Суммарное уравнение окислительного декарбоксилирования пирувата:
Регуляция окислительного декарбоксилирования
Образование ацетил-КоА из пирувата – ключевой необратимый этап метаболизма, поэтому ПДК имеет сложную систему регуляции и реализуется через киназу и фосфатазу (субъединицы ПДК). В результате фосфорилирования под действием киназы ПДК переходит в неактивную форму, при дефосфорилировании фосфатазой – в активную форму. Активность киназы и фосфатазы регулируется многими аллостерическими эффекторами. Киназа ПДК аллостерически активируется АТФ, следовательно, при накоплении АТФ прекращается дальнейшее превращение пирувата в ацетил-КоА. Киназа ПДК аллостерически ингибируется пируватом, АДФ, Са2+.
Цикл лимонной кислоты
Реакции цикла лимонной кислоты
Реакции ЦЛК протекают в матриксе митохондрий.
Е1 - цитратсинтаза, является регуляторным ферментом. Цитратсинтазная реакция лимитирует скорость всего процесса.
Превращение цитрата в изоцитрат катализирует аконитатгидратаза (Е2), содержащая ионы Fe2+. Эта реакция осуществляется в две стадии: сначала происходит дегидратация с образованием цис-аконитата, а затем гидратация с образованием изоцитрата.
Реакция ингибируется фторацетатом, в результате накапливается цитрат.
Далее изоцитратдегидрогеназа (Е3) катализирует дегидрирование с образованием оксалосукцината, а затем следует декарбоксилирование под действием того же фермента.
2-Оксоглутарат подвергается окислительному декарбоксилированию, сходному с окислительнымдекарбоксилированием пирувата.
Эта реакция катализируется 2-оксоглутаратным комплексом (Е4), который состоит из 3-х ферментов: 2-оксоглутаратдегидрогеназы, дигидролипоилсукцинилтрансферазы и дигидролипоилдегидрогеназы и пяти коферментов: тиаминдифосфата, липамида, НАД+, ФАД, КоА-SH. Таким образом, 2-ксоглутаратдегидрогеназный комплекс по строению аналогичен пируватдегидрогеназному комплексу. Однако, первый фермент данного комплекса не имеет такой сложной регуляции как пируватдегидрогеназа. В результате окислительного декарбоксилирования 2-оксоглутарата образуется сукцинил-КоА, содержащий макроэргическую связь. Реакция ингибируется арсенатом, что приводит к накоплению 2-оксоглутарата.
Под действием фермента сукцинил-КоА-синтетатазы энергия макроэргической связи сукцинил-КоА запасается в форме макроэргической связи в молекуле ГТФ (субстратное фосфорилирование).
Далее сукцинат под действием сукцинатдегидрогеназы (Е6) превращается в фумарат. Это единственная реакция ЦЛК, в ходе которой осуществляется прямой перенос атомов водорода с субстрата на флавопротеин ЦПЭ без участия НАД+. Коферментов данного фермента является ФАД.
Затем к фумарату присоединяется молекула H2O под действием фумаратгидратазы (Е7) с образованием малата.
Малатдегидрогеназа (Е8) катализирует превращение малата в оксалоацетат, реакция идет с участием НАД+. Хотя реакция обратима, реально она протекает в направлении образования оксалоацетата, поскольку он вместе с НАДН·Н+ постоянно потребляется в других реакциях.
Регуляция ЦЛК
Осуществляется на уровне цитратсинтазной реакции. Скорость реакции возрастает при повышении концентрации оксалоацетата и снижается при повышении концентраций АТФ, сукцинил-КоА длинноцепочечных жирных кислот.
Значение ЦЛК
1) Амфиболическая функция: а) катаболическая – в ЦЛК происходит утилизация ацетильных групп; б) анаболическая – метаболиты ЦЛК служат предшественниками при синтезе ряда веществ в организме: аминокислот, жирных кислот, глюкозы и других соединений. Например, из сукцинил-КоА образуются порфирины (предшественник гема), из 2-оксоглутарата в результате реакции переаминирования с аминокислотой образуется глутамат.
2) Водороддонорная функция: в ЦЛК образуется 3 молекулы НАДН·Н+ и 1 молекула ФАДН2.
3) Энергетическая функция: с восстановленных коферментов водород передается в ЦПЭ, где в результате окислительного фосфорилирования образуется АТФ. При этом на каждую молекулу НАДН·Н+ в митохондриях образуется 3 молекулы АТФ, на каждую молекулу ФАДН2 – 2 молекулы АТФ. Т.о. при окислении одного ацетильного остатка путем окислительного фосфорилирования образуется 11 мол. (9 + 2) АТФ. Еще одна молекула(ГТФ) образуется путем субстратного фосфорилирования в ходе сукцинил-КоА-синтетазной реакции. После суммирования получаем 11 + 1 = 12 мол. АТФ (в расчете на один ацетильный остаток).