы колоний—мелкие,

гладкие,

по Асколи и кожно-аллергическая проба.

Серодиагностика. Реакция агглютинации Райта с бруцеллезным

беловатого цвета с голубоватым оттенком.

Бактериоскопическое исследование. Изучение окрашенных по Граму мазков из

диагностикумом. Положительные результаты отмечаются спустя 1 нед. после

Идентификацию чистой культуры проводят по морфологии бактериальных

патологического

материала

позволяет

обнаружить

возбудителя,

начала заболевания и сохраняются у переболевших многие годы.

клеток, характеру роста, биохимическим и антигенным свойствам.

представляющего собой грамположительную крупную неподвижную

Диагностический титр реакции

1:200. Для ускоренной серодиагностики

Биохимические свойства этих бактерий выявляются на специальной плотной

стрептобациллу. В организме больных и на белковой питательной среде

применяется реакция агглютинации Хеддлсона, которая ставится с

среде с ограниченным содержанием белка. Бактерии туляремии содержат

микроорганизмы образуют капсулу, в почве— споры.

неразведенной сывороткой больного и концентрированным антигеном —

оболочечный антиген, с которым связаны их вирулентные и иммуногенные

Бактериологическое исследование. Исследуемый материал засевают на чашки

диагностикумом, окрашенным метиленовым синим. При положительной

свойства, и О-соматический антиген. По антигенным свойствам близки к

с питательным и кровяным агаром, а также в пробирку с питательным

реакции появляются хлопья синего цвета. Реакция положительна при наличии

бруцеллам.

бульоном. Посевы инкубируют при 37С в течение 18ч. В бульоне В. anthracis

агглютинации на «++».

Серодиагностика. Ставится реакция агглютинации с туляремийным

растет в виде хлопьевидного осадка; на агаре вирулентные штаммы образуют

Для серодиагностики используют РПГА, РИФ, РСК, метод определения

диагностикумом. Относительно позднее появление агглютининов в крови (на

колонии R-формы. Авирулентные или слабовирулентные бактерии образуют

неполных антител. В поздние периоды заболевания процент положительных

2-й неделе болезни) затрудняет применение этой реакции для ранней

S-формы колоний.

серологических реакций (агглютинации, РПГА и РСК)

начинает снижаться и

диагностики, однако их длительное сохранение делает возможной

В. anthracis обладает сахаролитическими свойствами, не гемолизирует

большее диагностическое значение приобретают кожно-аллергическая проба и

ретроспективную диагностику. Обязательно прослеживается нарастание титра

эритроциты, медленно разжижает желатин. Под действием пенициллина

реакция Кумбса.

агглютинации. Наиболее чувствительным методом серодиагностики

образует сферопласты, имеющие вид

«жемчужин».

Это явление

Биопроба. Применяется для выделения чистой культуры из материала,

туляремии является РПГА.

используется для дифференциации В. anthracis от непатогенных бацилл.

загрязненного посторонней микрофлорой. Исследуемый материал вводят

Для экспресс-диагностики применяется кровяно-капельная реакция: кровь из

Биопроба. Исследуемый материал вводят подкожно морским свинкам

морским свинкам подкожно в паховую область. Кусочки органов и

пальца наносят на стекло, добавляют каплю дистиллированной воды (для

кроликам. Готовят мазки из крови и внутренних органов, делают

посевы для

лимфатических узлов засевают на питательные среды для получения чистой

лизиса эритроцитов), вносят каплю диагностикума и смешивают стеклянной

выделения чистой культуры возбудителя.

культуры и ее идентификации.

палочкой. При наличии в крови агглютининов в диагностическом титре (1:100

Экспресс-диагностика проводится с помощью реакции термопреципитации

Кожно-аллергическая проба (реакция Бюрне). На предплечье внутрикожно

и выше) в капле немедленно наступает агглютинация диагностикума; при

по Асколи и иммунофлюоресцентного метода.

вводят 0,1 мл бруцеллина. При наличии аллергии уже через 6 ч. могут

титрах ниже диагностических агглютинация происходит через 2—3 мин.

