6 курс / Судебная медицина / Лабораторные_и_специальные_методы_исследования_в_судебной_медицине

Рис. 6. Входное огнестрельное повреждение, залитое кровью (обыч­ ный снимок).

Рис. 7. Тот же объект, что на рис. 6, сфотографированный в инфра­ красных лучах.

ной от 760 до 1300 нм. Наиболее удобными и доступными искусственными источниками ИКЛ являются обычные элек­ трические газонаполненные лампы мощностью 100, 150, 20№ и 500 Вт (для макросъемки), дуговые и низковольтные точеч-

38

Ные лампы (для микросъемки). Они дают до 36% фотографи­

ческих ИКЛ.

Для фотографирования в ИКЛ используют специальные фотопластинки и фотопленки «Инфрахром», чувствительные к ним. Их выпускают с маркировкой длин волн 720, 760, 830, 880 нм и т. д. Однако это не означает, что указанные мате­ риалы чувствительны только к ИКЛ названной длины волны, а свидетельствует о том, что максимум спектральной чувстви­ тельности данных фотоматериалов находится в указанной

зоне.

У инфрахроматических, как у всех сенсибилизированных, фотоматериалов естественная чувствительность к сине-фиоле­ товой зоне спектра более значительна, чем добавочная к ИКЛ. Поэтому при фотографировании в ИКЛ необходимо использо­ вать заградительный светофильтр, который задерживал бы лучи сине-фиолетовой зоны и пропускал к пластинке (пленке) только ИКЛ.

В качестве заградительных фильтров могут быть исполь­ зованы все плотные желто-оранжевые и красные светофиль­ тры, а также специальные светофильтры ИКС-1, ИКС-2, ИКС-3. При съемке светофильтры лучше всего помещать перед объективом фотокамеры, хотя (в зависимости от конструкции последней) его можно разместить и внутри камеры (за объ­ ективом) и перед источником света. В последнем случае съем­ ку ведут в затемненной комнате.

Фотографирование в ИКЛ можно производить любой фото­ графической камерой или фотоустановкой, используемой для обычной съемки. Однако, поскольку некоторые материалы (кожа, тонкие слои эбонита, дерево, многие пластмассы, из которых изготавливают части камер и кассет) проницаемы для ИКЛ; прежде чем использовать фотоаппарат для фото­ графирования, следует проверить его и кассеты на проходи­ мость ИКЛ из окружающей среды, которые могут еще до съемки засветить пластинку или пленку.

Фокус ИКЛ и видимых лучей не совпадает. У ИКЛ, как более длинноволновых, он находится дальше от объектива, чем у видимых. Существует ряд способов внесения поправки па фокус при фотографировании в ИКЛ с тем, чтобы полу­ чить резкое изображение объекта. Наиболее распространен­ ными из них являются наводка на резкость по матовому стек­ лу в видимой части спектра, после чего объектив сильно диа­ фрагмируется; после наведения на резкость в видимом свете матовое стекло отодвигается несколько назад так, чтобы изо­ бражение слегка потеряло четкость, затем объектив диафраг­ мируется; фокусирование производят через красный свето­ фильтр с последующим диафрагмированием.

Микроскопическое фотографирование в ИКЛ производят таким же образом, как и обычную микросъемку. Разница со-

39

стоит лишь в том, что фотографирование производят на пла­ стинке «Инфра» и после фокусировки вносят поправку на фо­ кус. Фильтр при микросъемке помещают или перед источни­ ком света, или внутри камеры. Экспозицию устанавливаюг экспериментально.

Проявление экспонированных инфрахроматических мате­ риалов производят в полной темноте, так как свет красных, лабораторных фонарей содержит инфракрасные лучи, засве­ чивающие во время проявления инфрахроматические фотома­ териалы. В тех случаях, когда необходимо контролировать, проявление, пользуются специальными лабораторными фона­ рями с фильтрами, пропускающими лучи длиной от 540 до^ 650 им, к которым инфрахроматические материалы не чувст­ вительны.

Для проявления можно употреблять как обычные, так и специальные проявители. При выборе их руководствуются теми же соображениями (контрастность, мягкость, мелкая зернистость), что и при обработке обычных пластинок и пленок. Время проявления, фиксирования и промывки, если этоспециально не оговорено в сопроводительных документах или упаковке, — обычное. После переноса пластинки в фиксаж можно зажигать красный свет.

