Лабораторна робота «Кольорові реакції на білки і амінокислоти»

Кольорові реакції дають можливість встановити білкову природу речовини і довести наявність деяких амінокислот в різних білках. Відомі універсальні кольорові реакції, які дають всі білки (біуретова). Специфічні реакції, які обумовлені наявністю тільки певних амінокислот (ксантопротеїнова, Фоля, Мілона та інші).

Виконати лабораторні досліди:

Дослід 1. Біуретова реакція.

1а. В суху пробірку беруть небагато (0,5г) сечовини і підігрівають на вогні. пробірку охолоджують і додають рівний об’єм 10% розчину NaOH, збовтують. Потім додають 1-2 краплі 1% розчину Cu2SO4 і знову перемішати. Спостерігати за кольором розчину.

1б. В пробірку наливають 1-2 мл розчину білка, додають 1-2 мл 10% розчину NaOH і 1-2 краплини 1% розчину CuSO4. Розчин перемішують. Спостерігають за кольором розчину, порівнюють його з кольором біурету.

Дослід 2. Ксантопротеїнова реакція.

2а. В одну пробірку налити 1 мл 1% розчину фенолу, додати 1 мл HNO3(1:1). Обережно нагріти.

2б. В другу пробірку налити 1 мл розчину білка, додати 1 мл HNO3 (1:1). Обережно нагріти. Спостерігати появу осаду жовтого кольору. Пробірку охолодити, додати 2-3 мл 20% розчину NaOH.

Дослід 3. Реакція Фоля на амінокислоти, які містять сірку.

У пробірку налити 1 мл 20% розчину NaOH і прокип’ятити з невеликою кількістю волосся. Пробірку охолодити і додати рівний об’єм 5% розчину оцтовокислого свинцю Pb(CH3COO)2.

Na₂S +Pb(CH₃COO)₂  PbS + 2CH₃COONa

Звернути увагу на хімізм цих реакцій і їх застосування.

Запитання і завдання для самоконтролю

1. Що таке білки і в чому полягають їх біологічні функції?

2. Класифікація білків, характеристика основних груп (протеїни: альбуміни, глобуліни, протаміни, проламіни, гістони, протеїноїди; протеїди: нуклеопротеїди, хромопротеїди, глікопротеїди, ліпопротеїди).

3. Охарактеризувати структурну організацію білкової молекули і її хімічні зв’язки.

4. За допомогою яких кольорових реакції можна виявити: циклічні амінокислоти, сірковмісні амінокислоти, пептидний зв’язок у складі білків?

5. За допомогою яких хімічних реакцій можна відрізнити розчини яєчного білка, крохмалю, сахарози, глюкози?

6. Знати формули таких амінокислот: гістидин, аргінін, аспарагін, глютамін.

Література

1. Стеценко О.В., Виноградова Г.П. Біоорганічна хімія.-К.: Вища щкола,1992.- С. 9‑30, 50-58.

2. Боєчко Ф.Ф. Біологічна хімія. -К.: Вища школа, 1989.- С. 8-47.

3. Виноградова Г.П. та ін. Біологічна хімія. Практикум. -К.: Вища школа, 1977.-С. 7‑14.

Варіант 1 Напишіть пептид з таких амінокислот: фенілаланін, аспарагінова к-та, тирозин, гістидин.

Варіант 2 Напишіть пептид з таких амінокислот: аргінін, цистеїн, аспарагін, лейцин.

Варіант 3 Напишіть пептид з таких амінок-т: глютамінова к-та, триптофан, гістидин, метіонін.

Варіант 4 Напишіть пептид з таких амінокислот: тирозин, глютамін, аргінін, фенілаланін.