Реакцию Асколи ставят при необходимости диагностировать сибирскую язву у

появиться гиперемия кожи и болезненная отечность. Учет реакции производят

Кожно-аллергическая проба. Выпускаются два вида тулярина: для

павших животных или у умерших людей. Образцы исследуемого материала

через 24 ч. Реакция обладает высокой чувствительностью.

внутрикожной пробы и для надкожной. Проба высокочувствительна и дает

измельчают и кипятят в пробирке с изотоническим раствором хлорида натрия

Лечение: Антибиотики широкого спектра действия. Специфическая

положительные результаты у больных, начиная с 3—5-го дня болезни, но

в течение 10 мин, после чего фильтруют до полной прозрачности.

иммунотерапия убитой лечебной

бруцеллезной

вакциной или бруцеллина

также и у переболевших и вакцинированных, поэтому оценка реакции должна

Метод иммунофлюоресценции позволяет выявить капсульные формы В.

(фильтрат бульонных культур В. melitensis, B.abortus, В.suis, убитых

проводиться с осторожностью.

anthracis в экссудате. Мазки из экссудата через 5—18 ч после заражения

нагреванием . При острых формах – бруцеллезный иммуноглобулин.

Лечение: антибиотики стрептомицинового и тетрациклинового ряда. В случае

животного обрабатывают капсульной сибиреязвенной антисывороткой, а затем

Профилактика: Живая бруцеллезная вакцина получена штамма ВА-19А,

затяжного течения – комбинированная антибиотикотерапия с использованием

флюоресцирующей антикроличьей сывороткой. В препаратах, содержащих

полученную из В. abortus, создает перекрестный иммунитет против других

убитой лечебной сыворотки.

капсульные бациллы, наблюдается желто-зеленое свечение возбудителя.

видов бруцелл.

Профилактика: специфическая профилактика - применяют живую

Кожно-аллергическая проба. Ставится на внутренней поверхности предплечья

Бруцеллезный единый диагностикум. Взвесь убитых бруцелл, окрашенных

туляремийную вакцину. Иммунитет длительный, проверяется с помощью

— внутрикожно вводят 0,1 мл антраксина. При положительной реакции через

метиленовым синим, применяется при серологической диагностике бруцеллеза

пробы с тулярином.

24 ч появляются гиперемия и инфильтрат.

постановкой реакции агглютинации Райта и Хеддлсона.

Туляремийный диагностикум – взвесь убитых бактерий туляремии,

Лечение: антибиотики и сибиреязвенный иммуноглобулин. Для

Накожная сухая живая бруцеллезная профилактическая вакцина. Взвесь

применяется

в случае постановки реакции агглютинации

при

антибактериальной терапии препарат выбора – пенициллин.

вакцинного штамма. В. abortus применяется для профилактики бруцеллеза.

серодиагностике.

Профилактика. Для специфической профилактики используют живую

Тулярин – взвесь туляремийных бактерий (вакцинного штамма), убитых

сибиреязвенную вакцину. Для экстренной профилактики назначают

нагреванием, для постановки кожно-аллергической пробы.

сибиреязвенный иммуноглобулин.

Туляремийная живая сухая накожная вакцина – высушенная живая

Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка. Получена из крови кролика,

культура вакцинного штамма, для профилактики.

гипериммунизированного культурой В. anthracis. Применяется для постановки

реакции термопреципитации по Асколи.

Сибиреязвенная живая вакцина СТИ. Высушенную взвесь живых спор В.

anthracis авирулентного бескапсульного штамма. Применяется для

профилактики сибирской язвы.

Противосибиреязвенный иммуноглобулин. Гамма-глобулиновая фракция

сыворотки крови лошади, гипериммунизированной живой сибиреязвенной

вакциной и вирулентным штаммом В.anthracis, используется с

профилактической и лечебной целью.

№ 115 Возбудитель чумы. Таксономия и характеристика.

№ 116 Особенности микробиологического диагноза при карантинных

№ 117 Возбудители анаэробной газовой инфекции. Таксономия и

Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и

инфекциях.

характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая

лечение.

профилактика и лечение.

