- •52. Иммунный ответ организма: определение, условия развития. Антигены: строение, свойства, классификация. Т-зависимые и т-независимые антигены. Суперантигены.
- •53. Антигены микроорганизмов. Антигенная структура бактерий. Типовые, видовые, групповые антигены. Протективные антигены. Перекрёстно-реагирующие антигены, значение.
- •56. Антитела (иммуноглобулины): структура, свойства. Классификация антител: классы, субклассы, изотипы, аллотипы, идиотипы. Закономерности биосинтеза.
- •57. Методы определения концентрации иммуноглобулинов: простая радиальная иммунодиффузия по Манчини, ифа.
- •58. Контроль биосинтеза иммуноглобулинов. Гены иммуноглобулинов. Механизм
- •60. Реакция агглютинации: ингредиенты, механизм, способы постановки, учёт, оценка, практическое применение.
- •61. Реакция пассивной (непрямой) и обратной пассивной гемагглютинации: ингредиенты, механизм, практическое применение. Реакция латексагглютинации. Реакция коагглютинации.
- •62. Реакция иммунопреципитации: ингредиенты, механизм, способы постановки, практическое применение.
- •63. Реакции иммунного лизиса. Реакция связывания комплемента: ингредиенты, механизм, практическое применение.
- •67. Клеточный иммунный ответ: определение, этапы развития, проявления. Активация, пролиферация и дифференцировка клеток. Иммунологическая память.
60. Реакция агглютинации: ингредиенты, механизм, способы постановки, учёт, оценка, практическое применение.
Реакция агглютинации (от лат. agglutinatio - склеивание) - склеивание корпускул (бактерий, эритроцитов и др.) антителами в присутствии электролитов - натрия хлорида.
Реакция агглютинации проявляется в виде хлопьев или осадка, состоящих из корпускул (например, бактерий), "склеенных" антителами.
РА используют для: определения возбудителя, определения антител в сыворотке крови больного.
Методы постановки:
1. Реакция агглютинации на стекле. К капле агглютинирующей сыворотки (разведение 1:20) добавляют взвесь бактерии, выделенных от больного. Образуется хлопьевидный осадок.
2. Развернутая реакция агглютинации с сывороткой крови. К разведениям сыворотки по 0,5 мл добавляют диагностикум 0,5 мл. Инкубируют при 37оС 2 часа, предварительный учет и через 20 ч при 25оС – окончательный учет.
61. Реакция пассивной (непрямой) и обратной пассивной гемагглютинации: ингредиенты, механизм, практическое применение. Реакция латексагглютинации. Реакция коагглютинации.
В РПГА выявляют антитела сыворотки крови с помощью антигенного эритроцитарного диагностикума, который представляет собой эритроциты с адсорбированными на них антигенами. Эритроциты (или частицы латекса РЛА) с адсорбированными на них антигенами взаимодействуют с соответствующими антителами сыворотки крови, что вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка. При отрицательной реакции эритроциты оседают в виде пуговки. В РОПГА применяют антительный эритроцитарный диагностикум - эритроциты, на которых адсорбированы антитела.
Реакцию коагглютинации применяют для определения антигенов с помощью антител, адсорбированных на белке А клеток стафилококка (антительный диагностикум). Белок А имеет сродство к Fc-фрагменту иммуноглобулинов, поэтому такие бактерии, обработанные иммунной диагностической сывороткой неспецифически адсорбируют антитела сыворотки, которые затем взаимодействуют активными центрами с соответствующими микробами, выделенными от больных. В результате коагглютинации образуются хлопья, состоящие из стафилококков, антител диагностической сыворотки и определяемого микроба.
62. Реакция иммунопреципитации: ингредиенты, механизм, способы постановки, практическое применение.
Реакция преципитации - РП (от лат praecipilo осаждать) - это формирование и осаждение комплекса растворимого молекулярного антигена с антителами в виде помутнения, называемого преципитатом. Он образуется при смешивании антигенов и антител в эквивалентных количествах, избыток одного из них снижает уровень образования иммунного комплекса. Широкое распространение получили разновидности реакции преципитации в пробирках (реакция кольцепреципитации), двойная иммунодиффузия в агаре по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия в агаре по Манчини, иммуноэпектрофорез и встречный иммуноэпектрофорез.
Реакция кольцепреципитации. Реакцию проводят в узких преципитационных пробирках: на иммунную сыворотку наслаивают растворимый антиген. При оптимальном соотношении антигена и антител на границе этих двух растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата.
Реакция двойной иммунофиффузиии по Оухтерлони. Для постановки реакции растопленный агаровый гель тонким слоем выливают на стеклянную пластинку и после затвердевания в нем вырезают лунки. В лунки геля раздельно помещают антигены и иммунные сыворотки, которые диффундируют навстречу друг другу. В месте встречи в эквивалентных соотношениях они образуют преципитат в виде белой полосы. У многокомпонентных систем между лунками с антигенами и антителами появляется несколько линий преципитата; у идентичных АГ линии преципитата сливаются; у неидентичных АГ - пересекаются.
Реакция радиальной иммунодиффузии. Иммунную сыворотку с расплавленным агаровым гелем равномерно наливают на стекло. После застывания в геле делают лунки, в которые помещают антиген в различных разведениях. Антиген, диффундируя в гель, образует с антителами кольцевые зоны преципитации вокруг лунок. Диаметр кольца преципитации пропорционален концентрации антигена. Реакцию используют для определения в сыворотке крови иммуноглобулинов различных классов, компонентов системы комплемента и др.
Иммуноэлектрофорез - сочетание метода электрофореза и иммунопреципитации: смесь антигенов вносится в лунки геля и разделяется в геле с помощью электрофореза, затем в канавку параллельно зонам электрофореза вносят иммунную сыворотку, антитела которой диффундируют в гель и образуют в месте "встречи" с антигеном линии преципитации.