- •Кафедра разведения
- •Опд.Ф.0401 Генетика и селекция молекулярные и биохимические основы наследственности Методические указания
- •020200 Биология
- •Предисловие
- •Молекулярные основы наследственности
- •Биосинтез белка - реализация наследственной информации (экспрессия генов)
- •Молекулярные основы наследственности с примерами решения типовых задач
- •Задачи по молекулярной биологии
- •Библиографический список
Молекулярные основы наследственности с примерами решения типовых задач
Задача 1
На репликацию ДНК (удвоение, редупликацию)
Одна из цепочек ДНК имеет следующую последовательность нуклеотидов:
ГГТ ААА ТЦГ ГАГ ТАТ ГГТ АЦГ. Определите последовательность второй цепочки той же молекулы ДНК. Если известна последовательность нуклеотидов в первой цепочке, то для второй цепочки необходимо по принципу комплементарности заменить тимин на аденин, аденин на тимин, гуанин на цитозин, цитозин на гуанин.
Решение:
Первая цепочка ДНК: Г Г Т А А А Т Ц Г Г А Г Т А Т Г Г Т А Ц Г
ﺍﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍﺍ
Вторая цепочка ДНК: Ц Ц А Т Т Т А Г Ц Ц Т Ц А Т А Ц Ц А Т Г Ц
после удвоения
Ответ: последовательность нуклеотидов второй цепи молекулы ДНК ЦЦА ТТТ АГЦ ЦТЦ АТА ЦЦА ТГЦ.
Задача 2
На определение строения м-РНК по структуре ДНК
Определите м-РНК, если фрагмент смысловой (кодогенной) цепи ДНК имеет следующую последовательность нуклеотидов: ЦТЦ ЦАТ ГАТ ААЦ ЦТГ, Поскольку транскрипция происходит по принципу комплементарности межмолекулярных взаимодействий нуклеотидов, образующих пары А-У, Г-Ц, следовательно м-РНК на данном участке будет иметь следующий вид:
Цепочка ДНК: ЦТЦ ЦАТ ГАТ ААЦ ЦТГ
Цепочка м-РНК: ГАГ ГУА ЦУА УУГ ГАЦ
В РНК, как отмечено выше, вместо азотистого основания тимина входит урацил.
Ответ: м-РНК ГАГ ГУА ЦУА УУГ ГАЦ.
Задача 3
На определение строения молекулы белка по структуре молекулы ДНК
Фрагмент смысловой молекулы ДНК состоит из нуклеотидов, расположенных в следующей последовательности: ТАЦ ААЦ ТГА ЦГЦ ТТТ АГА ЦТТ ЦАГ ЦЦЦ.
Определите состав и последовательность аминокислот в полипептидной
цепи, закодированной в этом участке гена.
Решение: В начале определяем строение м-РНК, исходя из принципа комплементарности А-У и Г-Ц, и помня, что в РНК вместо тимина азотистое основание урацил.
Цепочка ДНК: ТАЦ ААЦ ТГА ЦГЦ ТТТ АГА ЦТТ ЦАГ ЦЦЦ
Цепочка м-РНК: АУГ УУГ АЦУ ГЦГ ААА УЦУ ГАА ГУЦ ГГГ. По таблице генетического кода находим аминокислоты, которые закодированы в данной м-РНК, всего 9 триплетов:
1) кодону (триплету) АУГ соответствует аминокислота - метионин,
2) УУГ - лейцин,
3) АЦУ - треонин,
4) ГЦГ-аланин,
5) ААА - лизин,
6) УЦУ-серии,
7) ГАА - глутаминовая кислота,
8) ГУЦ-валин,
9) ГГГ - глицин.
Ответ: последовательность аминокислот в полипептидной цепи метионин-лейцин-треонин-аланин-лизин-серин-глютаминовая кислота-валин-глицин.
Задача 4
На определение структуры ДНК но строению молекулы белка.
Фрагмент молекулы белка миоглобина содержит аминокислоты, расположенные в следующем порядке: валин - аланин - глютаминовая кислота - тирозин - серин - глютамин.
Напишите структуру участка молекулы ДНК, кодирующего эту последовательность аминокислот?
Решение: 1. По таблице генетического кода находим триплеты, кодирующие каждую из указанных аминокислот: валин - ГУУ, аланин - ГЦУ, глютаминовая кислота - ГАА, тирозин - УАУ, серии - УЦУ, глютамин - ЦАА.
Полученная цепочка отражает строение молекулы м-РНК: ГУУ ГЦУ ГАА УАУ УЦА ЦАА.
2. После этого определяем строение цепочки ДНК, которая кодировала строение м-РНК.