Карантинная (конвенционная) болезнь — это болезнь, система информации и

Таксономия: Y.pestis вызывает чуму; отдел Gracilicutes, семейство

меры профилактики которой обусловлены международными соглашениями .

Анаэробная инфекция — болезнь, вызываемая облигатными анаэробными

Enterobacteriaceae, род Yersinia. Возбудитель – Yersinia pestis.

Действуют Международные медико-санитарные правила, которые касаются

бактериями в условиях, благоприятствующих жизнедеятельности этих мик-

Морфологические свойства: грамотрицательные палочки, овоидной формы,

чумы, холеры, желтой лихорадки и натуральной оспы. Основная цель этих

робов. Анаэробы могут поражать любые органы и ткани. Облигатные

окрашиваются биполярно. Подвижны, имеют капсулу, спор не образуют.

Правил заключалась в обеспечении противоэпидемической защиты государств

анаэробы разделяются

на

две

группы: 1)

бактерии, образующие споры

Культуральные свойства.

от заноса инфекций. Правила обязывают национальные органы

(клостридии) и 2) неспорообразующие или так называемые неклостридиальные

Факультативные анаэробы. Температурный оптимум +25С. Хорошо

здравоохранения немедленно уведомлять ВОЗ о возникновении карантинных

анаэробы. Первые вызывают клостридиозы, вторые — гнойно-воспалительные

культивируются на простых питательных средах. Ферментируют большинство

болезней.

заболевания различной локализации. Представители обеих групп бактерий

углеводов без образования газа. Психофилы - способны менять свой

При возникновении в любой точке планеты случаев карантинных инфекций

относятся к условно-патогенным микробам.

метаболизм

в зависимости

от

температуры

и размножаться

при низких

вступает в силу система:

Газовая гангрена — раневая инфекция, вызываемая бактериями рода

температурах. Вирулентные штаммы образуют шероховатые (R) колонии,

1) страна направляет в ВОЗ информацию о возникших случаях;

Clostridium, характеризуется быстро наступающим некрозом преимущественно

переходные (RS) и сероватые слизистые гладкие авирулентные(S) формы.

2) ВОЗ обрабатывает данные и направляет их всем странам мира;

мышечной ткани, тяжелой интоксикацией и отсутствием выраженных воспа-

Два типа колоний - молодые и зрелые. Молодые с неровными краями. Зрелые

3) страны мира, получив информацию, принимают решение относительно

лительных явлений.

колонии крупные, с бурым зернистым центром и неровными краями. На

проведения каких-либо особых противоэпидемических мероприятий и

Таксономия. Возбудители — несколько видов рода Clostridium, отдел

скошенном агаре черед двое суток при +28 С образуют серовато - белый налет,

информируют об этом ВОЗ;

Firmicutes. Основными представителями являются C.perfringens, C.novii,

врастающий в среду, на бульоне - нежную поверхностную пленку и

4) ВОЗ обрабатывает полученную информацию и направляет ее всем странам

C.ramosum, C.septicum и др. Первое место по частоте встречаемости и тяжести

хлопковидный осадок.

мира.

вызываемого заболевания занимает C.perfringens.

Биохимические свойства: фенментативная активнсть высокая: ферментация до

Контроль за международным распространением инфекционных болезней -

Морфологические

культуральные

свойства.

Палочковидные,

кислоты ксилозу, синтез плазмокоагулазы, фибринолизина, гемолизина,

система глобального эпидемиологического надзора, направленная на

грамположительные бактерии, образующие споры. В пораженных тканях

лецитиназу, сероводород. Рамнозу, мочевину не ферментирует.

выявление и уменьшение размеров пораженных болезнью территорий, на

клостридии газовой гангрены формируют капсулы, обладающие

Антигенная структура.

совершенствование противоэпидемических мероприятий, снижающих риск

антифагоцитарной активностью, при попадании в окружающую среду

Группа белково - полисахаридных и липополисахаридных антигенов:

распространения заболевания в случае его завоза из вне.

образуют споры.

термостабильный соматический О-антиген и термолабильный капсульный

В России действуют Правила по санитарной охране территории, которые

Биохимические свойства. Обладают высокой ферментативной активностью,

V,W антигены. С W-антигеном связывают вирулентность бактерий.

