IV. Методы стерилизации и их применение в аптеках.

Стерилизация - это процесс умерщвления в объекте или удаления из него микроорганизмов всехвидов, находящихся на всех стадиях развития.

Для стерализации используют следующие методы:

• термические методы стерилизации - паровой и воздушный;

• химические методы стерилизации - газовый и стерилизация растворами;

• стерилизация фильтрованием;

• радиоционный метод стерилизации.

1. Термические методы стерилизации.

   1. Паровой метод

      1. Паровой метод стерилизации осуществляют насыщенным

водяным паром при избыточном давлении 1,1 кгс/см², температура 120ºС; 2 кгс/см², температура 132ºС.

Стерилизацию проводят в паровых стерилизаторах. Для достижения максимальной эффективности процесса необходимо полное удаление воздуха из стерилизационной камеры и обрабатываемых объектов, а также правильное размещение последних, обеспечивающее проникновение к ним пара.

1.1.2.Стерилизация насыщенным водяным паром при 120ºС рекомендуется для растворов лекарственных веществ. Время стерилизационной выдержки зависит от физико-химических свойств препарата, объема раствора и используемого оборудования:

Объем образца в мл	Минимальное время стерилизационной выдержки в мин.
До 100	8
от 100 до 500	12
от 500 до 1000	15

Стерилизацию растворов проводят в герметично укупоренных флаконах или бутылках.

В исключительных случаях допускается стерилизация при температуре ниже 120ºС, что оговаривается в соответствующей нормативно-технической документации.

1.1.3. Паровым методом можно стерилизовать также изделия из стекла, фарфора, металла, перевязочные и вспомогательные материалы (вата, марля, бинты, резиновые пробки, фильтровальная бумага, пергамент, резиновые перчатки, спецодежда и др.). Время стерилизационной выдержки при температуре 120ºС - 45 минут, при 132ºС - 20 минут. Стерилизацию перечисленных объектов проводят в стерилизационных коробах, биксах или в двухслойной упаковке из бязи или пергамента.

2. Воздушный метод.

   1. Воздушный метод стерилизации осуществляют сухим горячим

воздухом в воздушных стерилизаторах при температуре 160º, 180º или 200ºС. Эффективность этого метода стерилизации зависит от температуры, времени, степени теплопроводности стерилизуемых объектов и правильности расположения их внутри стерилизационной камеры для обеспечения свободной циркуляции горячего воздуха.

1.2.2. Воздушный метод используют для стерилизации термостойких порошков (натрия хлорида, окиси цинка, талька, белой глины и др.).

Масса образца в г	Температура в ºС	Минимальное время стерилизационной выдержки в минутах
до 25	180 200	30 10
от 25 до 100	180 200	40 20
от 100 до 200	180 200	60 30

1.2.3. Минеральные и растительные масла стерилизуют при 180ºС или 200ºС.

Вес образца, г	Температура, ºС	Минимальное время стерилизационной выдержки
до 100	180 200	30 15
от 100 до 500	180 200	40 20

1.2.4. Изделия из стекла, силиконовой резины, фарфора, установки для стерилизующего фильтрования с фильтрами и приемники фильтрата стерилизуют при 160ºС в течение 2,5 часов или при 180ºС в течение 60 минут. Допускается использование более высоких температур нагрева при соответствующем уменьшении времени стерилизационной выдержки, обеспечивающих стерильность и сохранность объекта.

1.3. Контроль термических методов стерилизации.

1.3.1. В аптечных учреждениях контролю подвергают все эксплуатируемые паровые и воздушные стерилизаторы по всем используемым режимам стерилизации.

1.3.2. Контроль параметров и эффективности термических методов стерилизации осуществляют с помощью контрольно-измерительных приборов, химических и биологических тестов.

Количество тестов, которые закладывают для контроля одного цикла стерилизации, зависит от размеров камеры стерилизатора (табл.1).

