Ответы к 5 коллоквиуму

Лабораторная диагностика

Исследуемый материал: слизь из носоглотки, ликвор, кровь.

Методы диагностики:

•Экспресс-диагностика

–РИФ

–РПГА

–ИФА

–ПЦР

•Микроскопическийметод

Наличие в препаратах грамотрицательных диплококков бобовидной формы.

• Бактериологический метод (основной)

Исследуемый материал засевают на:

–сывороточный агар (с ристомицином),

–кровяной агар,

–асцитический агар.

Посевы инкубируют при + 37о при 8 – 10 % СО2.

Образуют нежные, прозрачные колонии, размером 2—3 мм.

Чистую культуру идентифицируют по биохимическим свойствам – ферментация глюкозы и мальтозы до кислоты.

•Серологический метод

–РПГА

–ИФА

АТ обнаруживаются с конца 1-ой недели болезни, достигая максимума на 2 – 3-й неделе, а затем титр постепенно снижается.

Профилактика по эпид. показаниям:

•Вакцины менингококковые полисахаридные серогрупп А и С

•Нормальный донорский иммуноглобулин: содержит антитела различной специфичности.

Для изготовления серии иммуноглобулина используют плазму, полученную не менее чем от 1000 здоровых доноров.

Гонорея

— антропонозное инфекционное заболевание, вызываемое гонококком (Neisseriagonorrhoeae) и характеризующееся воспалительным поражением преимущественно слизистых оболочек мочеполовых органов. Относится к венерическим заболеваниям.

N.gonorrhoeae (гонококк)

Эпидемиология гонореи

Источник инфекции – человек, инфицированный гонококком (строгий антропоноз).

Путь передачи - половой, иногда – бытовой - через предметы обихода (белье, полотенце, мочалка). Восприимчивый коллектив – любой человек.

Факторы патогенности N. gonorrhoeae

•Факторы адгезии и колонизации: микрокапсула, пили, белки наружной мембраны II класса,

•Факторы инвазивности: белки наружной мембраны Iкласса,

•Ферменты патогенности:IgA-протеаза,

•Агрессины: белки наружной мембраны II класса и микрокапсула способствуют незавершённому фагоцитозу,

•Токсины: эндотоксин (ЛПС).

Патогенез гонококковой инфекции

•Входные ворота – цилиндрический эпителий слизистой оболочки уретры и шейки матки.

•После адгезии гонококки путем эндоцитоза проникают внутрь эпителия, образуют в них вакуоли, в которых размножаются. После слияния вакуолей с базальной мембраной гонококки попадают в окружающую соединительную ткань, где вызывают воспаление.

•Гонококки могут поступать в кровь и диссеминировать по организму, проникая в синовиальные оболочки суставов, сердце и другие органы.

•У детей, рожденных инфицированными гонококками матерями, гонококки могут проникать в конъюнктиву и вызывать воспаление слизистой глаза — бленнорею.

Клиника гонореи

•Клинически различают две основные формы гонореи — острую и хроническую.

•Типичным симптомом острой гонореи является острое гнойное воспаление уретры и шейки матки у женщин, сопровождающееся резью при мочеиспускании, обильными гнойными выделениями из уретры. Для хронической гонореи типично более вялое проявление клинических симптомов, связанных с местом локализации возбудителя.

Лабораторная диагностика

Исследуемый материал: гнойное отделяемое из мочеполовой системы, с конъюнктивы глаза.

Методы диагностики:

•Экспресс-диагностика

–РИФ

–ПЦР

•Микроскопический метод (основной)

Наличие в препаратах грамотрицательных диплококков бобовидной формы и большого количества лейкоцитов.

• Бактериологический метод Исследуемый материал засевают на:

–сывороточный агар,

–кровяной агар,

–асцитический агар.

Посевы инкубируют при + 37о при 8–10 % СО2. Образуют мелкие блестящие колонии (капли росы).

Чистую культуру идентифицируют по биохимическим свойствам – ферментация только глюкозы до кислоты.

•Серологический метод

–ИФА

–РСК (реакция Бордэ – Жангу)

вострых случаях реакция положительна у 35 % больных, при хронических – у 65 %.

•Специфическая профилактика отсутствует.

