1. Рецепт для самостоятельной краски гистопрепаратов.

1. Этап: Депапарафинирование срезов:

1. Ксилол –1 (бензол, толуол) - 2 мин - 4 мин

2. Ксилол-2 - 2 мин - 4 мин

3. Спирт- 1 (АБС) -2 мин - 3 мин

4. Спирт 96% - 2 мин - 3 мин

5. Вода дистиллированная - 2 мин - 5 мин.

2. Этап: Окраска гистосрезов по методу гематоксилин Майера - эозин

1. Гематокеилин Майера - 2 мин

2. Вода водопроводная -2 мин до 5 мин

3. Эозин - 2 мин

4. Вода дистиллированная. - 1 мин (сполоснуть)

5. Спирт 96° - 1 мин

6. Спирт .96° - 2 мин

7. Ксилол-1 - 2 мин

8. Ксилол –2 -2 мин

9. Заключить срез в бальзам.

Методические указания к самостоятельной работе на занятии. Задания и ориентировочные основы действий.

1. Изучить и зарисовать различные по строению клетки и неклеточные структуры по следующим препаратам.

2. Закрепить правила работы с микроскопом и освоить алгоритм чтения препарата.

Препарат № 65.

Кубический эпителий канальцев почки.

Окраска: гематоксилин-эозин

На малом увеличении определить поперечные срезы канальцев почки. Стенки канальцев образованы одним слоем клеток, плотно прилегающих друг к другу. Обратить внимание на соединительную ткань, расположенную между канальцами. Соединительная ткань состоит не только из клеток, но и межклеточного вещества. Межклеточное вещество образовано волокнами и основным - аморфным веществом.

На большом увеличении в центр поля зрения поставьте поперечный срез канальца.

Изучите строение его стенки. Исходя из принципов окраски структур и свойств красителей, цвета окрашенных структурных элементов опишите строение клеток, межклеточного вещества и определите их химический состав. Границы клеток эпителия на данном увеличении просматриваются слабо. Ядра клеток, выстилающих стенки канальцев, окрашены в фиолетовый цвет, значит они окрашены гематоксилином. Ядра имеют округлую форму. Помня закон, что форма ядра повторяет форму клеток, делаем вывод, что круглые ядра могут быть лишь у сферических - круглых клеток или кубических. Таким образом, стенка канальца выстлана одним слоем кубических клеток

Цитоплазма, оболочки клеток, основное вещество и волокна межклеточного ве­щества соединительной ткани окрашены эозином в различные тона красного цвета, что отражает особенности их строения и химического состава. Эозинофилия указывает на то, что химический состав отмеченных структур - белки.

Ядра клеток в соединительной ткани имеют различную форму: округлую, вытянутую, значит и формы клеток, соответственно этому, имеют круглую, овальную, веретенчатую формы.

Изучив все структуры микропрепарата, оформите полусхематичный рисунок. Используйте цветные карандаши, отражающие принцип окраски структурных элементов гистопрепарата.

Обозначить:

1.поперечный срез канальца. 2. кубический эпителий.2а)ядра клеток.3.соединительная ткань.

3а) клетки.3б) межклеточное вещество. 4. сосуд.

Препарат № 96. Межклеточное вещество на примере эластического хряща ушной раковины котенка.

Окраска: гематоксилин-орсеин-пикроиндиго.

При малом увеличении в центре среза определить эластическую хрящевую ткань. Снаружи хрящ как орган покрыт надхрящницей, которая окрашена более светло.

При большом увеличении изучить собственно хрящ. В центре среза хряща располагаются группы клеток (изогенные группы). Обратите внимание, что их форма чаще овальная и состоят они из 2- 3 клеток- хондроцитов. Между изогенными группами расположено межклеточное вещество – хондромукоид, в котором просматриваются волокна в виде тонких переплетающихся нитей. Это эластические волокна, окрашенные орсеином в бурый, или темно вишневый цвет. Обратите внимание,что волокна сгущаются вокруг изогенных групп, маскируя их. К периферии хряща волокна истончаются и переходят в надхрящницу. Эластические волокна замурованы в основное вещество. Оно окрашено оксифильно, а вокруг изогенных групп - базофильно. Это свидетельствует о его различном химическом составе в зависимости от расположения, а так же от возраста хряща.

Определить:Собственно хрящ.1. изогенные группы.3. хондромукоид.3 а) эластические волокна. 3 б) основное вещество.