Глава 11. Генно-инженерные системы грамположительных бактерий, не относящихся к роду Bacillus 271

1. Бактерии рода Streptococcus 271

2. Бактерии рода Streptomyces 275

3. Коринеформные бактерии 280

Некоторые проблемы, возникающие при синтезе в бактериях эукариотических белков 283

Глава 12. Генно-инженерная система дрожжей Saccharomyces cerevisiae 286

1. Генетическая организация дрожжей-сахаромицетов 286

2. Плазмиды S. cerevisiae 289

3. Плазмидная трансформация клеток дрожжей 292

4. Молекулярные векторы S. cerevisiae. . . . 294

1. Векторы интеграции 294

2. Клонирующие векторы 298

3. Стабильные молекулярные векторы. . 301 12.4.4. Линейные молекулярные векторы. . . 305

12.5. Клонирование генов в клетках

S. cerevisiae 310 12.5.1. Экспрессирующие векторные системы

S. cerevisiae 310

12.5.2. Секреция чужеродных белков из клеток

S. cerevisiae 318

12.5.3. Продукция чужеродных белков

в S. cetevisiae 322

12.5.4. Двухгибридная система дрожжей

для идентификации белок-белковых

взаимодействий 326

13. Генетическая инженерия культивируемых клеток млекопитающих 332

13.1. Введение молекул ДНК в клетки

млекопитающих 332

13.1.1. Введение вирусных ДНК. . 332

13.1.2. Введение плазмид и фрагментов

ДНК 335

13.2. Стабильность гибридных молекул ДНК в культивируемых клетках млекопитающих 338

13.3. Генетическая трансформация клеток

млекопитающих 339

13.3.1. Генетическая трансформация

мутантных линий 339

13.3.2. Котрансформация 342

3. Доминантные амплифицируемые маркеры генетической трансформации 343

4. Эписомные векторы генетической трансформации 348

13.3.5 Регулируемая экспрессия целевых

генов 349

Глава 14. Векторные системы на основе

вирусов животных 354

14.1. Вирус SV40 как молекулярный вектор . . 354

1. Структурно-функциональная организация генома SV40 354

2. Литические векторы на основе ДНК вируса SV40 358

3. Нелитические эписомные векторы на основе генетических элементов

SV40 363

14.1.4. Трансформирующие векторы

на основе SV40 364

14.1.5. Особенности экспрессии клонированных последовательностей

в составе генома SV40 365

2. Молекулярные векторы на основе генома вируса папилломы быка 366

3. Аденовирусы в качестве молекулярных

векторов 371

1. Молекулярно-генетическая организация Ad2 и Ad5 человека ... 371

2. Конструирование гибридных аденовирусов 375

3. Рекомбинантные аденовирусные вакцины 381

4. Генная терапия 382

14.4. Молекулярные векторы на основе вирусов семейства Herpesviridae 384

1. Конструирование in vivo гибридных вирусов простого герпеса 386

2. Разработка живых вакцин на основе герпесвирусов животных 387

3. HSV-ампликоны 388

4. Плазмидные векторы на основе

элементов генома вируса Эпштейна-Барр 389

14.5. Экспрессирующие векторы на основе поксвирусов 390

1. Структура вириона и генома ортопоксвирусов 390

2. Конструирование гибридных вирусов осповакцины 392

3. Использование гибридных поксвирусов для вакцинации домашних и диких животных 400

14.6. Трансдукция генов с помощью ретровирусов 400

1. Молекулярно-генетическая организация ретровирусов 400

2. Ретровирусные молекулярные

векторы 402

3. Генетическая нестабильность гибридных ретровирусов 408

4. Ретровирусы в качестве инструмента генной терапии 409

6

ОГЛАВЛЕНИЕ