•Специфическое лечение:

лечебная гонококковая вакцина (гоновакцина): содержит инактивированные нагреванием гонококки

•Применение гоновакцины показано после безуспешной антибиотикотерапии при вяло протекающих хронических формах заболевания, мужчинам с осложненной и женщинам с восходящей гонореей (после стихания острых воспалительных явлений).

•Используется также для контроля излеченности – для постановки провокационной пробы.

ЧУ М А

•Острая инфекционная природно-очаговая болезнь, относящаяся к группе карантинных инфекций, характеризующаяся тяжелой интоксикацией, лихорадкой, поражением кожи, лимфатических узлов, сепсисом и высокой летальностью.

•В естественных условиях чума является болезнью грызунов - сусликов, песчанок, крыс, мышей и других, среди которых она распространяется блохами. Чумой могут заразиться от диких животных и домашние.

•Заражение человека происходит через кожу и слизистые оболочки при контакте с больными животными или чаще при укусе человека зараженной блохой. Источником заражения могут быть также трупы людей, умерших от чумы. Исключительную опасность для окружающих представляет человек, пораженный легочной формой чумы, который при разговоре, кашле, чиханье выделяет в воздух капельки мокроты, содержащие чумные палочки.

Классификация и характеристика возбудителя

•5-я группа по Берджи (факульт. анаэроб. грпалочки)

•Род Yersinia, сем. Enterobacteriaceae, включает 11 видов, из которых в патологии человека основное значение имеют 3 вида: Yersiniapestis (возбудитель чумы), Yersiniapseudotuberculosis (псевдотуберкулеза),

Yersiniaenterocolitica (кишечного иерсиниоза)

•Yersiniapestis - неподвижная полиморфная грамотрицательная бактерия, имеющая вид палочки овоидной формы со вздутой центральной частью ("английская булавка"). Палочка факультативный анаэроб, не образует спор. В природных условиях микроб вегетирует в R-форме, обладающей вирулентностью. Оптимальная температура его роста 28°С. При температуре 37°С чумной микроб образует капсулу.

Тонкая стенка бактерий состоит из 3-х слоев, что придает ей двояковыпуклую форму и обеспечивает задержку анилиновых красителей на полюсах - биполярное окрашивание.

Факторы патогенности

•Адгезины – капсула, белки наружной мембраны

•Ферменты патогенности – фибринолизин, плазмокоагулаза, гиалуронидаза, протеинкиназа

•Экзотоксин (мышечный токсин) – не выделяется из бактериальной клетки

•Эндотоксин – ЛПС клеточной стенки

•Агрессины – белки наружной мембраны, обладающие антифагоцитарным действием

Культуральные свойства

•Оптимум температуры 28-30оС; оптимум рН 6,9-7,2. Бактерии чумы нетребовательны к питательным средам. На бульоне через 48 ч образуют нежную плёнку на поверхности со спускающимися вниз нитями и хлопьевидный осадок (среда остаётся прозрачной). Также хорошо растут в желатине, не вызывая её разжижения.

•Микроскопическое изучение колоний Y. pestis выявляет три стадии роста. Через 10-12 ч культивирования вырастают «молодые» бесцветные микроколонии с неровными краями («битое стекло»). Через 18-24 ч они сливаются, формируя нежные плоские образования с фестончатыми краями и приподнятым центром («кружевные платочки»). Через 40-48 ч наблюдают «зрелые» колонии — крупные, с бурым зернистым центром и неровными краями («ромашки»).

Патогенез и клиника чумы

•Зависят от пути заражения

•Инкубационный период когда появляется бубонная чума длится 2—5 дней, при легочной—1—3 дня. Начало острое, с сильным ознобом, высокой лихорадкой и тяжелыми общими явлениями: головной болью, болями в крестце и сильной общей слабостью. Больные чумой или безучастны к окружающему, или возбуждены. Рано наступает помрачение сознания. Лицо в первые дни чумы красное, потом резко бледнеет, глаза вваливаются, черты лица заострены, температура достигает 40—41°. Пульс учащен, слабого наполнения. Артериальное давление снижено. Язык сух, покрыт белым налетом—«меловой» язык. Печень и селезенка увеличены.