распространяются на особо опасные инфекционные и паразитарные болезни:

расщепляют углеводы с образованием кислоты и газа; проявляют

Продуцирует факторы патогенности: фибринолизин, плазмокоагулазу,

холеру, чуму, желтую лихорадку (карантинные болезни); вирусные

гистолитическую активность.

эндотоксин, экзотоксин, капсулу, V,W антигены.

геморрагические лихорадки Ласса, Эбола; малярию; энцефалиты.

Антигенные свойства и токсинообразование. Каждый вид клостридии

Резистентность: чувствителен к антибиотикам (особенно стрептомицин),

разделяется на серовары, продуцирующие экзотоксины и различающиеся по

нестоек к окружающей среде при высокой температуре.

антигенным свойствам. Например, токсин С. perfringens подразделяется на 6

Патогенные свойства.

сероваров: А, В, С, D, Е и F. Из них патогенными для человека являются А и F,

Обладает патогенным потенциалом, подавляет функции фагоцитарной

остальные патогенны для животных. С. novii по антигенным свойствам

системы, подавляет окислительный взрыв в фагоцитах и беспрепятственно в

токсина разделяются на серовары А, В, С и D. Некоторые токсины обладают

них размножается. Факторы патогенности контролируются плазмидами трех

свойствами ферментов.

классов. В патогенезе выделяют три основных стадии - лимфогенного заноса,

Факторы патогенности: Клостридии газовой гангрены образуют экзотоксин —

бактеремии, генерализованной септицемии. Имеют адгезины и инвазины,

а-токсин, являющийся лецитиназой, а также гемолизины, коллагеназу,

низкомолекулярные протеины (ингибируют бактерицидные факторы),

гиалуронидазу и ДНКазу. Экзотоксины специфичны для каждого вида

энтеротоксин. Часть факторов контролируется плазмидами вирулентности.

клостридий.

Клинические особенности: Инкубационный период – несколько часов до 8 сут.

Резистентность. Чувствительны к кислороду, солнечному свету, высокой

Различают

локальные

–

кожно-бубонная,

бубонная;

внешне-

температуре, дезинфектантам. Возбудители газовой гангрены, являясь

диссеминированные – первично-легочная, вторично-легочная и кишечная;

нормальными обитателями кишечника животных и человека, с фекалиями

генерализованная – первично-септическая, вторично-септическая формы чумы.

попадают в почву, где споры длительное время сохраняются. В некоторых

Региональная лимфоаденопатия, энтероколиты, реактивные артриты,

почвах клостридии могут размножаться.

спондилит, лихорадка.

Эпидемиология. При тяжелых травмах и несвоевременной хирургической

Эпидемиология: Чума - классический природноочаговый зооноз диких

обработке ран. В эпидемиологии газовой гангрены большое значение имеет

животных. Основные носители в природе - сурки, суслики, в городских

загрязнение ран почвой.

условиях - крысы. В передаче возбудителя - блохи животных, способные

Патогенез. Возникновению газовой гангрены способствует ряд условий:

заражать человека.

попадание микробов в рану (заболевание обычно вызывается ассоциацией

Иммунитет: клеточно-гуморальный, ограничен по длительности и

нескольких видов анаэробов и реже одним из них), наличие некротических

напряженности.

тканей, снижение резистентности. В некротических тканях анаэробы часто

Микробиологическая диагностика:

находят условия гипоксии, благоприятные для их размножения. Образуемые

Бактериоскопическое исследование. Из исследуемого материала готовят мазки,

ими токсины и ферменты приводят к повреждению здоровых тканей и тяжелой

окрашивают по Граму и водным раствором метиленового синего. Бактерии

общей интоксикации организма; а-токсин, лецитиназа, расщепляет лецитин —

чумы представляют собой грамотрицательные палочки овоидной формы

важный компонент клеточных мембран. Выделяемые гиалуронидаза и

Бактериологическое исследование. Исследуемый материал засевают на чашки

коллагеназа увеличивают проницаемость тканей, а также способствуют

с питательным агаром. Посевы инкубируют при 25С. Первичное изучение

распространению микроба в окружающей ткани.

