47

Спустя 72 часа после введения стрептозотоцина измеряли уровень гликемии и для эксперимента отбирали животных с уровнем гликемии после 6-

ти часовой пищевой депривации в пределах 8-16 ммоль/л. Далее животных распределяли по группам в соответствии с принципом рандомизации.

2.4.1. Оценка гипогликемической активности исследуемых соединений

Методика измерения уровня гликемии. Измерение уровня глюкозы в крови проводили после 6 часовой пищевой депривации. Для измерения использовали кровь из хвостовой вены. Уровень глюкозы определяли в крови глюкозооксидазным методом [Камышников В.С., 2009] с измерением величины оптической плотности надосадочной жидкости в кюветах с длиной оптического пути 10 мм при длине волны 500 нм на спектрофотометре ПЭ-5400В (ЗАО

«НПО Экрос», Россия) с использованием наборов «Глюкоза ФКД» (Россия).

Проведение перорального теста на толерантность к глюкозе

Пероральный тест на толерантность к глюкозе проводили (после 6

часовой пищевой депривации) путем однократного перорального введения 40%

раствора глюкозы (3 г/кг, «глюкозная нагрузка») с предварительным и последующим определением концентрации глюкозы в крови спустя 30, 60 и 120 мин [Спасов А.А., 2012]. После построения графиков «уровень гликемии-

время» рассчитывали площади под кривой в программе Prism 5.

2.4.2. Определение уровня инсулина и ГПП-1 в сыворотке крови методом

твердофазного иммуноферментного анализа

Иммуноферментный анализ (ИФА) проводили с использованием фотометра-анализатора SUNRISE («TECAN», Австрия), микропланшетного вошера HydroFlex М8/2 («TECAN», Австрия) и термошейкера для планшетов

PST-60HL (BioSan, Рига, Латвия). Для получения сыворотки у животных посредством пункции подъязычной вены забирали по 1 мл крови в пробирки типа Эппендорф и оставляли ее на 2 часа при t=25°C. Спустя 2 часа после обведения сгустка крови стерильной стеклянной палочкой центрифугировали