•При контактном пути возбудитель проникает через кожу, формируя первичный аффект в виде пятна, резко болезненном при надавливании. Вскоре на месте пятна образуется припухлость, которая через несколько часов вскрывается и превращается в язву, окруженную воспалительным валиком. Внутри язвы образуются пузырьки, окружающие язву. Кожа отечная, багрово-красного цвета.

Кожные поражения при этом могут быть сильно или слабо выраженными —наряду с воспалением регионарного лимфатического узла — кожно-бубонная форма.

Бубонная форма - регионарные (по отношению к месту внедрения инфекции) лимфатические узлы увеличиваются, превращаясь в чумной бубон.

Бубон (скопление сильно увеличенных лимфатических узлов), клетки которого быстро подвергаются омертвению и нагноению.

Чумные бубоны резко болезненны, достигают величины кулака, вокруг них наблюдается обширный отек тканей. Наиболее часто бубоны чумы бывают в паховых областях, что связано с преимущественным укусом блох в нижние конечности. Изредка бубоны рассасываются, но чаще происходит их нагноение и вскрытие. Чумные палочки с током крови могут попадать в лимфатические узлы, находящиеся в отдалении от первичного бубона, вызывая в них также воспаление — вторичные бубоны.

Легочная форма чумы

Фагоциты, захватывая чумную палочку, не уничтожают ее до конца, что затрудняет выработку антител и других защитных факторов. Лимфатические узлы не могут сдерживать бактерии, они прорываются в кровь и разносятся с ее током по организму. Возникает генерализация инфекции. Возбудитель, попадая в другие лимфатические узлы, вызывает их воспаление и образование вторичных бубонов; затем заносится во внутренние органы, образуя в них очаги инфекции. Иерсинии и их токсины вновь поступают в кровь и вызывают развитие инфекционно-токсического шока, кровоизлияния в кожу, слизистые и серозные оболочки, стенки сосудов. Возникают изменения в сердце, печени, селезенке, почках и других внутренних органах. При попадании в легкие вызывают явления чумной пневмонии с образованием кровянистой жидкости, содержащей огромное количество возбудителя.

Клиника легочной формы Легочная чума развивается при вдыхании чумных микробов. Эта форма чумы протекает чрезвычайно

остро и бурно, характеризуясь обычно геморрагическим воспалением легких, и без лечения кончается всегда смертельно в течение 2—3 дней. Наряду с сильной одышкой, режущими болями в груди, кашлем с кровавой мокротой развивается тяжелейшая интоксикация, с бредом, прострацией, переходящей в кому. Легочная чума может возникнуть также вторично при бубонной форме. В крови, как правило, отмечается лейкоцитоз.

Наряду с тяжелейшим течением при бубонной чуме встречаются сравнительно легкие формы болезни. Летальность без лечения при бубонной форме чумы 50—60%, при легочной около 100%. Смерть в большинстве случаев наступает в первые 5—8 дней болезни.

Перенесенное заболевание оставляет стойкий иммунитет.

Лабораторная диагностика чумы

Материал для исследования: зависит от клинической формы (пунктат, содержимое бубона, мокрота, испражнения, кровь)

Экспресс-диагностика:

Микроскопический

РИФ, РПГА, РНТФ, ПЦР Бактериологический– основной Биологический– на морских свинках Серодиагностика

•Развернутая РА или РПГА

Бактериологическое исследование

-Посевы исследуемого материала производят на агар добавлением стимуляторов роста (кровь, сульфит натрия)

-При исследовании материала, обильно загрязненного посторонней микрофлорой (загнившие трупы, мокрота) к агару добавляют генциановый фиолетовый 1 : 100 000.

-Инкубацию посевов проводят при 28 °С. В положительных случаях через 12 ч появляются колонии в виде характерных "кружевных платочков".

Когда чистая культура выделена путем прямого посева она подлежит идентификации на основании следующих данных:

внешний вид колонии на агаре;

-характерный рост на бульоне;

-типичная морфология микробов в мазках и отрицательная окраска по Граму;

-типичная патологоанатомическая картина у лабораторных животных при заражении их чистой культурой;

-агглютинация со специфической сывороткой;

-отношение к специфическому бактериофагу.

Профилактические мероприятия в отношении чумы направлены:

•на предупреждение заболевания людей в природных очагах;

•на предупреждение заболевания медицинских работников, работающих с заразными и подозрительными на зараженность чумой материалами;

•на предупреждение заноса инфекции в страну из-за рубежа.