Фотографирование в ультрафиолетовых лучах. Невидимые ультрафиолетовые лучи (УФЛ) расположены между видимы­ ми фиолетовыми и мягкими рентгеновыми лучами. Они под­ чиняются тем же законам отражения и преломления, что и видимые лучи, но в отличие от последних поглощаются и от­ ражаются многими веществами иначе. Это обстоятельство и обусловило использование УФЛ в судебной медицине. Объек­ ты, цветовое различие которых нельзя установить в видимом свете, могут быть дифференцированы между собой путем фото­ графирования в фильтрованных УФЛ. При этом практически используют диапазон лучей от 250 до 400 нм.

Фотосъемку в УФЛ можно производить с целью обнару­ жения на белых тканях замытых, неразличимых тлазом, сле­ дов крови, которые выглядят на фотоснимке в виде темных пятен; с целью выявления трупных пятен в ранней стадии их образования, а также выявления и запечатления уничтожен­ ных текстов на вещественных доказательствах.

Естественным источником УФЛ является солнце. В лабо­ раторной практике естественный ультрафиолетовый свет поч­ ти не применяют ввиду непостоянства источника и сложности его использования. Мощным искусственным источником уль­ трафиолетового излучения являются ртутно-кварцевые лампы и электрические дуги с угольными и металлическими электро­ дами. Обычные лампы накаливания для указанных целей не­ пригодны, так как спектр их содержит ничтожное количество УФЛ (1%).

40

Фотосъемка в отраженных УФЛ может производиться лю­ бым фотоаппаратом. Однако стеклянные объективы пригодны для фотографирования в УФЛ с длиной волны не менее 350 нм. Для фотографирования в ультрафиолетовых лучах с длиной волны меньше 350 нм используют кварцевую оптику, пропускающую волны длиной до 185 нм.

Фотографирование производят на любых сенсибилизиро­ ванных и несенсибилизированных фотоматериалах с примене­ нием светофильтров, задерживающих видимое излучение источника ультрафиолетового света и пропускающих в объ­ ектив только ту зону ультрафиолетового излучения, в кото­ рой осуществляется съемка. Отечественная промышленность выпускает набор, состоящий из 4 светофильтров с различной пропускной способностью: УФС-1 (240—400 нм), УФС-2 (270—380 нм), УФС-3 (320—390 нм) и УФС-4 (340—390 нм).

Фотографируют в УФЛ в затемненном помещении. Свето­ фильтр помещают перед объективом фотокамеры или непос­ редственно за ним внутри камеры. В связи с тем что фокусы ультрафиолетовых и видимых лучей не совпадают, необходи­ мо вводить поправку на фокус. Для этого после наведения на резкость в видимом свете уменьшают растяжение меха каме­ ры настолько, чтобы изображение чуть-чуть вышло из фоку­ са. Затем объектив диафрагмируют. При пользовании в рабо­ те одним и тем же фотоаппаратом можно практически уста­ новить необходимую поправку на фокус для различных масштабов. В этом случае на предметной доске фотоаппарата

.делают отметки, соответствующие точной фокусировке в види­ мом и ультрафиолетовом свете.

Фотографирование видимой люминесценции. Под люми­ несценцией понимают холодное свечение веществ. Люминес­ ценция, возникающая под воздействием световых лучей (уль­ трафиолетовых, фиолетовых, синих), называется фотолюми­ несценцией.

В судебной медицине к люминесцентным методам исследо­ вания прибегают для обнаружения на вещественных доказа­ тельствах визуально неразличимых или малоразличимых нало­ жений (например, спермы, слюны, крови, смазочных масел и т. д.), ориентировочного определения природы люминесцирующнх веществ, установления формы, размеров и локализации выявленных следов на исследуемых объектах. При этом мо­ жет возникнуть необходимость в фотографическом запечатлении люминесцирующих участков.

Фотографирование видимой люминесценции может произ­ водиться любыми фотоаппаратами с обычной стеклянной оп­ тикой и использованием заградительных фильтров. Послед­ ние необходимы для того, чтобы, пропустив в объектив фото­ камеры свет люминесценции, задержать все посторонние ^ультрафиолетовые, фиолетовые, синие) лучи, исходящие от

41

источника возбуждения люминесценции и отразившиеся от ис­ следуемого объекта. Если фотографировать без заградитель­ ного фильтра, то на фотоэмульсию пластинки наравне со сла­ бым светом люминесценции будет воздействовать мощный поток света источника возбуждения, отраженный объектом, ко­ торый ослабит или совсем «перекроет» люминесцирующее изображение.

