1.7. Диагностика микозов кожи и ногтей

При наличии любого грибкового поражения кожи и ее придатков необходимо обязательное подтверждение диагноза лабораторными методами диагностики.

Важным этапом для осуществления качественной диагностики является правильный сбор, хранение и транспортировка патологического материала. Для диагностики микозов кожи и ногтей используют патологический материал в виде чешуек кожи, соскобов ногтей и пораженных волос. При поражениях кожи и ногтей забор материала осуществляют путем взятия соскоба с предварительно обработанного очага поражения 70% раствором этилового спирта. При поражение ногтевых пластин соскобы забирают из срединных и глубоких слоев ногтя, за исключением поверхностного поражения. Соскобленные чешуйки помещают в темную плотную бумагу и направляют в микологическую лабораторию. При поражении волос материал забирают эпиляционным пинцетом [1, 16, 23, 26, 145,

147, 170].

Лабораторную диагностику дерматомикозов можно подразделить на несколько этапов [ 24]:

1. Микроскопия патологического материала.

2. Культивирование на питательных средах.

3. Идентификация возбудителя из патологического материала.

4. Тест на перфорацию волос in vitro (при необходимости).

5. Тест на спаривание (+) и (-) штаммов одного вида анаморфного дерматомицета

(при возможности и необходимости) in vitro.

Микроскопия

В настоящее время существует множество методов прямой микроскопии для выявления микромицетов. Используется 10% раствор КОН, метиленовый синий, калькофлюор белый, альциановый синий, PAS-окрашивание.

Для диагностики дерматомикозов чаще используют 10 – 30% раствор КОН. Забранный материал помещают в вышеуказанный раствор для просветления образца на 5 – 10 минут при необходимости экспозиция удлиняется до 60 минут и производят микроскопию. Также в 30% раствор КОН добавляют флюорохром – калькофлюор белый и просматривают материал в люминисцентном микроскопе.

PAS-метод (periodic acid-Schiff) – широко применяется для окрашивания гистологических срезов. PAS-окрашивание осуществляют на свежем материале и применяют в случаях когда не удается обнаружить микромицеты в КОН- препаратах, хотя предполагали, что они должны находится в них. PAS-реакция является важнейшим методом диагностики тканевых форм грибковой инфекции.

Культуральная диагностика

Является важным этапом лабораторной диагностики грибковых инфекций, так как необходимо знать видовую принадлежность патогена. Выбор антимикотика и прогноз лечения напрямую зависят от вида и штамма гриба.

Известно множество питательных средств таких как: жидкая и агаризованная среда Сабуро с глюкозои, жидкое и агаризованное пивное неохмеленное сусло, картофельно-глюкозныи агар, агар Сабуро с левомицетином и циклогексимидом, агар Чапека-Докса, агар Христенсена, агаризованная среда для первичнои изоляции дерматомицетов (среда DTM – от англ. Dermatomycete test medium) и др.

Правильно отобранные образцы помещают на соответствующую питательную среду не менее чем в 20 точках и инкубируют в термостате при температуре от 25-26⁰С до 37⁰C в течение 2 – 3 недель до месяца [23].

При отрубевидном лишае в качестве дополнительного метода диагностики используют пробу с 5% раствором йода (выявление скрытого шелушения). При микозах волосистой части головы – осмотр с помощью лампы Вуда [26].

В последние годы внедряются в лабораторную практику молекулярные методы диагностики грибковых инфекций [42, 57], однако учитывая изменение спектра возбудителей дерматомикозов (увеличение доли дрожжевых грибов и

плесневых недерматомицетов) полностью заменить традиционные методы лабораторной диагностики микозов не предтавляется возможным.