Сибирская язва

Острое инфекционное заболевание из группы зоонозов, вызываемое спорообразующими микробами Bacillusanthracis, которое передается человеку при контакте с больными животными, их трупами, сырьем животного происхождения, контаминированными объектами внешней среды, а также, возможно, кровососущими членистоногими, протекающее преимущественно в виде кожной формы, реже влегочной и кишечной формах и имеющее высокую летальность.

Классификация

•18 группа по определителю Берджи – крупные грам+ палочки, аэробы

•Семейство Bacillaceae

•Род Bacillus

•Вид Bacillusаnthracis (аnthrax – злокачественный карбункул)

Вокрашенных препаратах из крови и тканей больных или погибших от сибирской язвы животных бактерии располагаются одиночно, попарно и в виде коротких цепочек по 3-4 клетки; концы палочек, обращенных друг к другу, прямые, резко обрубленные, свободные - слегка, закругленные. Иногда цепочки имеют форму бамбуковой трости. Неподвижны, образуют центрально расположенные споры.

Вмазках из культур на плотных и жидких питательных средах палочки располагаются длинными цепочками. Образуют массивную с четкими контурами капсулу.

Культуральные свойства

• Хорошо растут на простых питательных средах

• МПБ – придонный рост в виде комочка ваты без помутнения среды

• На плотных питательных средах (МПА) образуют R-колонии с выраженной исчерченностью края («голова медузы»)

• Температурный оптимум роста 35-37оС, РН 7,2-8,6 На КА в отличие от антракоидов (непатогенных бацилл) не образуют гемолиза! 17-24-часовые культуры

состоят из серовато-беловатых тонкозернистых с серебристым оттенком, похожих на снежинки колоний, имеющих шероховатый рельеф и характерных для типичных вирулентных штаммов (R-форма). Диаметр колоний не превышает 3-5 мм.

На сывороточном агаре и свернутой лошадиной сыворотке в присутствии 10-50% углекислоты колонии гладкие полупрозрачные (S-форма), а также слизистые (мукоидные), тянущиеся за петлей (М-форма), состоящие из капсульных палочек.

ВМПБBacillusanthracis через 16-24 ч на дне пробирки образует рыхлый белый осадок, надосадочная жидкость остается прозрачной, при встряхивании бульон не мутнеет, осадок разбивается на мелкие хлопья (R-форма).

При посеве в столбик желатина на 2-5-е сут. появляется желтовато-белый стержень. Культура напоминает елочку, перевернутую верхушкой вниз. Постепенно верхний слой желатин начинает разжижаться, принимая сначала форму воронки, затем мешочка.

Тест «жемчужного ожерелья»: на средах, содержащих 0,05-0,5 Ед/мл пенициллина, сибиреязвенные бациллы через 3-6 часов роста образуют сферопласты, расположенные цепочкой и напоминающие в мазке жемчужное ожерелье.

Кожная форма характеризуется местными изменениями в области ворот инфекции. Процесс протекает быстро, с момента появления пятна до образования пустулы проходит несколько часов. Местно больные отмечают зуд и жжение. Содержимое пустулы часто имеет темный цвет за счет примеси крови. При нарушении целостности пустулы (чаще при расчесах) образуется язва, которая покрывается темной коркой. Вокруг центрального струпа располагаются в виде ожерелья вторичные пустулы, при разрушении которых размеры язвы увеличиваются. Вокруг язвы отмечается отек и гиперемия кожи, особенно выраженные при локализации процесса на лице. Характерно снижение или полное отсутствие чувствительности в месте локализации язвы.

Признаки общей интоксикации (лихорадка до 40оС, общая слабость, разбитость, головная боль, адинамия, тахикардия) появляются к концу первых суток или на 2-й день болезни. Лихорадка держится в течение 5-7 дней, температура тела снижается критически. Местные изменения в области язвы постепенно заживают,

ик концу 2-3-й недели струп отторгается. Обычно бывает единичная язва, хотя иногда могут быть и множественные (2-5 и даже 36). Увеличение числа язв заметного влияния на степень тяжести течения заболевания не оказывает. Большее влияние на течение болезни оказывает возраст больного.

