6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Лабораторная_диагностика_нарушений_гемостаза_В_В_Долгов,_П_В_Свирин

Урокиназный

Урокиназный активатор плазминогена

активатор

ких

и

патологических

плазминогена (уро-киназа,

u-РА)

найден

в

процессах - заживлении

ран,

воспалении,

больших

количествах

в

моче

. человека

опухолевых

Предшественником

u-РА

является

эмбриогенезе, метастазирова-нии

белок

проурокиназа,

или

scu-PA.

Проуроки-наза

клеток.

Известен еще ряд функций урокиназы поми-

синтезируется

в

различных

клетках. Особенно

мо активации плазминогена. Наиболее важные из

активно

scu-PA

синтезируется

эпителиальными

них - активация ростовых факторов, модуляция

клетками

почечных

протоков,

а

также

обкла-

миграции и инвазии клеток, оказание митоген-

дочными клетками практически всех протоков,

ного эффекта на клетки меланомы.

включая протоки потовых, слезных и других же-

Рецептор урокиназы (u-PAR) обнаружен на

лез. В протоках урокиназа необходима для дег-

моноцитах. Он способствует активации плазми-

радации

белковых

компонентов

секретов. Основ-

ногена урокиназой, что необходимо для участия

ную работу урокиназа выполняет в тканях, спо-

моноцитов в деградации фибринового тромба.

собствуя

деградации

внеклеточного матрикса,

Такой же рецептор найден на тромбоцитах. Опи-

что облегчает процессы миграции клеток.

Роль

саны 2 рецептора, элиминирующие урокиназу и

урокиназы значительна во многих физиологичес-

комплекс урокиназа-серпин из кровотока.

В фибринолизе, так же как в системе коагуля-

активации плазминогена обеспечивается в основ-

ции, имеется 2 пути: внешний и внутренний путь

ном тканевым активатором, внутренний путь -

активации плазминогена (рис. 57). Внешний путь

урокиназой.

Рис. 57. Основные звенья фибринолиза. Образование

основного фермента фибринолиза плазмина происходит

под влиянием факторов внутреннего или внешнего пути ак-

тивации фибринолиза, Внутренний путь начинается с акти-

вации проурокиназы. Внешний путь определяется влияни-

ем тканевого активатора плазминогена(t-PA). Накопление

свободного плазмина в системном кровотоке предотвра-

щается группой острофазных белков, КК - калликреин,

ВМК - высокомолекулярный кининоген, u-РА - урокиназа,

Cl-Ing - ингибитор 1-го компонента комплемента, PAI-1 -

ингибитор тканевого активатора плазминогена типа1, ПДФ -

продукты деградации фибрина

Плазминоген имеет высокое сродство к вы-

го комплекса плазминоген переходит в активный

павшему фибрину за счет присутствия на фибри-

плазмин, который разрушает пептидные связи в

не специфических лизин-связывающих участков фибрине/фибриногене.

(сайтов). Эндотелиальные клетки синтезируют и

освобождают в систему циркуляции тканевой

активатор плазминогена (t-PA). Изучение процесса

высвобождения t-PA из клеток показало, что

основным стимулятором этого является брадики-

нин, который отщепляется от высокомолекуляр-

ного кининогена калликреином. Таким образом,

процесс активации факторов контактной фазы

является основным физиологическим пусковым

механизмом фибринолиза. Этот процесс резко уси-

ливается при остановке кровотока и образовании

фибрина. t-PA обладает высоким сродством к фиб-

рину. На фибрине формируется комплекс фибрин-

тканевой активатор - плазминоген (рис. 58) - наи-

Рис. 58. Активация плазминогена при формировании

более специфическое и эффективное действующее

комплекса фибрин - тканевой активатор - плазминоген на

начало фибринолиза. Фибрин, особенно частич-

фибрине. Фибрин служит кофактором t-PA-индуцирован-

но деградированный фибрин, служит кофактором

ной протеолитической активации плазминогена. На поверх-

t-PA-индуцированной протеолитической актива-

ности фибрина присутствует лизин-связывающий сайт, не-

обходимый для активации плазминогена тканевым актива-

ции плазминогена. В результате образования это-

тором

Ингибитор активатора плазминогена 1-го типа

PAI-1 ингибируется протеином С. Таким об-

(PAI-1). Это специфический ингибитор тканевого

разом, протеин С ингибирует не только активи-

активатора плазминогена (t-PA) и урокиназы (u-

рованные факторы Va и VIIIa, но и PAI-1, прояв-

РА). Помимо этого онподавляет активацию фиб-

ляя, следовательно, профибринолитическую ак-

ринолиза стрептокиназой.

тивность.

PAI-1 обнаружен в плазме и тромбоцитах.

