2. Практическая часть

1.3.1 Опыт 1. Определение глюкозы в растительном сыре по Фелингу

В основе метода лежит реакция Троммера, то есть способность солей меди(II) в определенных условиях количественно окислять глюкозу.

В реакции Троммера происходит образование как альдоновых кислот, так и гидроксида меди(II), что указывает на отсутствие количественной связи между глюкозой и гемиоксидом меди. Однако, если к реакционной смеси добавить сегнетову соль, то образуется комплекс, в котором медь реагирует с глюкозой в стехиометрическом соотношении:

Количество закиси меди (Сu₂O), эквивалентное окисленной глюкозе, определяется йодометрическим методом:

C u₂O +I₂ CuO + CuI₂

Эта реакция в присутствии солей щавелевой или винной кислот протекает практически до конца.

Избыточное количество йода, которое не прореагировало с гемиоксидом меди, можно определить титрованием тиосульфатом натрия (индикатор – раствор крахмала):

2 Na₂S₂O₃ + I₂ 2NaI +Na₂S₄O₆

Приборы и реактивы: мерные колбы на 500 мл; конические колбы на 250, 50 мл; стеклянные палочки; пипетки; водяная баня; бюретки для титрования; фарфоровая ступка с пестиком; воронка; фильтр; 0,2%-ный раствор глюкозы; реактив Фелинга (раствор I: 200 г сегнетовой соли и 150 г NaOH растворяют в 1 л дистиллированной воды; раствор II: 40 г перекристаллизованного сульфата меди растворяют в 1 л дистиллированной воды; перед работой растворы I и II смешивают); насыщенный раствор щавелевой кислоты; 0,05 М раствор йода; 0,05 М раствор тиосульфата натрия; 1%-ный раствор крахмала; мел; 30%-ный раствор сульфата цинка.

1.3.1.1 Методика выполнения работы:

25 г растительного сырья (овощей, фруктов) измельчают и тщательно растирают в фарфоровой ступке с дистиллированной водой, затем смесь переносят количественно водой в коническую колбу на 250 мл, заливают 150-200 мл горячей дистиллированной водой и нагревают 1 ч на водяной бане при 75-80⁰ С. После охлаждения смесь переносят в мерную колбу на 500 мл, доводят до метки дистиллированной воды и фильтруют.

При анализе кислых продуктов (яблоки, лимоны, виноград и др.) органические кислоты могут разрушить сахар, поэтому перед нагреванием на бане в колбу добавляют мел.

При анализе продуктов, не имеющих кислую реакцию (морковь, капуста, картофель и др.), мел не добавляют.

Для осаждения примесей посторонних веществ (белков и др.) к фильтрату добавляют 1,5 мл 30%-ного раствора сульфата цинка (или 5 мл 10% раствора ацетата свинца, или 5 мл 4%-ного раствора фосфорномолибденовой кислоты). Смесь фильтруют.

В две колбы на 50 мл помещают 10 мл фелинговой жидкости. В одну из колб добавляют 10 мл исследуемого раствора, содержащего глюкозу, а в другую 10 мл дистиллированной воды. Содержимое обеих колб нагревают до кипения, кипятят 5 минут и охлаждают.

После этого в обе колбы наливают по 10 мл насыщенного раствора щавелевой кислоты, по 10 мл раствора йода и после перемешивания стеклянной палочкой отстаивают в течение 5 минут. Затем в обе колбы вносят по 5 капель раствора крахмала и титруют раствором тиосульфата до перехода образовавшейся темно-синей окраски в голубую.

Массовая концентрация глюкозы в исследуемом растворе расчитывается по формуле:

С=(В-А)*f*a*v₀/v₁

где С – массовая концентрация глюкозы, мг/мл;

А и В – объемы раствора тиосульфата натрия, затраченного на титрование пробы и контроля, мл;

f – коэффициент поправки на титр 0,05 М раствора тиосульфата натрия;

а – масса глюкозы (3,52 мг), эквивалентная 1мл 0,05 М раствора тиосульфата натрия;

v₀ – общий объем пробы, мл;

v₁ – объем исследуемого раствора, взятого для анализа, мл.