Таблица 1 Количество тестов для контроля одного цикла стерилизации

Вид стерилизатора	Емкость камеры стерилизатора, л	Количество зон, в которые закладываются тесты
Паровой стерилизатор	до100 100-250 250-750 свыше 750	2 3 5 7
Воздушный стерилизатор	до 50 50-100 100-250 250-500 500-1000	3 5 15 25 30

Зоны контроля распределяются равномерно по всему объему камеры.

1.3.3. Для контроля паровой стерилизации в качестве химических тестов используют вещества, изменяющие свой цвет или физическое состояние при определенных параметрах стерилизации.

В качестве химического термоиндикатора используется смесь бензойной кислоты с фуксином (10:1) (температура плавления 121ºС), расфасованная по 0,3 - 0,5 г в стеклянные запаянные трубочки или ампулы или герметично укупоренные флаконы вместимостью 5-10 мл. Емкости с тестом завертывают в марлевые салфетки, закладывают во все стерилизационные коробки и свертки, а 2-3 емкости между коробками или флаконами с раствором лекарственных веществ. Если после стерилизации вещество расплавилось и цвет индикатора изменился, стерилизация состоялась и материал выдается для использования. Отрицательный результат свидетельствует о грубом нарушении режима стерилизации или неисправности манометра. Материал считается не стерильным. Необходимо проверить правильность показаний манометра максимальными термометрами.

1.3.4. Проверку температурного режима парового стерилизатора осуществляют максимальными термометрами со шкалой на 150ºС или термопарами. Погрешность измерения температуры не должна превышать ±1ºС (термометры предварительно проверяют в кипящей воде). Их нумеруют и закладывают внутрь стерилизуемых изделий в каждую стерилизационную коробку. Один термометр закладывают между биксами или коробками.

Для оценки режима стерилизации растворов лекарственных средств камеру стерилизатора максимально загружают флаконами с водой, в которые погружают от 2 до 7 (в зависимости от объема рабочей камеры парового стерилизатора) максимальных термометров. Размеры контрольных флаконов должны соответствовать размерам флаконов с растворами. Один термометр помещают между флаконами.

Показания термометров снимают в момент выхода аппарата на режим (в начале стерилизационной выдержки). При этом цикл стерилизации прерывается.

Проверка температурного режима максимальными термометрами должна осуществляться 1 раз в 2 недели и при показаниях. Если максимальная температура, зарегистрированная в камере, отличается более чем на 2ºС от температуры, соответствующей давлению (табл.2), то манометр не исправлен и требуется его замена.

Работа с неисправным манометром не допустима. Разница температур внутри упаковки с материалами и вне упаковки более 2ºС свидетельствует о том, что полнота удаления воздуха из камеры недостаточна или стерилизационные коробки плотно загружены.

Таблица 2 Таблица зависимости температуры пара от давления.

Давление пара, кгc/см²	Температура пара, ºС
0,0 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 1,5 1,6 1,7 1,8 1,9 2,0	99,1 110,8 112,7 114,6 116,3 118,0 119,6 121,2 122,7 124,1 125,1 126,8 128,1 129,3 130,6 131,8 132,9

1.3.5. Для контроля воздушной стерилизации кусочки индикаторной бумаги размером 0,5-1,0 см закладывают внутрь упаковки с объектами стерилизации или в химические пробирки. Упаковки или пробирки с индикаторами помещают в контрольные зоны. Индикаторная бумага на основе термоиндикаторной краски 6 изменяет свой цвет из белого в коричневый после воздействия температуры 160ºС в течение 60 минут. Интенсивность окраски возрастает при увеличении температуры или продолжительности ее воздействия.

Емкость с индикатором плавления (напр., сахароза, т.пл. 180ºС) закладывают в пакеты из крафт-бумаги или внутрь стерилизуемых упаковок и помещают в контрольные зоны. Сплавление вещества указывает, что на него воздействовала стерилизующая температура.

