1. Теоретическая часть:

0. 1.1 Повторение теоретического материала по теме: «Водно-минеральный обмен. Обмен магния и его нарушения».

1. 1.2 Вводное слово преподавателя

У взрослого человека суточная потребность в магнии составляет 10 мг на 1 кг массы тела, общее содержание магния в организме взрослого 20-30 г, 1/3 часть которого сосредоточена в костя, зубах, 1/5 – в мышцах.

В виде фосфатов магний входит в состав костной ткани, где сосредоточено около 50% всего его количества.

Магний поступает в организм человека и животных с растительной пище, поскольку входит в состав порфириновой группы хлорофилла, мясными продуктами, содержащими фосфаты). Много его в бананах, апельсинах, шоколаде, миндале.

Магний необходим для действия многих ферментов, например, АТФазы мышц (расщепляет АТФ), дегидрогеназ α-кетокислот, в частности пируватде-гидрогеназы и α-кетоглутаратдегидрогеназы и др.

Ионы магния также необходимы для нормального функционирования большого комплекса ферментов, катализирующих процессы биосинтеза белков.

Основная масса (55-60%) магния содержится в крови в ионизированной форме, 14-50% (в среднем 30%) связано с белками, а 10-15% входит в состав комплексных соединений с липидами и нуклеотидами (в основном АТФ и АДФ).

Магний является внутриклеточным катионом. Концентрация его в клетках в 3-5 раз выше, чем во внеклеточной среде. Уровень ионов магния в цельной крови выше, т.к. эритроциты содержат приблизительно в 2 раза больше магния, чем плазма (в свзя с этим опасен гемолиз).

Магний входит в состав системы пропердина, которая состоит из белка пропердина, комплемента и солей магния и принимает участие в защите организма от многих инфекционных заболеваний. Магний способствует задержке фосфора в организме. Ионы магния вместе с ионами натрия, калия и кальция играют важную роль в поддержании структуры рибосом и митохондрий, что необходимо для нормальной функции этих клеточных органелл. Ионы магния принимают участие в репликации молекул ДНК.

Соли магния применяются для торможения нервной системы (в больших дозах можно вызвать даже наркоз), а также при гипертонической болезни, эпилепсии, атеросклерозе и как слабительное средства.

2. Указания к занятию. Методические рекомендации:

1. 2.1.Внимательно изучите инструкцию.

2. 2.2.Приготовьте всё необходимое оборудование, реактивы для проведения анализа.

3. 2.3.Соблюдайте меры предосторожности при работе с биологическим материалом, реактивами; на спектрофотометре

4. 2.4. Осмыслите ход выполнения лабораторной работы

5. 2.5 В работе используйте параллельные пробы с целью самоконтроля за качеством работы

6. 2.6 Соблюдайте дезрежим, используя 0,5% раствор «Полидеза»

3. Практическая часть:

3.1 Лабораторная работа №1. Определение содержания магния в сыворотке крови

Принцип: при взаимодействии ионов магния с молекулами ксилидилового синего образуется окрашенный комплекс, имеющий максимум поглощения при длине волны 540 нм

Оборудование и реактивы:

1. Спектрофотометр

2. Набор реактивов «Абрис+»

3. Пробирки, штатив, пипетки градуированные

4. Дезраствор 0,5% р-р «Полидеза»

5. Исследуемая жидкость – сыворотка крови (гемолиз недопустим)

Ход анализа:

Отмерить, мл	Опытная проба, мл	Калибровочная проба, мл	Контрольная проба, мл
Монореагент	2,0	2,0	2,0
Сыворотка крови	0,02	-	-
Калибратор	-	0,02	-
Бидистилированная вода	-	-	0,02

Смешать и инкубировать 10 мин при температуре 18-25 °С. По окончании инкубации измерить оптическую плотность пробы (Е пробы) и калибратора (Е калибр) против контроля при λ-540 (500-560) нм и d=1 см. Окраска стабильна в течении 60 мин.

Расчёт: сыворотка (плазма) крови:

С(Mg²⁺)=0,82* Е пробы/Е калибратора (ммоль/л)

Референтные пределы: сыворотка (плазма) крови – 0,66-1,07 ммоль/л