В качестве заградительных могут быть использованы жел­ тые фильтры —ЖС-4, ЖС-11, ЖС-12, ЖС-18 и др. Для того чтобы определить пригодность светофильтра к использованию в качестве заградительного, его помещают (при облучении объекта ультрафиолетовыми или синими лучами) между источ­ ником возбуждения и люминесцирующим объектом. Если лю­ минесценция прекратится, следовательно, светофильтр задер­ живает возбуждающие люминесценцию лучи и к работе при­ годен.

При фотографировании видимой люминесценции исполь­ зуют обычные негативные фотоматериалы, сенсибилизирован­ ные к цвету люминесценции. Рекомендуется пользоваться вы­ сокочувствительными фотоматериалами, так как люминесцирующий объект всегда слабо светится.

Фотографирование видимой люминесценции производят в затемненном помещении в такой последовательности: объект съемки освещают светом, возбуждающим люминесценцию. Перед объективом помещают заградительный светофильтр. По изображению люминеецирующего объекта на матовом стекле камеры производят наведение на резкость. Слегка диа­ фрагмируют объектив и осуществляют фотографирование. Никакую поправку на фокус вводить не надо, так как фото­ графируется видимая люминесценция. Если люминесценция слаба и точное фиксирование затруднено, наведение на рез­ кость производят в видимом свете. В целях сокращения экспо­ зиции при съемке рекомендуется максимально интенсивно освещать исследуемый объект, использовать светосильные объ­ ективы, сократить до минимума расстояние от объекта съем­ ки до объектива фотоаппарата.

МИКРОФОТОГРАФИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Среди фотографических методов, используемых в судеб­ ной медицине, существенное место занимает микрофотогра­ фия, позволяющая запечатлеть и исследовать микроскопиче­ ские объекты, недоступные для изучения невооруженным глазом.

Микрофотография в проходящем свете. При судебно-меди­ цинских исследованиях нередко приходится изучать микро­ скопически малые объекты: гистологические препараты, воло­ сы, сперму, молозиво, растительные и искусственные волокна»

42

h

частицы почвы и растений, кристаллы различных веществ и т. д. При этом может воз­ никнуть необходимость запе­ чатлеть их на фотографии.

съемки универсальные микрофотоустановки, представляющие собой конструктивное сочетание в одном приборе микроскопа •с -камерой, источником света, светофильтрами и другими не­ обходимыми приспособлениями.

В качестве источника света при микросъемке используют точечные осветители типа ОЙ-19, а также фото- и кинолам­ пы. В некоторых специальных установках в качестве мощных •точечных источников света применяют дуговые и ртутно-квар- цевые лампы сверхвысокого давления.

Микроскопическое фотографирование производят под ма­ лым, средним и большим увеличением. Объективы, дающие увеличение от 1 до 10 с нумерической апертурой от 0,02 до 0,25, имеющие большое поле зрения, используют для съемок с малым увеличением. Объективы с увеличением от 10 до 40 включительно с апертурой от 0,30 до 0,65 позволяют получать

43

среднее увеличение. Для больших увеличений применяют объективы с увеличением от 40 до 120 с апертурой от 0,70 до 1,6. Показатель кратности объектива и его нумерической апер­ туры обычно указывается на оправе объектива. Показатель апертуры позволяет сравнивать между собой объективы в от­ ношении их разрешающей и светообразующей способности. Так, чем выше апертура, тем больше разрешающая способ­ ность объектива.. Яркость изображения, создаваемого объек­ тивом, (Пропорциональна квадрату применяемой апертуры.. Если один из двух объективов имеет апертуру, в 2 раза боль­ шую, то яркость образуемого им изображения будет в 4 раза больше, чем у второго.

По оптическим свойствам объективы для микросъемки подразделяют на ахроматические, хроматически исправлен­ ные только к двум цветам — фиолетовому и желтому, и алохроматические, хроматически исправленные к трем цветам — фиолетовому, желтому и красному. У всех апохроматических и сильных ахроматических объективов имеется недостаток,, называемый хроматизмом увеличения, что приводит к искрив­ лению поля изображения. Его можно устранить, используя при съемке компенсационные окуляры.

Для работы и съемки на микроскопе используют окуляры. Гюйгенса, ортоскопические и компенсационные. Первые два вида окуляров .применяют со слабыми и средними ахромати­ ческими, а компенсационные — с сильными ахроматическими; и со всеми анохроматическими объективами. Широко распро­ страненней ...биологический микроскоп МБИ-3 имеет в своем наборе*объективы апохроматические (ЮХ, 20Х, 60Х, 90Х) и окуляры компенсационные (5х, 7Х, 15х, 20Х).

