Практика
туберкулинезация Благополучие хозяйств по туберкулезу контролируется ежегодным проведением во всех хозяйствах и населенных пунктах клинических осмотров и плановых поголовных туберкулинизаций животных:
коров и быков-производителей – два раза в год, молодняка (начиная с 2-х месячного возраста) и скота на откорме – один раз в год;
лошадей, мулов, ослов, овец и коз – в зависимости от эпизоотической обстановки;
всех взрослых свиноматок и молодняка после отъема во всех племхозяйствах – один раз в год, а на остальных свинофермах - в зависимости от эпизоотической обстановки;
взрослых птиц исходных линий и прародительских стад на племзаводах и селекционно-племенных птицеводческих станциях – один раз в год;
животных, принадлежащих гражданам исследуют на туберкулез одновременно с проведением туберкулинизаций на фермах.
Основным методом прижизненной диагностики туберкулеза является аллергическое исследование. Туберкулинизацию проводят ежегодно во всех хозяйствах.
Для исследования применяют туберкулин – стерильный фильтрат убитых культур возбудителя туберкулеза. В России используют следующие виды аллергенов:
-сухой очищенный туберкулин ППД (протеин пурифиед дериват) для млекопитающих, применяется для туберкулинизации млекопитающих;
-сухой очищенный туберкулин ППД для птиц, применяется для исследования птиц и свиней;
-комплексный аллерген из атипичных микобактерий (КАМ).
Используют внутрикожный, глазной, внутривенный и пальпебральный методы туберкулинизации.
При внутрикожном методе туберкулин вводят:
крупному рогатому скоту, буйволам, оленям, маралам, антилопам – в области средней трети шеи;
быкам, слонам, носорогам, бегемотам – в подхвостовую складку;
верблюдам – в кожу брюшной стенки или области паха на уровне горизонтальной линии седалищного бугра;
свиньям – в области наружной поверхности уха (с одной стороны туберкулин для млекопитающих, с другой стороны туберкулин для птиц), поросятам в возрасте 2 – 3 мес. – в кожу поясничной области, отступя от позвоночника на 5 – 8 см, используя только безыгольный инъектор;
овцам и козам – в нижнее веко, отступя от края 1,5 – 2 см;
собакам и представителям хищных – в области бесшерстной внутренней поверхности бедра или локтевой складки;
обезьянам, сумчатым, пушным зверям – интрапальпебрально в верхнее веко;
кошкам – в области внутренней поверхности уха;
курам – в бородку; индейкам, гусям и уткам – в подчелюстную складку;
фазанам, павлинам, попугаям, голубям, журавлям, цаплям, аистам, фламинго – в области наружной поверхности голени, отступив от сустава на 1 - 2 см.
Шерсть в месте введения туберкулина выстригают, перья выщипывают, кожу обрабатывают 70%-ным спиртом.
Туберкулин вводят в дозе 0,2 мл всем животным независимо от вида и возраста, а кошкам, обезьянам, птице и пушным зверям – в дозе 0,1 мл; взрослым верблюдам – 0,3 мл.
Учет и оценку реакции на первое внутрикожное введение проводят у крупного рогатого скота, буйволов, верблюдов, слонов, носорогов, бегемотов, оленей и обезьян через 72 часа; у коз, овец, свиней, собак, кошек и пушных зверей через 48 часов; у птиц через 30 – 36 часов.
Реакция признается положительной, если в месте введения туберкулина:
-у крупного рогатого скота, буйволов, верблюдов, антилоп и оленей имеется утолщение кожной складки на 3 мм и более независимо от характера припухлости (отечности, болезненности, повышение местной температуры);
-у быков, свиней, собак, кошек, и птиц образуется ощутимая припухлость; обезьян, овец, коз и пушных зверей – при видимом различии правого и левого века.
В неблагополучных по туберкулезу хозяйствах и при сомнительных случаях проводят повторное введение туберкулина в то же место и в той же дозе сразу после читки реакции на его первое введение. Реакцию учитывают через 24 часа после второго введения.
В неблагополучных хозяйствах животных реагирующих на внутрикожную пробу считают больными туберкулезом. В благополучных хозяйствах их считают подозреваемыми в заражении возбудителем туберкулеза и с ними проводят комплекс дополнительных исследований для подтверждения или исключения диагноза.
Глазную туберкулиновую пробу применяют для диагностики туберкулеза у лошадей. У крупного рогатого скота применяют одновременно с внутрикожной пробой для дополнительного выявления больных в неблагополучных хозяйствах.
