6. Отбор проб животного происхождения

В отличие от проб природных объектов к отбору проб животного происхождения (их еще часто называют «биологическими»), в которых предполагается наличие следовых количеств 3В, предъявляют особые, дополнительные требования. Важно, чтобы проба была репрезентативной для всего исследуемого организма (человека или животного). В частности, в пробах крови, взятых из различных органов, часто обнаруживаются существенные различия [16]. По этой причине необходимо особенно точно указывать условия отбора проб, в том числе и место отбора в организме. Следует также учитывать и особенности биологии исследуемых видов, стадию их развития и степень контактов с природной средой.

Пробы тканеймогут отбираться отдельно для каждой из особей, как это рекомендуется при обследовании крупных животных и человека, либо усредняться в единый образец, что нередко делают, например, при отборе проб и анализе крови новорожденных на содержание диоксинов. На анализе усредненных образцов тканей птиц одного вида основан, в частности, мониторинг загрязнения природной среды хлорорганическими соединениями в США. Каждый образец включает 10 тушек скворцов, добываемых в 139 местах 48 штатов страны [17].

С целью сохранения тканей в условиях, гарантирующих постоянство состава в отношении определяемых компонентов, пробу обычно сразу же замораживают и сохраняют до анализа при низких температурах (до -180°С). Применяют и другие методы фиксации биологического материала, например, в формалине. Иногда ткани перед замораживанием гомогенизируют. Замороженные образцы хорошо сохраняются длительный период и могут находиться в таком состоянии многие годы.

Методики отбора проб животного происхождения в качестве «видов-индикаторов» для оценки загрязнения природных сред рекомендуют следующие: хищные млекопитающие - волк, лисица, песец, соболь; рыбы -щука, окунь; двустворчатые моллюски - перловицы, беззубки. В случае обнаружения в них опасных концентраций 3В отбирают пробы тканей и других животных, в том числе массовых охотничьих видов (зайцев, оленей, кабанов и др.) [6].

Обычно отбор проб млекопитающих производится в зимний период. От свежей туши крупного животного (волк, лисица и др.) отрезают кусок мышечной ткани (100 г) и жира (50 г), а от небольшого хищника (соболя, куницы и др.) - нижнюю половину туши без хвоста. Еще более мелкие особи (до 300 г) берутся в пробу целиком. В один сезон достаточно отобрать биологический материал от 5-7 особей одного вида. Образцы хранятся в замороженном состоянии до анализа.

Моллюсков собирают из расположенных в обследуемом районе водоемов: водохранилищ, прудов, озер, рек, ручьев (желательно по одной пробе из каждого водоема). Каждая проба должна содержать особи одного вида: по 5-8 экземпляров половозрелых животных (40-80 мм) с общим весом без раковин не менее 50 г. Отобранных моллюсков помещают на фильтровальную бумагу и после удаления раковин заворачивают в фольгу или кальку (недопустимо использование полиэтиленовых пакетов). Пробы также хранятся до анализа замороженными. Раковины собирают и анализируют отдельно. Если обследуется один водоем, то пробы отбирают с пяти створов, расположенных в разных местах этого водоема.

Для отбора проб тканей рыб их вылавливают в летний период. Отбирают пять экземпляров взрослых половозрелых щук или окуней (если этих видов нет, то других хищников, обитающих в исследуемом водоеме). Для определения возраста измеряется длина рыбы и снимается чешуя, которую упаковывают отдельно. Отбираются пробы мышц с боков и хвоста рыбы, а также икра или молоки. Навеску пробы (около 100 г) заворачивают в фольгу или кальку и помещают в стеклянную банку. Образцы хранятся и транспортируются в замороженном состоянии. Иногда для контроля за содержанием 3В в воде в местах сброса сточных вод вылавливают придонных рыб (карп, лещ). В этом случае желательно в тех же местах отобрать для обследования и моллюсков. Мелкую рыбу рекомендуется отбирать целыми тушками (у крупных берут лишь среднюю часть).

Особого внимания требуют процедуры отбора крови. Образцы следует отбирать в емкости из химически стойкого стекла с соблюдением необходимых мер предосторожности. Для предотвращения загрязнения тканевой жидкостью и гемолиза существенно, чтобы отбирались пробы только свободно вытекающей крови. На состав образца влияет и положение человека (или другого крупного животного) в ходе отбора пробы. В положении «лежа» внеклеточная жидкость устремляется в кровеносные сосуды, разбавляя тем самым белки плазмы крови [18]. При этом изменения концентрации определяемых компонентов могут достигать 20% и давать ошибочные результаты анализа. В большинстве случаев рекомендуется хранить пробы при +4°С (для летучих соединений при -20°С). При необходимости хранения проб длительное время возникает проблема их стабильности вследствие процессов коагуляции. Поскольку негомогенность, вызываемая коагуляцией, может быть серьезным источником ошибок, то к пробе крови следует немедленно после отбора добавить определенное количество антикоагулянта. Естественно, что последний не должен содержать 3В. Надежным способом получения правильных результатов является применение лиофильной сушки образцов.

Отбор замороженного или охлажденного мяса производят из однородной партии [19]. Пробы мяса (без жира) от туш берут кусками массой не менее 200 г в области шейных позвонков, лопатки, бедра, мышц спины. Общая масса пробы 1-2 кг. В таком же количестве отбирают и образцы исследуемых субпродуктов. Каждый образец упаковывают в пергамент или фольгу и хранят до анализа в замороженном состоянии При отборе проб мяса птицы из каждой партии отбирают по три тушки. Аналогично отбирают и мясо кроликов. При необходимости пробы помещают в холодильник и замораживают.

Пробы молока берут после тщательного перемешивания, добиваясь полной однородности и не допуская сильного вспенивания. Из серии точечных проб составляют объединенную - объемом около 1 л. Посуда, в которую помещают пробы молока, должна быть химически стойкой и закрываться крышкой. До начала анализа пробы следует хранить при температуре от +2 до +8°С. При длительном хранении молоко замораживают.