Если при фотографировании нужна большая разрешающая способность и хорошая хроматическая коррекция, следует пользоваться апохроматическими и компенсационными окуля­ рами. Если съемка ведется с малым и средним увеличением,, причем можно пренебречь некоторым хроматизмом изображе­ ния, или же фотографирование осуществляется в селективном свете (например, с зеленым фильтром), то пользуются ахро­ матическими объективами и окулярами Гюйгенса. При микро­ съемке с сильными объективами обычно используют слабые окуляры и, наоборот, со слабыми объективами—сильные. Кратность окуляра, который следует выбрать для фотографи­ рования, может быть определена по формуле:

Увеличение окуляра = 500 ;нумерическая апертура объектива увеличение ооъектива

Так, кратность окуляра при объективе, дающем увеличение 10 с апертурой 0,30, равна 15.

Микрофотографирование в проходящем свете осуществля­ ют в такой последовательности: в микроскоп вставляют объ-

44

ективы и окуляр, предназначенные для работы. Затем вну­ треннюю трубку тубуса микроскопа выдвигают настолько, чтобы механическая длина тубуса (расстояние от нижнего конца тубуса до верхней плоскости окуляра) составляла 160 мм. Лампочку осветителя устанавливают таким образом, чтобы изображение ее волоска было хорошо различимо на плоской стороне зеркала микроскопа. Диафрагма осветителя при этом должна быть полностью открыта. На предметный столик микроскопа помещают объект и наводят препарат на резкость. Для этого микрометрическим винтом опускают тубус микроскопа почти до препарата, а затем, медленно поднимая тубус и наблюдая препарат через микроскоп, фокусируют изображение. Закрыв диафрагму осветителя, перемещают конденсор микроскопа вверх и вниз, стремясь получить изоб­ ражение закрытой диафрагмы осветителя в плоскости препа­ рата по центру поля зрения. После этого диафрагму освети­ теля открывают настолько, чтобы было освещено все поле зрения объектива. При съемке апертуру конденсора следует доводить до апертуры объектива. Достигают этого путем из­ менения отверстия ирисовой диафрагмы конденсора. При ра­ боте с конденсором всегда пользуются плоской стороной зеркала микроскопа.

Для микроскопической съемки с небольшими увеличени­ ями можно использовать специальные короткофокусные объ­ ективы с фокусным расстоянием (F) 25, 30 и 45 мм. Фотогра­ фировать ими можно как через микроскоп, так и обычными

(в том числе гистологических) с использованием ахромати­ ческих объективов рекомендуют пользоваться зеленым свето­ фильтром, способствующим устранению хроматической абер­ рации. Этот светофильтр, помещенный перед источником све­ та, пропустит в объектив лишь зеленые, а также часть желтых и голубых лучей, причем отрежет с одной стороны длинновол­ новые оранжевые и .красные лучи, а с другой• — коротковол­ новые синие и фиолетовые лучи.

Для получения цветоделенного изображения препарата при микросъемке в проходящем свете перед источником света по­ мещают светофильтр, по цвету дополнительный к цвету одной из частей препарата, а для фотографирования употребляют фотопластинки, сенсибилизированные к .цвету фильтра. При фотографировании цветных препаратов используют материа­ лы, сенсибилизированные « цвету препарата.

Печатание с негативов, полученных при микросъемке, мо­ жет осуществляться контактным и проекционным путем. Отпечатай микроснимков не должны быть очень контрастны

45

ми, так как это ведет к неправильному восприятию изобра­ жения.

Микрофотография фазово-контрастная. При судебно-меди­ цинских исследованиях часто приходится иметь дело с нео­ крашенными препаратами.

Микроскопическое изучение их и фотографирование из-за почти полной прозрачности объектов бывают весьма затрудни­ тельными. В этих случаях хорошие результаты дает использо­ вание фазово-контрастного приспособления, предназначенного для работы с биологическим микроскопом. Оно позволяет ви­ деть элементы структуры прозрачного неокрашенного препа­ рата, отличающиеся между собой по показателю преломления или по толщине.