посевов производят через 10ч. К этому сроку появляются колонии, которые

Клиника. Инкубационный период короткий — 1—3 дня. Отеки, газо-

образованы вирулентными R-формами. Мало- и авирулентные бактерии

образованием в ране, выраженной интоксикацией организма. Течение болезни

формируют S-формы колоний. Идентификацию чистой культуры проводят по

усугубляют сопутствующие бактерии.

морфологии бактериальных клеток, характеру роста, антигенным и биохимиче-

Иммунитет. Перенесенная инфекция не оставляет иммунитета. Ведущая роль в

ским свойствам, чувствительности к специфическому фагу и биопробе.

защите от токсина принадлежит антитоксинам.

На бульоне бактерии образуют пленку; ферментируют многие сахара до

Микробиологическая диагностика. Материал для исследования (кусочки

кислоты, индола не образуют, желатин не разжижают. Содержат групповой

пораженных тканей, раневое отделяемое) микроскопируют. Диагноз

термостабильный соматический антиген и специфический термолабильный

подтверждается при обнаружении грам «+» палочек в материале в отсутствии

капсульный антиген.

лейкоцитов.

Проводят

бактериологическое

исследование

–

обнаружение

Биопроба. Проводится для выделения чистой культуры из материала,

С.perfringens в факалиях – пищевая токсикоинфекция;

загрязненного посторонней микрофлорой. Наиболее чувствительными

Лечение.

Хирургическое:

удаляют некротические ткани. Вводят

лабораторными животными являются морские свинки, которым материал

антитоксические сыворотки, применяют антибиотики и гипербарическую

вводят подкожно. Внутрибрюшинно материал вводят в том случае, если он не

оксигенацию.

загрязнен другими бактериями. После гибели животных отмечают па-

Антитоксические сыворотки - в жидком и сухом виде после очистки

тологические изменения органов и проводят бактериологическое исследование

методом ферментативного гидролиза анатоксических сывороток, полученных

Экспресс-методы лабораторной диагностики:

при иммунизации лошадей анатоксинами. Применяют для экстренной

1.Иммунофлюоресцентный метод позволяет обнаружить присутствие

профилактики и специфич. терапии.

возбудителя как в патологическом материале, так и в объектах окружающей

Профилактика. Хирургическая обработка ран, соблюдение асептики и

среды (вода, воздух), а также в пищевых продуктах и эктопаразитах. С этой

антисептики

при

операциях.

Для специфической активной

иммунизации

целью используют люминесцентную видоспецифическую противочумную

применяют анатоксин в составе секстанатоксина , создающий приобретенный,

сыворотку, люминесцентные противокапсульную и противосоматическую

искусственный, активный, антитоксический иммунитет.

сыворотку.

2.РПГА -

для обнаружения антигенов бактерий в материале с помощью

стандартной противочумной сыворотки, антитела которой нагружены на

эритроциты.

Лечение: антибиотики –стрептомицин, препараты тетрациклинового ряда.

Профилактика: специфическая профилактика - живая ослабленная чумная

вакцина EV. Имеется сухая таблетированная вакцина для перорального

применения.

Для

оценки

иммунитета

чуме (естественного

постинфекционного и вакцинального) может применяться внутрикожная

аллергическая проба с пестином.

Чумной бактериофаг – при идентификации Y.pestis.

Чумная сухая вакцина – высушенная живая культура Y.pestis вакцинного

штамма EV, используется для профилактики чумы.

<<< < Предыдущая 1 2 3 4 5 67 / 97 8 9 > Следующая >>>

Соседние файлы в предмете Микробиология

#
07.05.2020720.05 Кб46IBP-medpodgotovka_1.pdf
#
22.05.20207.74 Mб18Ответы к 5 коллоквиуму.pdf
#
07.05.20201.99 Mб27Ответы на экзаменационные билеты.doc
#
07.05.2020201.49 Кб57РЕШЕННОЕ ЦТ Микробиология.docx
#
07.05.202035.61 Кб3Экзамнационные вопросы по микре.docx