1. Извлечение суммы алкалоидов из сырья.

Алкалоиды извлекают в виде солей или в виде оснований.

Алкалоиды-соли - В этом случае сырье обрабатывают слабыми растворами органических или минеральных кислот, соли которых хорошо растворимы в воде или спирте. Используют винную, лимонную, уксусную, серную, соляную и другие кислоты.

В извлечение попадают углеводы, белки и другие сопутствующие вещества.

Алкалоиды-основания – В этом случае сырье смачивают концентрированным раствором аммиака. Едкие щелочи не используют, т.к. они образуют феноляты, вызывают гидролиз, изомеризацию алкалоидов.

Раствор аммиака вытесняет алкалоиды-основания из солей.

Алкалоиды-основания извлекают органическим растворителем (эфиром, хлороформом, бензолом и др.). В извлечение попадают воски, каротиноиды, фенольные соединения.

Извлечение проводят многократно новыми порциями до полного истощения. Полученные порции объединяют.

2. Очистка извлечения от балластных веществ.

Обычно проводят путем двух- или трехкратной сменой растворителя. Реже используют ионообменную или адсорбционную хроматографию.

3. Разделение суммы алкалоидов и выделение индивидуальных алкалоидов.

Выполняют в тех случаях, когда оценку качества сырья проводят не по сумме алкалоидов, а по содержанию индивидуального алкалоида, определяющего основное фармакологическое действие сырья.

Разделение основано на различных физико-химических свойствах

алкалоидов, извлеченных из сырья:

1. на способности перегоняться с водяным паром.

Например, пахикарпин из суммы алкалоидов травы софоры толстоплодной отделяют путем отгонки его с водяным паром;

2. на различной растворимости алкалоидов в органических растворителях.

Например, колхамин из суммы алкалоидов клубнелуковиц безвременника отделяют, используя его плохую растворимость в ацетоне;

3. на различной растворимости полученных комплексов с общеалкалоидными реактивами, т.е. используют реакции осаждения. Например, скополамин из суммы алкалоидов семян дурмана индейского отделяют в виде солей пикриновой кислоты (пикрата).

Для разделения используют также различные виды хроматографии.

4. Собственно количественное определение проводят различными методами:

1. Гравиметрический (весовой) метод.

Алкалоиды переводят в весовую форму, осадок отделяют, высушивают, взвешивают.

Этим методом определяют алкалоиды-основания клубнелуковиц безвременника,плауна-баранца; алкалоиды-соли травы крестовника плосколистного, семян дурмана индейского, листьев барбариса;

2) Титриметрические методы:

а) ацидиметрического прямого титрования (алкалоиды побегов анабазиса, травы софоры толстоплодной, семян чилибухи);

Ь) ацидиметрического обратного титрования (алкалоиды листьев и корней красавки, листьев белены, листьев дурмана обыкновенного, травы термопсиса ланцетного, корневищ с корнями чемерицы),

с) для определения алкалоидов чая используют йодометрический метод обратного титрования;

d) титрование в неводных средах:

- точку эквивалентности определяют, используя индикатор на алкалоиды (корневища кубышки, травы барвинка малого, клубней с корнями стефании гладкой);

- точку эквивалентности определяют потенциометрически (алкалоиды травы чистотела)