Ингибитор тканевого активатора плазминоге-

В плазме он связан с витронектином. PAI-1 син-

на 2-го типа (PAI-2) обнаружен в очень низких

тезируется в эндотелиальных клетках. Синтез

концентрациях в плазме, но может существенно

усиливается при их стимуляции липополисаха-

повышаться при беременности. Он в большей сте-

ридами плазматических мембран бактерий(эн-

пени ингибирует активность u-РА, чем t-PA.

дотоксином), провоспалительными цитокина-

Ингибитор тканевого активатора плазминоге-

ми, такими, как ИЛ-1 или ФНО-α, а также тром-

на 3-го типа (PAI-3). Это, по-видимому, относитель-

бином. Наиболее значительная стимуляция

но слабый ингибитор. Он подавляет активацию

происходит в условиях сепсиса и при обширных

плазминогена протеином С. Диагностического зна-

тромбозах.

чения определение PAI-2 и PAI-3 пока не имеют.

Плазмин является очень активной и в то же

Помимо фибрина, плазмин способен актив-

время относительно неспецифичной сериновой

но деградировать фибриноген, особенно в тех слу-

протеазой, которая разрушает фибрин и фибри-

чаях, когда вводятся активаторы фибринолиза

ноген. Образующиеся вследствие этого молеку-

(фибринолитики). В результате лизиса фибрино-

лы, имеющие разную молекулярную массу, обо-

гена образуются меньшие фрагменты X, Y, D и Е

значаются как продукты деградации фибрина/

(рис. 61), а D-димеры не образуются.

фибриногена (ПДФ).

Некоторые фрагменты ПДФ обладают выра-

Продуктами деградации фибрина в основном

женной физиологической активностью. Они сни-

являются комплексы DDE и D-димеры (рис. 60).

жают агрегацию тромбоцитов и нарушают поли-

В норме в кровотоке большинство тромбо-

ванную агрегацию. Природа чувствительных к

цитов находятся в неактивной форме на всех уча-

механическому воздействию компонентов этой

стках кровеносного русла. Однако, в условиях

системы неизвестна.

воздействия сил сдвига, превышающих нормаль-

Интенсивность воздействия потока крови на

ные, тромбоциты могут спонтанно активиро-

тромбоциты влияет на адгезию к субэндотели-

ваться без контакта с субэндотелием. Предполо-

альным структурам и агрегацию. В условиях сла-

жительный механизм этого процесса связан с

бого воздействия тока крови адгезия тромбоци-

особенностями функционирования фактора Вил-

тов происходит за счет прямой фиксации к кол-

лебранда (vWF). В условиях нормального кро-

лагену через рецептор GPIa-IIa и посредством

вотока vWF мало связывается со своими рецеп-

молекулы адгезии фибронектина, а агрегация

торами на интактных тромбоцитах. Однако, ког-

происходит за счет фибриновых мостиков. В ус-

да воздействие сил тока крови превышает обыч-

ловиях интенсивного кровотока для надежной

ное, например в области атеросклеротического

фиксации тромбоцитов к субэндотелию и проч-

сужения артерии, аффинность vWF к рецепторам

ной агрегации необходим vWF. У пациентов с

повышается. Он связывается с GPIb и GPIIb-IIIa

количественным и качественным дефектомvWF

одновременно. Следствием этого становится ак-

нарушение адгезии и агрегации тромбоцитов

тивация тромбоцитов с образованием мобиль-

приводит к геморрагическим проявлениям раз-

ных тромбоцитарных агрегатов. АДФ и эпинеф-

личной тяжести.

рин (адреналин) - агонисты этого процесса, они

В медленно текущей и сгущенной крови на-

увеличивают процесс тромбообразования. Ме-

ступает агрегация клеток крови(рис. 63). Эрит-

ханизм этого действия неясен. Исследования по-

роциты собираются в монетные столбики, обра-

казали, что ингибирование циклооксигеназы ас-

зуются агрегаты тромбоцитов, в легких форми-

пирином оказывает небольшое влияние на агре-

руются агрегаты нейтрофилов. Повышается вяз-

гацию тромбоцитов под воздействием напряже-

кость крови.

ния сдвига, а агенты, повышающие уровень

Проводились экспериментальные исследова-

внутриклеточной цАМФ, такие, как простацик-

ния роста тромба в зависимости от интенсивно-

лин (ПГ1), ингибируют механически индуциро-

сти кровотока. Процесс тромбообразования

проходил на компонентах, выделенных из эндо-

мере нарастания воздействия сил сдвига; 2) при

телия. Установлено, что повышение скорости

уменьшении времени контакта тромбоцитов с

тока, а следовательно, увеличение напряжения

поверхностью прочные связи не успевают обра-

сдвига, увеличивало отложение тромбоцитов.

зовываться; 3) при увеличении скорости тока

Однако в этих условиях снижался рост тромба.

крови происходит интенсивное вымывание ак-

Возможные объяснения этому: 1) связи тромбо-

тивированных компонентов гемостаза из зоны

цитов с компонентами эндотелия недостаточно

реакции.

сильны, чтобы удержать их на поверхности по