1.3.6. При контроле воздушной стерилизации термопары, вложенные в бумажные конверты, вводят в камеру через отверстие для термометра, вентиляционное отверстие или створки дверей. Количество термопар должно соответствовать количеству зон контроля в аппарате, а номера термопар номерам изделий, отобранных для исследования на стерильность, и номерам тестов со спорами сенной палочки. Камера при контроле максимально нагружается изделиями, температура регистрируется каждые 10 минут.

1.3.7. Бактериологический контроль термических методов стерилизации осуществляют с помощью биотеста стерилизации. Биотест - объект из установленного материала, обсемененный тест-микроорганизма.

В качестве биотестов могут быть использованы пробы садовой земли, а также тест - микроорганизмы: чистые культуры спорообразующих микроорганизмов типа Bac. subtilis, Bac. mesentericus, Bac. stearothermophilis и др., нанесенные на установленный материал.

2. Стерилизация фильтрованием.

Растворы термолабильных веществ стерилизуют фильтрованием с

помощью мембранных и глубинных фильтров, задерживающих микроорганизмы и их споры.

2.1. Мембранные фильтры характеризуются ситовым механизмом задержания и постоянным размером пор при эксплуатации. Максимальный размер пор стерилизующего мембранного фильтра не более 0,3 мкм.

Для мембранных фильтров в паспорте указывается "точка пузырька" (минимальное давление газа, необходимое для вытеснения жидкости из фильтра - величина, непосредственно связанная с максимальным размером пор в фильтре).

При стерилизации фильтрованием перед стерилизующим фильтром помещают один или несколько предфильтров. Поры предфильтра, как правило, больше пор фильтра.

Перед началом фильтрования и после него проверяют герметичность собранной установки и целостность мембранного фильтра, например, путем определения "точки пузырька". Фильтрование проводят, применяя положительное давление ( до 0,7 МПа) с не стерильной стороны установки.

2.2. Глубинные фильтры характеризуются сложным механизмом задержания (ситовым, адсорбционным, инерционным) и, в большинстве случаев, непостоянным размером пор. Глубинные фильтры и предфильтры, содержащие асбестовые и стеклянные волокна, как правило, не должны применяться для стерилизации лекарственных средств, вводимых парентерально. В случае их использования, после них должен быть установлен стерилизующий мембранный фильтр. При использовании глубинных фильтров необходимо строго соблюдать указанные в паспорте температуру, рН, давление. Следует избегать гидравлических ударов.

2.3. Стерилизацию фильтрованием и розлив раствора проводят в асептических условиях в ламинарном потоке стерильного воздуха. Эффективность стерилизации фильтрованием проверяют прямым высевом пробы фильтрата в питательную среду.

V. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА СТЕРИЛЬНЫХ РАСТВОРОВ,

БРАКЕРАЖ, ОФОРМЛЕНИЕ.

1. Контроль стерильных растворов на стадии изготовления и в виде готовой продукции, а также регистрацию результатов этого контроля осуществляют в соответствии с требованиями действующей инструкции по контролю качества, методических указаний по приготовлению и контролю качества в условиях аптек индивидуальных растворов и методических указаний по микробиологическому контролю в аптеках *, утвержденных Минздравом СССР.

2. Микробиологический контроль растворов на стерильность

осуществляют по ФС "Испытание на стерильность" (ГФ XI, вып.2).

3. Пирогенность растворов для инъекций и инфузий проверяют в соответствии с требованиями ФС "Испытание на пирогенность" (ГФ XI, вып.2).

4. Растворы считают забракованными при несоответствии их физико-химическим показателям, содержании видимых механических включений, не стерильности, пирогенности, нарушении фиксированности укупорки, недостаточности объема заполнения флаконов или бутылок.

5.Флаконы и бутылки с растворами оформляют согласно действующим единым правилам оформления лекарств, изготовленных в аптеках, утвержденных Минздравом СССР.