Легочная форманачинается остро, протекает тяжело и даже при современных методах лечения может закончиться летально. Среди полного здоровья возникает потрясающий озноб, температура тела быстро достигает высоких цифр (40оС и выше), отмечается конъюнктивит (слезотечение, светобоязнь, гиперемия конъюнктив), катаральные явления со стороны верхних дыхательных путей (чихание, насморк, хриплый голос, кашель). Состояние больных с первых часов болезни становится тяжелым, появляются сильные колющие боли в груди, одышка, цианоз, тахикардия (до 120-140 уд/мин), АД понижается. В мокроте наблюдается примесь крови. Над легкими определяются участки притупления перкуторного звука, сухие и влажные хрипы, иногда шум трения плевры. Смерть наступает через 2-3 дня.

Кишечная форма сибирской язвы характеризуется общей интоксикацией, повышением температуры тела, болями в эпигастрии, поносом и рвотой. В рвотных массах и в испражнениях может быть примесь крови. Живот вздут, резко болезненный при пальпации, выявляются признаки раздражения брюшины. Состояние больного прогрессивно ухудшается и при явлениях инфекционно-токсического шока больные умирают.

Лабораторная диагностика Материал для исследования – содержимое карбункула и пузырьков, мокрота, испражнения, кровь, моча.

Экспресс-диагностика:

•Исследования у животных – РП Асколи

•РИФ, РПГА

•Микроскопия – гр+ стрептобациллы

Заражение лабораторных животных имеет целью как выделение чистой культуры, так и оценку ее вирулентности (на основании определения ДСЛ и ЛД50).

Бактериологический метод (основной)

Посевы на питательные среды (на MПA и МПБ, или бульон и агарХоттингера, можно делать посевы на дифференциально-диагностическую среду с 0,01%. фенолфталеинфосфата натрия, желатин, кровяной бульон и агар); - идентификация выделенных культур по культурально-биохимическим свойствам (наличие капсул,

подвижность, гемолитические свойства, РИФ, тест "жемчужного ожерелья«, чувствительность к бактериофагу);

Кожно-аллергическая проба

•В качестве вспомогательного метода можно использовать кожно-аллергическую пробу со специфическим аллергеном - антраксином.

•Антраксин – нуклеобелковополисахаридный комплекс, полученный путем кислотного гидролиза вегетативных форм ВА – вакцинного штамма СТИ после предварительной температурной денатурации балластных белков

•Препарат вводят внутрикожно (0,1 мл) в ладонную поверхность предплечья. Результат учитывают через 24 и 48 ч. Положительной считается реакция при наличии гиперемии и инфильтрата свыше 10 мм в диаметре при условии, что реакция не исчезла через 48 ч.

Специфическая профилактика

•Важная роль в профилактике сибирской язвы принадлежит вакцинации, которая осуществляется живой споровой бескапсульной сибиреязвенной вакциной СТИ.

•Иммунизация проводится однократно, накожным или подкожным методом. Плановая вакцинация осуществляется в предэпидемический период накожным способом.

•следующим контингентам: работникам предприятий, занятых на заготовке, сортировке, хранении, транспортировке и переработке животного сырья; работникам мясокомбинатов, убойных пунктов, персоналу, обслуживающему сельскохозяйственных животных в стационарно-неблагополучных по сибирской язве пунктах.

•Вакцинация создает иммунитет продолжительностью до года, поэтому ревакцинацию проводят ежегодно. Остальные контингенты прививают по эпидемиологическим показаниям; вакцину вводят подкожным способом, что позволяет в сжатые сроки охватить значительный процент лиц, подлежащих прививке.

Сифилис – хроническая венерическая болезнь, характеризующаяся поражением кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей и нервной системы, отличается волнообразным течением со сменой периодов обострения, скрытыми периодами.