Туберкулинизацию глазным методом проводят двукратно с интервалом в 5 – 6 суток. Туберкулин в количестве 3 – 5 капель наносят пипеткой на слизистую оболочку нижнего века или на поверхность роговицы. Учет реакции проводят после первого введения туберкулина через 6, 9, 12 и 24 часа, после второго – через 3, 6, 9 и 12 часов. Реакция признается положительной, если возникает выделение из внутреннего угла глаза слизисто-гнойного или гнойного секрета, сопровождающая гиперемией и отеком конъюнктивы.
Внутривенную туберкулиновую пробу применяют с целью отбора животных для диагностического убоя. Туберкулин вводят после проведения внутрикожной пробы только взрослым животным, за исключением коров в течение одного месяца до и после отела. Перед введением туберкулина у животных измеряют температуру. Она должна быть не выше 39,50С. Животному вводят туберкулин в яремную вену в дозе 1 мл 50% раствора туберкулина на 100 кг массы тела. Учет реакции ведут измерением температуры тела через 3, 6 и 9 часов. Реагирующим считается при повышении температуры тела на один и более градусов выше 39,50С.
Симультанную аллергическую пробу применяют для диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота и свиней при дифференциации парааллергических реакций к птичьим и атипичным микобактериям. Для этого используют одновременные введения животным 2 аллергенов: ППД-туберкулина для млекопитающих в стандартном растворе и ППД-туберкулина для птиц или комплексного аллергена из атипичных микобактерий (КАМ) и определения достоверности различия в интенсивности (степени проявления) реакций на эти аллергены. Проведение симультанной пробы допускается не раннее, чем через 30 дней после последней туберкулинизации животных. Туберкулины вводят внутрикожно в симметричные участки тела животных (шеи, уха и т.д.) в дозе 0,2 мл. Учет и оценку реакций проводят у крупного рогатого скота через 72 часа, у свиней – через 48 часов по общепринятым методом учета туберкулинизации. По интенсивности реакций оценивают результаты исследований групповым методом.
Пальпебральный метод туберкулинизации крупного рогатого скота применяют одновременно с внутрикожной туберкулиновой пробой для дифференциации специфических и параспецифических реакций при первичной постановке диагноза. Учет и оценку реакции проводят через 72 часа после введения препарата. Реакция считается положительной если на месте введения препарата образуется ощутимая припухлость.
Примерный план по оздоровлению хозяйства.
В каждом конкретном случае оздоровительные мероприятия должны строиться с учетом категории эпизоотического очага (свежие, затухающие, стационарные, природные) и выделения ведущего звена эпизоотического процесса.
При большинства инфекционных болезнях с целью исключения распространения болезни за пределы неблагополучного пункта проводят карантинные и ограничительные мероприятия.
Карантин - это система мероприятий, направленная на полное разобщение неблагополучных по инфекционной болезни групп животных и территории их размещения с благополучными хозяйствами и территориями с целью ликвидации и исключения ее распространения за пределы возникшего эпизоотического очага.
По условиям карантина запрещается ввод в неблагополучный пункт и вывод из него восприимчивых животных, выпас скота, вывоз продуктов и сырья животного происхождения, фуража и другой продукции растениеводства, проезд через территорию неблагополучного пункта, проведение выставок, ярмарок, базаров в карантинной и близлежащей зонах. При некоторых эпизоотиях прекращают все связи с другими хозяйствами, устанавливают шлагбаумы, организуют охранно-карантинные посты, оборудуют дезобарьеры и перевалочные пункты.
Карантин накладывают при появлении следующих особо опасных инфекционных болезней, имеющих тенденцию к эпизоотическому распространению (ящур, чума свиней, сибирская язва, оспа овец, верблюдов, птиц, болезнь Ньюкасла, болезнь Ауески, эмкар, контагиозная плевропневмония и чума крупного рогатого скота, африканская чума свиней, сап лошадей). Карантинируют отдельные дворы, фермы, населенные пункты, хозяйства, район, область.
Ограничительные мероприятия – это менее высокая степень разобщения, чем карантин. Их проводят в эпизоотическом очаге, населенном пункте, хозяйстве при инфекционных болезнях, не имеющих тенденцию к широкому распространению (бруцеллез, туберкулез, лептоспироз, листериоз, пастереллез, некробактериоз, оспа коров, лошадей, свиней, трихофития, паратуберкулез, кампилобактериоз, лейкоз крупного рогатого скота, инфекционный ринотрахеит, вирусная диарея крупного рогатого скота, брадзот овец, рожа свиней, дизентерия, инфекционный атрофический ринит свиней, мыт лошадей, микоплазмоз птиц, болезнь Марека). При многих особо опасных болезнях после снятия карантина на длительный срок вводят ограничения в части использования продуктов животного происхождения, кормов, навоза, пастбищ, водоисточников и т.д.
