- •Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
- •Часть 1
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •1. Ознакомиться с иммерсионной системой микроскопа
- •8. Просмотр фильмов: «Живая клетка», «l-формы бактерий», «Спора»
- •9. Просмотр фильма: «Жизнь бактериальной клетки»
- •2. Изучение мазка из культуры Bac.Anthracis, окрашенного по Гутштейну (клеточная стенка)
- •3. Изучение устройства фазово-контрастного микроскопа
- •Методические указания к практической работе
- •5. Изучение устройства темнопольной микроскопии
- •Методические указания к практической работе
- •3. Изучение и зарисовка демонстрационных препаратов грибов Mucor, Aspergillus, Penicillium
- •1. Изучение методики приготовления пластинчатого агара
- •Характеристика роста исследуемых культур
- •3. Изучение методики посева культуры на пестрый ряд
- •1. Знакомство со средами и аппаратурой для культивирования анаэробов
- •4. Итоговая контрольная работа по теме: «Физиология микроорганизмов (химический состав, питание, дыхание, питательные среды, ферменты, размножение, стерилизация, дезинфекция)»
- •Характеристика типовых штаммов, входящих в задачи
- •Характеристика выделенных культур
- •1. Знакомство с методикой забора водопроводной воды для бактериологического исследования
- •Расчет наиболее вероятного числа бактерий (нвч) в 100 мл питьевой воды централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения
- •Расчет наиболее вероятного числа бактерий (нвч) в 100 мл воды водоемов
- •5. Знакомство с методикой определения количество микроорганизмов в воздухе
- •2. Знакомство с устройством и работой автоклава, сухожаровой печи
- •2. Изучить методы, доказывающие спонтанные мутации у бактерии:
- •4. Зарисовать схему строения бактериофага
- •5. Определить титр бактериофага
- •Результаты титрования фага по методу Грациа
- •Интерпретация значений диаметров зон задержки роста при определении чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам (Среда агв)
- •Допустимые пределы диаметров зон задержки роста
- •Эталонных штаммов при контроле воспроизводимости
- •И точности результатов диско-диффузионного метода
- •(Среда агв)
- •Определение степени чувствительности кишечной палочки к стрептомицину
- •1. Изучение окрашенных по Граму мазков-отпечатков из органов
- •6.1. Возбудитель холеры
- •1. Зарисовка демонстрационных препаратов холероподобного и Эль-Тор вибрионов
- •Патогенез холеры
- •4. Нарисовать колонии вибрионов на средах сэдх и tcbs
- •6.2. Возбудитель чумы
- •1. Изучение мазка из чистой культуры Yersinia pestis, окраска метиленовым синим
- •2. Изучение Yersinia pestis в мазке-отпечатке из органов, окрашенном по Граму
- •3. Изучение колоний вакцинного штамма палочки чумы на среде Туманского
- •Диагностика иерсиниоза
- •Диагностика холеры
- •Бактериологическая диагностика чумы
- •Практическая работа
- •6.1. Возбудитель туляремии
- •6.2. Возбудитель бруцеллеза
- •6.3. Возбудитель сибирской язвы
- •Бактериологическая диагностика туляремии
- •Бактериологическая диагностика бруцеллеза
- •Бактериологическая диагностика сибирской язвы
- •Список сокращений
3. Изучение методики посева культуры на пестрый ряд
5. Подведение итогов занятия – 5 минут
ЗАНЯТИЕ 9
ТЕМА. Методы выделения чистых культур. Дыхание бактерий. Методы культивирования и выделения анаэробных бактерий. Рост и размножение микроорганизмов
Цель занятия. Ознакомить студентов с методами культивирования анаэробных бактерий
Методические указания к практической работе
Продолжительность занятия: 3 академических часа (135 минут)
Место проведения занятия: учебная аудитория
Материально-техническое оснащение – таблицы, стенды, микроскопы, микропрепараты
Хронометраж практического занятия:
1. Вводное слово преподавателя – 5 мин
2. Проверка исходного уровня знаний (тест-контроль) – 15 мин
3. Разбор теоретических вопросов по теме – 80 мин
Питательные среды для культивирования анаэробов
Анаэробные условия для анаэробов:
- физико-механические (эвакуационно-заместительный метод с использованием анаэростатов, кипячение среды, метод Перетца, посев в высокий столбик агара);
- химические способы поглощения кислорода в замкнутом пространстве (раствором пирогаллола, гидросульфитом натрия, применение газогенерирующих систем);
- биологические методы (совместное выращивание анаэробов и аэробов, использование среды Китта-Тароцци)
Методы выделения чистых культур анаэробов
- метод Цейсслера
- метод Вейнберга
- метод Вейон-Виньяля
Анаэробиоз
Открытие анаэробных бактерий
Отличие облигатных анаэробов от факультативных
Регенерация питательной среды
Понятие «размножение бактерий»
Понятие «рост бактерий»
4. Выполнение практической работы – 35 мин
Практическая работа
1. Знакомство со средами и аппаратурой для культивирования анаэробов
2. Знакомство с посевами по Фортнеру, Вейон-Виньялю (зарисовать)
3. Учет пестрого ряда. Заключение по решению задачи. Сдача протоколов
4. Итоговая контрольная работа по теме: «Физиология микроорганизмов (химический состав, питание, дыхание, питательные среды, ферменты, размножение, стерилизация, дезинфекция)»
Четвертый этап
Учет результатов (заключение по исследованию).
Учитывают результаты идентификации и по совокупности полученных данных, опираясь на классификацию и характеристику типовых штаммов, описанных в руководстве (определитель Берджи, 1994-1996 гг.), определяют вид выделенных культур (таблица 4)
Таблица 4
Характеристика типовых штаммов, входящих в задачи
|
Вид микробов
|
Форма |
Окраска по Граму |
Капсула
|
Жгутики
|
Споры
|
Пестрый ряд | |||
|
Лактоза |
Глюкоза |
МПБ | |||||||
|
Индол |
Сероводород | ||||||||
|
E. coli |
пал |
отр |
- |
+ |
- |
КГ |
КГ |
+ |
- |
|
S. aureus |
кокк |
пол |
- |
- |
- |
- |
К |
- |
+ |
|
Kl. pneumoniae |
пал |
отр |
+ |
- |
- |
КГ |
КГ |
- |
- |
|
B. cereus |
пал |
пол |
- |
+ |
+ |
- |
К |
- |
+ |
|
Sarcina |
кокк |
пол |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
Таблица 5