Историческая справка

Возбудитель сифилиса открыт Ф. Шаудином и Э. Гофманом в 1905 г. Классификация

1гр по определителю Берджи Спирохеты – тонкие подвижные извитые бактерии без жгутиков, с внутриклеточно расположенным аппаратом движения

род – Treponema (вращающаяся нить)

вид – Т. pallidum — возбудитель сифилиса у человека, Т. pertenue — возбудитель фрамбезии, Т.

carateum — возбудитель пинты

Морфологические и тинкториальные свойства

тонкие спиралевидные микроорганизмы

завитки спирали расположены на равном расстоянии друг от друга

подвижны

спор и капсул не образуют

Грам-отрицательны

Ультраструктура Т. pallidum

снаружи покрыта чехлом под которым находятся трёхслойная наружная стенка, цитоплазматическая мембрана

имеет микрофибриллырасположенные между клеточной стенкой и цитоплазматической

мембраной, прикрепленные на полюсах к блефаропластам и способствующие движению

Для выявления бледных трепонем используют

тёмное поле микроскопа

иммунофлюоресцентную окраску

окраску по Романовскому-Гимзе

Типы движения Т. рallidum

поступательное

контрактильное

сгибательное

вращательное

Культуральные свойства

факультативный анаэроб

на искусственных питательных средах не растет

Т. pallidum культивируют в ткани яичка кролика, где она хорошо размножается и полностью сохраняет свои свойства, вызывая у животного орхит

Штамм Рейтера – сапрофит, по АГ структуре, не отличается от Т.palladium, но растёт на питательных средах и используется в качестве АГ в РСК.

Биохимические свойства

Мало изучены

Токсигенные свойства

Экзотоксинов не образует

Факторы вирулентности

белки наружной мембраны

липополисахарид клеточной стенки проявляют свои токсические свойства после освобождения из клетки

Антигенные свойства

Антигенная структура Т. pallidum связана с белками наружной мембраны, липопротеидами

Антигены являются перекрестно-реагирующими антигенами, общими для человека и крупного рогатого скота (кардиолипиновый АГ, используется в нетрепонемных реакциях)

Резистентность

В цельной крови или в сыворотке при 4° сохраняют жизнеспособность не менее 24 часов

Трепонемы быстро погибают при высушивании и повышении температуры до 42°С

Мгновенно теряют подвижность и погибают в присутствии соединений мышьяка, ртути, висмута в соленой воде - до нескольких месяцев

При неблагоприятных условиях существования (воздействие антибиотиков, недостаток питания) могут образовывать "формы выживания" - цисты и L- формы

Патогенность для животных

В естественных условиях животные не чувствительны к бледным трепонемам

Штамм Никольса является патогенным для кролика, при интратестикулярном заражении возникает

орхит (используется в трепонемных реакциях)

Эпидемиология

Источник инфекции – больные первичным и вторичным сифилисом

Путь передачи – половой

редко контактно-бытовой, трансфузионный и трансплацентарный  Восприимчивый коллектив – любой человек

Периоды сифилиса

инкубационный период

первичный серонегативный

первичный серопозитивный

вторичный свежий

вторичный скрытый

вторичный рецидивный

третичный период

Инкубационный период

Продолжительность инкубационного периода в среднем составляет 3—4 недели

Время от момента инфицирования до появления первичной сифиломы

Первичный период

В месте внедрения возбудителя

Твёрдый шанкр - первый клинический признак заболевания.появляется в среднем через 3—4 недели после заражения на том месте, где бледная трепонема проникла в организм

Период длится 7—8 недель

Первичный период завершается общими лихорадочными явлениями, недомоганием, болями в костях, суставах и полиаденитом

первичный серонегативный сифилис, когда стандартные серологические реакции ещё отрицательны

первичный серопозитивный сифилис, когда стандартные серологические реакции становятся

положительными, что происходит в среднем через 3—4 недели после возникновения первичной сифиломы

Вторичный период

наступает через 7—8 недель после появления первичной сифиломы или через 10—12 недель после поражения

характеризуется поражениями на коже и слизистых оболочках в виде розеолёзных, папулёзных и пустулёзных высыпаний, которые, просуществовав несколько недель, самостоятельно проходят, и наступает скрытый (латентный) период заболевания Через некоторое время наблюдается рецидив болезни (вторичный рецидивный)

поражаются также внутренние органы, нервная и костная системы

вторичный свежий сифилис, когда на коже и слизистых оболочках впервые появляются обильные и яркие высыпания при наличии первичного склероза или его остатков

вторичный скрытый сифилис— период сифилиса без активных проявлений на коже и слизистых оболочках

вторичный рецидивный сифилис— период последующих повторных высыпаний