При введении карантина и ограничений применяют изоляцию больных и подозрительных по заболеванию животных от здоровых. Их содержат в изоляторе, расположенном на расстоянии не менее 100 м от животноводческих помещений. Он должен быть огорожен, иметь боксы, денники для содержания животных, комнаты для лечебных процедур, хранение фуража и инвентаря.
Сроки карантинирования или ограничений обусловливаются длительностью инкубационного периода и микробоносительства после переболевания животных. Карантин и ограничения снимают после полного выздоровления животных, проведения необходимых заключительных ветеринарно-санитарных мероприятий.
М е т о д Фюллеборна характеризуется простотой .выполнения и высокой эффективностью при большинстве нематодозов и цестодозов животных, поэтому он занимает первое место среди других гельминтокопрологических методов диагностики.
В стеклянный, полистероловый или пластмассовый стаканчик емкостью 50—100 мл помещают 3—5 г фекалий и при помешивании стеклянной палочкой постелен» но добавляют насыщенный раствор поваренной соли (хлорида натрия) из расчета на одну часть фекалий 15—20 частей флотационной жидкости. Плотные фекалии овец предварительно можно растереть с небольшим количеством раствора соли в фарфоровой ступке, после чего суспензию переливают в стаканчик, добавив' необходимое количество раствора хлорида натрия. Всплывшие крупные частицы сразу удаляют палочкой, а взвесь фекалий целесообразно профильтровать в другой стакан-
Шк. через сито (иногда употребляют молочные ситечки). После отстаивания заряженной пробы в течение 45— 60 минут металлической петлей снимают три капли поверхностной пленки, помещают их на предметное стекло и микроскопируют без покровного стекла. После каждой пробы петли промывают в стакане с водой (вместо рекомендуемых в некоторых руководствах прожиганий их на спиртовке).
Метода Бермана: пробу фекалий завёртывают [завертывают] в марлевую салфетку, кладут в стаканчик и заливают водой; через 6—8 ч пробу вынимают, а жидкость отстаивают 15 мин. Сливают надосадочную жидкость, остаток жидкости отстаивается 5—10 мин. После этого стаканчик медленно наклоняют и пипеткой отсасывают верхний слой воды; осадок на дне забирают в пипетку и каплями наносят на предметное стекло и микроскопируют.
Метод последовательных смывов При проведения этого метода собирают свежие порции фекалий от животных, их кладут в сосуд, заливают водой в соотношении 1:5 и 1:10, тщательно перемешивают. Взвесь оставляют на 5 мин. для осаждения. Затем верхний слой сливают до осадка, после чего снова заливают водой и повторяют эти операции до тех пор, пока жидкость над осадком не будет прозрачной. После надосадочную жидкость сливают последний раз, а осадок помещают в кювет или чашку Петри для исследования под лупой. Так как одни гельминты хорошо видны на белом фоне, а другие на черном, то для более полной выборки гельминтов чашку Петри ставят то на белую, то на черную бумагу. Гельминты выбирают препаровальной иглой или кисточкой, а затем микроскопируют для установления вида, при этом пользуются ручной, а также штативной лупой или стереоскопическим микроскопом.
Лабораторная диагностика нозематоза пчел. Поступивший в лабораторию материал исследуют групповым методом или каждую пчелу отдельно. У пчелы берут брюшко, помещают в 1 мл воды и тщательно готовят суспензию. Каплю суспензии микроскопируют (X 400—600) в слегка затененном поле. Исследуют не менее 20 полей зрения микроскопа. При положительных результатах находят овальные споры нозе-мы. Степень поражения оценивают по 3 или 4-балльной системе: + единичные споры ноземы (менее 10),
+ + —10—100 (в каждом поле видны не соприкасающиеся споры),
+ + + —10—1000 (очень много соприкасающихся спор),
+ + + + - свыше 1000.
Для определения количества спор используют также метод подсчета их в гемоцитометре (камера Горяева). При индивидуальном исследовании пчел для получения суспензии используют многокамерные гомогенизаторы и многоштыревые пружинные капельницы. Оценку поражения проводят так же, как указано выше. Определение количества спор в каждой пробе позволяет более точно судить о состоянии поражения пчел в семье и прогнозировать исход болезни. При слабом поражении пчел полученные гомогенаты центрифугируют при 1500 об/мин в течение 15 мин и исследуют средний (белого цвета) слой осадка. Для выявления носительства спор ноземы следует выдержать 7—10 дней группу пчел в садках, а затем исследовать их кишечник.
Трихинеллоскопия мяса животных, которые могут явиться источником заражения человека трихинеллезом, должно проводиться в обязательном порядке перед употреблением его в пищу. Обнаружить личинки можно при исследовании мяса методом переваривания в искусственном желудочном соке или методом компрессии с последующей стереоскопической микроскопией (трихинеллоскопией) сдавленных между предметными стеклами тонких срезов мышечных волокон.