- •Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
- •Часть 1
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •1. Ознакомиться с иммерсионной системой микроскопа
- •8. Просмотр фильмов: «Живая клетка», «l-формы бактерий», «Спора»
- •9. Просмотр фильма: «Жизнь бактериальной клетки»
- •2. Изучение мазка из культуры Bac.Anthracis, окрашенного по Гутштейну (клеточная стенка)
- •3. Изучение устройства фазово-контрастного микроскопа
- •Методические указания к практической работе
- •5. Изучение устройства темнопольной микроскопии
- •Методические указания к практической работе
- •3. Изучение и зарисовка демонстрационных препаратов грибов Mucor, Aspergillus, Penicillium
- •1. Изучение методики приготовления пластинчатого агара
- •Характеристика роста исследуемых культур
- •3. Изучение методики посева культуры на пестрый ряд
- •1. Знакомство со средами и аппаратурой для культивирования анаэробов
- •4. Итоговая контрольная работа по теме: «Физиология микроорганизмов (химический состав, питание, дыхание, питательные среды, ферменты, размножение, стерилизация, дезинфекция)»
- •Характеристика типовых штаммов, входящих в задачи
- •Характеристика выделенных культур
- •1. Знакомство с методикой забора водопроводной воды для бактериологического исследования
- •Расчет наиболее вероятного числа бактерий (нвч) в 100 мл питьевой воды централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения
- •Расчет наиболее вероятного числа бактерий (нвч) в 100 мл воды водоемов
- •5. Знакомство с методикой определения количество микроорганизмов в воздухе
- •2. Знакомство с устройством и работой автоклава, сухожаровой печи
- •2. Изучить методы, доказывающие спонтанные мутации у бактерии:
- •4. Зарисовать схему строения бактериофага
- •5. Определить титр бактериофага
- •Результаты титрования фага по методу Грациа
- •Интерпретация значений диаметров зон задержки роста при определении чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам (Среда агв)
- •Допустимые пределы диаметров зон задержки роста
- •Эталонных штаммов при контроле воспроизводимости
- •И точности результатов диско-диффузионного метода
- •(Среда агв)
- •Определение степени чувствительности кишечной палочки к стрептомицину
- •1. Изучение окрашенных по Граму мазков-отпечатков из органов
- •6.1. Возбудитель холеры
- •1. Зарисовка демонстрационных препаратов холероподобного и Эль-Тор вибрионов
- •Патогенез холеры
- •4. Нарисовать колонии вибрионов на средах сэдх и tcbs
- •6.2. Возбудитель чумы
- •1. Изучение мазка из чистой культуры Yersinia pestis, окраска метиленовым синим
- •2. Изучение Yersinia pestis в мазке-отпечатке из органов, окрашенном по Граму
- •3. Изучение колоний вакцинного штамма палочки чумы на среде Туманского
- •Диагностика иерсиниоза
- •Диагностика холеры
- •Бактериологическая диагностика чумы
- •Практическая работа
- •6.1. Возбудитель туляремии
- •6.2. Возбудитель бруцеллеза
- •6.3. Возбудитель сибирской язвы
- •Бактериологическая диагностика туляремии
- •Бактериологическая диагностика бруцеллеза
- •Бактериологическая диагностика сибирской язвы
- •Список сокращений
5. Знакомство с методикой определения количество микроорганизмов в воздухе
5.1. Определить количество микроорганизмов в воздухе. Забор воздуха в операционной был осуществлен пробоотборником аэрозольным бактериологическим (ПАБ-01). Через сутки на ЖСА на чашке с диаметром 10 см было обнаружено 134 КОЕ стафилококка. Определить количество микроорганизмов (стафилококков) в операционной в 1м3 воздуха. Дать заключение о чистоте воздуха (Оформить протокол)
Для определения количества КОЕ в воздухе стерильные чашки Петри с питательной средой открывают в исследуемом помещении на 5 минут. Частички пыли с бактериями под действием силы тяжести оседают на поверхности плотной среды. Через 48 часов инкубации при 28–30°С осевшие бактерии образуют на среде колонии, которые подсчитывают.
Известно, что на площадь 100 см2 за 5 минут осаждается примерно столько клеток, сколько их находится в 10 л воздуха (0,01 м3). Зная площадь чашки Петри, можно подсчитать количество бактериальных клеток в 1 м3 воздуха. Для этого число колоний, выросших на чашке Петри, относят к общей площади чашки, затем пересчитывают, сколько таких колоний поместилось бы на 100 см2 и далее в 1 м3 воздуха.
Пример расчета. В чашке Петри диаметром 10 см выросло 35 колоний.
Площадь чашки (πr2) составляет 3,14 х 52 = 78,5 (см2).
Далее подсчитывают число клеток на 100 см 2 (равнозначных 10 л или 0,01 м3 воздуха).
78,5 см2 воздуха содержит 35 клеток
100 см2 ------------------------ Х клеток
100 х 35
Х= ----------------- = 45 (клеток)
78,5
Таким образом, в 0,01 м3 воздуха находится 45 клеток, а в 1м3 их будет в 100 раз больше – 4500.
5. Подведение итогов занятия – 5 минут
ЗАНЯТИЕ 11
ТЕМА. Действие факторов внешней среды на микроорганизмы. Дезинфекция. Стерилизация
Цель занятия. Ознакомить студентов с понятием «дезинфекция», методами дезинфекции, научить применять методы дезинфекции в практической деятельности. Ознакомить студентов с понятием «стерилизация», с методами стерилизации, научить пользоваться этими методами, понятиями «асептика» и «антисептика»
Методические указания к практической работе
Продолжительность занятия: 3 академических часа (135 минут)
Место проведения занятия: учебная аудитория
Материально-техническое оснащение – таблицы, стенды, микроскопы, микропрепараты
Хронометраж практического занятия:
1. Вводное слово преподавателя – 5 мин
2. Проверка исходного уровня знаний (тест-контроль) – 15 мин
3. Разбор теоретических вопросов по теме – 80 мин
Понятие «стерилизация»
Понятие «дезинфекция»
Отличие стерилизации от дезинфекции
Методы и способы стерилизации
Предметы для стерилизации сухим жаром
Дробная стерилизация и её применение
Пастеризация и тиндализация, применение
Автоклав
Порядок работы с автоклавом
Методы контроля качества стерилизации
Методика бактериологического контроля эффективности стерилизации
4. Выполнение практической работы – 35 мин
Практическая работа:
1. Знакомство с группами дезинфицирующих средств. Записать в тетрадь классификацию дезинфицирующих средств по характеру действия на белки микроорганизмов: окисление белков, свертывание белка, гидролиз белка, денатурация белка (хлор и его соединения, препараты группы окислителей, фенолы, креозолы, органические кислоты, спирты, щелочи и минеральные кислоты, альдегиды)