Цепочка м-РНК: ГУУ ГЦУ ГАА УАУ УЦА ЦАА.
Ответ:
Кодогенная смысловая цепочка ДНК: ЦАА ЦГА ЦТТ АТА АГА ГТТ
ﺍﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍﺍ ﺍﺍ ﺍﺍ
Вторая цепочка ДНК: ГТТ ГЦТ ГАА ТАТ ТЦТ ЦАА.
Вторая цепочка ДНК достраивается по принципу комплементарности.
Задача 5
На определение антикодонов т-РНК по молекуле м-РНК.
Транспортная РНК доставляет аминокислоты к полирибосомам, как было отмечено выше. Вначале аминокислота активируется АТФ, затем с помощью фермента амино-ацил т-РНК - синтетазы присоединяется к участку т-РНК, образуя комплекс аминоациладенилат т-РНК - синтеза. На противоположном конце от места прикрепления активированной на т-РНК аминокислоты находится антикодон, который может взаимодействовать с комплементарным кодоном на молекуле м-РНК и передавать соответствующую аминокислоту для синтеза белка. Таким образом, антикодоны т-РНК осуществляют процесс трансляции: считывание информации с м-РНК на последовательность аминокислот в белковой молекуле.
Условие задачи: м-РНК имеет следующую последовательность кодонов:
1) АУГ 2) ЦЦЦ, 3) ГГЦ, 4) ААА, 5) УУУ, 6) ГГГ, 7) УГА. Определите последовательность к ним антикодонов т-РНК?
Решение: Поскольку считывание информации идет по принципу комплементарности, следовательно антикодоны т-РНК, доставляющие соответствующие аминокислоты, будут иметь следующий состав нуклеотидов: I) УАЦ, 2) ГГГ, 3) ЦЦГ, 4) УУУ, 5) ААА, 6) ЦЦЦ. Кодон УГА входит в нонсенс - кодоны - терминаторы (УАА, УАГ, УГА - три триплета) к ним нет т-РНК, и на этих кодонах заканчивается биосинтез белка, следовательно к этому триплету не будет и антикодона т-РНК.
Ответ: антикодоны т-РНК: 1) УАЦ, 2) ГГГ, 3) ЦЦГ, 4) УУУ, 5) ААА, 6) ЦЦЦ.
Задача 6
Определение структуры молекулы белка по мутантной моле-куле ДНК
Определите аминокислоты, входящие в молекулу белка, если она кодируется следующей последовательностью кодонов в фрагменте кодогенной цепи ДНК: ТАЦ АЦА АЦГ ЦАА АТА ТАЦ АЦА ГЦГ. Как изменится ответ, если, удалить четвертый, девятый, тринадцатый нуклеотиды?
Решение: 1. Вначале строим молекулу м-РНК (транскрипция). Цепочка ДНК: ТАЦ АЦА АЦГ ЦАА АТА ТАЦ АЦА ГЦГ
Цепочка м-РНК: АУГ УГУ УГЦ ГУУ УАУ АУГ УГУ ЦГЦ
2. Определяем по таблице генетического кода аминокислоты, соответствующие данным кодонам:
1) АУГ - метионин,
2) УГУ-цистеин,
3) УГЦ - цистеин,
4) ГУУ-валин,
5) УАУ-тирозин,
6) АУГ - метионин,
7) УГУ - цистеин,
8) ЦГЦ-аргинин.
Поскольку дано 8 кодонов фрагмента цепи ДНК, постольку в данный участок белка входит 8 аминокислот.
3. Строим смысловую цепь ДНК после утраты трех нуклеотидов. Измененный кодогенный фрагмент цепочки ДНК: ТАЦ ЦАА ЦЦА АТА ТАЦ АЦА ГЦГ
Измененный фрагмент цепочки м-РНК: АУГ ГУУ ГГУ УАУ АУГ УГУ ЦГЦ
Ответ: аминокислоты, соответствующие данным кодонам;
1) АУГ-метионин,
2) ГУУ-валин,
3) ГГУ-глицин,
4) УАУ-тирозин,
5) АУГ-метионин
6) УГУ-цистеин,
7) УГЦ-аргинин.
Утрата 3-х нуклеотидов привела к перегруппировке кодовых триплетов, изменению информации в фрагменте молекулы белка, который включает уже не восемь, а только семь аминокислот, не стало двух аминокислот цистеина во 2-ом и 3-ем положениях, валин вместо четвертого положения встал на второе; в 3 третьем положении новая аминокислота - глицин, тирозин с пятого положения сместился на четвертое, последние три аминокислоты остались незатронутыми. Если бы было выпадение трех, рядом стоящих, нуклеотидов, то структура белка изменилась бы меньше.