Фазово-контрастная микроскопия с успехом может приме­ няться при изучении волос и их прозрачных отпечатков, пре­ паратов спермы, молозива, мекония, неокрашенных гистоло­ гических препаратов и т. д. Так, при фазово-контрастной мик­ рофотосъемке неокрашенных препаратов спермы на снимке хорошо различимы не только сами сперматозоиды, но и эле­ менты строения их головки, в частности ядро, которые мало или совсем неразличимы при обычной микросъемке. Сказанное в равной мере относится к фотографированию молозивных те­ лец, частиц мекония и т. д.

Фазово-контрастное приспособление КФ-1 состоит из фа­ зово-контрастного устройства, вспомогательного микроскопа и 4 фазовых объективов (10Х, 20Х, 40Х, 90Х).

Для рассматривания и фотографирования препаратов че­ рез микроскоп с фазово-контрастным приспособлением обыч­ ный конденсор микроскопа удаляют и заменяют фазово-конт­ растным конденсором, револьвер которого устанавливают так, чтобы в окошечко была видна цифра «О». В тубус микроскопа ввинчивают фазовые объективы и вставляют обычный окуляр избранной кратности увеличения. Осветитель для микросъем­ ки и микроскоп закрепляют на соединительной пленке осве­ тителя. На предметный столик микроскопа помещают препа­ рат и наводят объектив на резкость. Когда освещение отрегу­ лировано и полевая диафрагма открыта в соответствии с полем зрения окуляра, ирисовую диафрагму конденсора полностью открывают и окуляр заменяют измерительным микроскопом. Перемещая окуляр измерительного микроскопа, фокусируют его на фазовое кольцо объектива. Вращая ре­ вольвер конденсора, включают требуемую кольцевую диа­ фрагму. После этого в поле зрения окуляра вспомогательного микроскопа, помимо фазового кольца, появится светлое коль­ цо диафрагмы. С помощью центровочных винтов эти коль­ ца совмещают, вспомогательный микроскоп заменяют вновь обычным окуляром, тубус микроскопа соединяют с фотокаме­ рой, производят фокусирование и съемку.

46

Микрофотография в темном поле. При микрофотосъемке кристаллов, растительных волокон, частиц почвы и др. часто необходимо получить изображение, на котором были бы хо­ рошо видны контуры фотографируемого объекта. В этих слу­ чаях используют специальный вид микросъемки — фотографи­ рование в темном поле. Особенность этого вида съемки заклю­ чается в освещении объекта светом, проходящим лишь через краевые участки конденсора, центральная часть которого закрыта специальной диафрагмой. В результате такого освеще­ ния свет не попадает в объектив, поле зрения остается тем­ ным и на его фоне ярко и четко вырисовываются светящиеся отраженным светом фотографируемые частицы.

Эффект темного поля может быть достигнут в обычном биологическом микроскопе несколькими способами: с по­ мощью конденсора темного поля (конденсор ОИ-2), обычного конденсора, у которого снята верхняя линза и на оправу на­ дето кольцо со вставленной в нее диафрагмой, задерживаю­ щей центральные лучи, идущие от конденсора. При правиль­ ной фокусировке конденсора световое пятно на препарате должно иметь форму сплошного освещенного кружка. В том случае, если световое пятно имеет форму кольца, конденсор необходимо несколько поднять или опустить; при микрофото­ графировании с небольшими увеличениями (8—10Х) эффект темного поля можно получить, направив зеркалом свет осве­ тителя на объект таким образом, чтобы, освещая объект, он не попал в объектив микроскопа. В этом случае в окуляре микроскопа наблюдается черное поле с ярко светящимися от­ раженным светом фотографируемыми частицами.

После того как в микроскопе достигнут требуемый эффект, его соединяют с фотокамерой, производят наводку на фокус и фотографируют.

Микрофотография в поляризованном свете. Обычными ми­ кроскопическими методами не всегда возможно выявить на исследуемых объектах детали или микровключения, отлича­ ющиеся по своей оптической плотности от массы самого объ­ екта (например, стеклянная пыль или волокна текстильных тканей в препаратах раневого канала, планктон в препаратах из внутренних органов и выделений организма, строение кути­ кулы волос и т. д.). В подобных случаях прибегают к специ­ альному виду микроскопического исследования — наблюдению в поляризованном свете.

Поляризационный микроскоп, не отличаясь по существу по своей конструкции от обычного микроскопа, имеет допол­ нительное устройство в виде поляризатора, расположенного под конденсором, и анализатора, помещенного в тубусе ми­ кроскопа или над окуляром. Каждое из этих приспособлений обладает способностью пропускать свет строго определенной плоскости поляризации. В случае, если анализатор занимает

47