Утрата первого нуклеотида привела бы к сдвигу считывания рамки информации, что повлекло к замене всех аминокислот в данном фрагменте белка.
Задача 7
На определение молекулярного веса белка и молекулярного веса и длины кодирующего его гена
Белок содержит 177 аминокислот. Какую длину и вес имеет определяющий его ген, а также какой вес имеет данный белок, учитывая, что средний молекулярный вес аминокислоты около 110, нуклеотида около 330, расстояние между двумя соседними нуклеотидами в молекуле ДНК 0,34 нм.
Решение: Исходный белок включает 177 аминокислот, вес одной аминокислоты около 110, следовательно молекулярный вес белка 177х110=19470.
Каждая аминокислота кодируется триплетом нуклеотидов, следовательно в гене содержится 177х3=531 нуклеотид. Молекулярный вес гена составляет 531х330=175.230; длина гена составляет 531х0,34 нм=180,54 нм.
Ответ: молекулярный вес белка 19470, молекулярный вес кодирующего его гена- 175230, длина гена 180,54 нм.
Задача 8
На определение состава нуклеиновых кислот
В молекуле ДНК на долю цитидиловых нуклеотидов приходится 30%. Определите процентное содержание других нуклеотидов, входящих в молекулу ДНК.
Решение: Используем правило Чаргаффа А=Т; Г=Ц. Отсюда следует, что гуаниловых нуклеотидов 30%, на долю А+Т приходится 100-(30+30)=40%. Адениловые и тимидиловые нуклеотиды в отдельности составляют 40:2=20%.
Ответ: В данную молекулу ДНК входит 30% гуаниловых, 20% адениловых и 20% тимидиловых нуклеотидов.
Задача 9
На определение состава нуклеиновых кислот
В молекуле ДНК обнаружено 600 тимидиловых нуклеотидов, составляющих 15% от общего количества нуклеотидов в этой молекуле ДНК. Сколько в ней содержится адениловых, гуаниловых, цитидиловых нуклеотидов.
Решение: по правилу Чаргаффа А =Т; Г =Ц 600, следовательно А= 600 нуклеотидов, или 15%. (А+Т)=600+600=1200 нуклеотидов или 30% . (Г+Ц)=100-30=70%, составляем пропорцию:
30% - 1200 нуклеотидов
70%- х нуклеотидов
нуклеотидов,
значит (Г+Ц)=2800 нуклеотидов, поскольку Г=Ц, следовательно
Г=1400 нуклеотидов,
Ответ: в молекуле ДНК содержится 600 адениловых, 1400 гуаниловых и
1400 цитидиловых нуклеотидов.
Таблица генетического кода
Кодоны матричной РНК |
|||||
Первое снование
|
Второе основание
|
Третье основание
|
|||
У
|
Ц
|
А
|
Г
|
||
У |
УУУ Фен |
УЦУ Сер |
УАУ Тир |
УГУ Цис |
У |
УУЦ Фен |
УЦЦ Сер |
УАЦ Тир |
УГЦ Цис |
Ц |
|
УУА Лей |
УЦА Сер |
УАА Стоп |
УГА Стоп |
А |
|
УУГ Лей
|
УЦГ Сер |
УАГ Стоп |
УГГ Три |
Г |
|
Ц |
ЦУУ Лей |
ЦЦУ Про |
ЦАУ Гис |
ЦГУ Арг |
У |
ЦУЦ Лей |
ЦЦЦ Про |
ЦАЦ Гис |
ЦГЦ Арг |
Ц |
|
ЦУА Лей |
ЦЦА Про |
ЦАА Глн |
ЦГА Арг |
А |
|
ЦУГ Лей |
ЦЦГ Про |
ЦАГ Глн |
ЦГГ Арг |
Г |
|
А |
АУУ Иле |
АЦУ Тре |
ААУ Асн |
АГУ Сер |
У |
АУЦ Иле |
АЦЦ Тре |
ААЦ Асн |
АГЦ Сер |
Ц |
|
АУА Иле |
АЦА Тре |
ААА Лиз |
АГА Арг |
А |
|
АУГ Мет |
АЦГ Тре |
ААГ Лиз |
АГГ Арг |
Г |
|
Г |
ГУУ Вал |
ГЦУ Ала |
ГАУАсп |
ГГУ Гли |
У |
ГУЦ Вал |
ГЦЦ Ала |
ГАЦ Асп |
ГГЦ Гли |
Ц |
|
ГУА Вал |
ГЦА Ала |
ГАА Глу |
ГГА Гли |
А |
|
ГУГ Вап |
ГЦГ Ала |
ГАГ Глу |
ГГГ Гли |
Г |