4 курс / Акушерство и гинекология / Морозова_К_В_Полиморфизм_генов_ферментов_детоксикации,_антиоксидантной

внутриутробному инфицированию и, как следствие, к формированию различных пороков развития и потери беременности (72). В нашем исследовании пациентки основной группы указывали на наличие хронических воспалительных заболеваний внутренних и наружных половых органов значительно чаще, чем пациентки контрольной группы. Также среди инфекций, передающихся половым путем, в основной группе в анамнезе наблюдался чаще хламидиоз.

При сравнении фертильности у пациенток обеих групп установлено, что в основной группе наблюдалось превалирование числа беременностей, однако количество родов было значительно ниже. Также в основной группе превалировало число прервавшихся беременностей и случаев привычного невынашивания, что обусловлено критериями включения пациенток в группу. В контрольной же группе наоборот количество родов было приближено к числу беременностей, при полном отсутствии репродуктивных потерь, что также объясняется критериями отбора.

Терапия, направленная на пролонгирование беременности чаще назначалась пациенткам в основной группе, это связано с отягощенным течением беременности у женщин этой группы. Препараты для сохранения беременности с меньшей частотой, но назначались и пациенткам контрольной группы, что может объясняться современными подходами к ведению беременности врачами женских консультаций и назначением данной терапии даже в случае незначительных тянущих болей внизу живота при полном отсутствии симптомов угрозы прерывания беременности.

Подводя итог, можно утверждать, что по уровню заболеваемости группы оказались неоднородными. В нашем исследовании мы не ставили задачу установить конкретную причину репродуктивных потерь у пациенток основной группы, нашей целью было выявить генетические факторы предрасположенности к невынашиванию беременности, которые могут являться одновременно и факторами развития различной соматической патологии.

71

Глава 4. Результаты проведенных исследований.

4.1 Роль полиморфизма гена обмена катехоламинов (СОМТ) в течении и прогнозе беременности.

Стресс является эволюционно заложенным механизмом ответа организма на неблагоприятное воздействие извне (50). По данным современной литературы стресс возникает как при экстремальном, так и при обычном воздействии экзогенных и эндогенных факторов (50). Экстремальное воздействие на организм может протекать по двум временным критериям: кратковременный стресс и длительный стресс.

Стресс является важнейшим приспособительным механизмом, однако в условиях хронического длительного воздействия даже слабого дестабилизирующего фактора развивается истощение защитных ресурсов организма с нарушением функций всех органов и систем (13).

Среди агентов, вызывающих стресс, выделяют физиологические и психологических стрессоры (13, 50).

В1936 году Г. Селье впервые описал три стадии развития стресса: стадия тревоги, стадия резистентности и стадия истощения. При первой стадии в процесс вовлекается триада стресса: иммунная система, надпочечники и желудочно-кишечный тракт, происходит мобилизация защитных систем организма, и в зависимости от силы стрессового фактора организм либо справляется с возникшей угрозой, либо может погибнуть. Вторая стадия характеризуется адаптацией к стрессору, повышению всех защитных резервов стабилизацией организма, что способствует эффективной борьбе с негативным воздействием без значительного вреда для него (63).

Вслучае развития третьей стадии, именуемой истощением, в условиях длительного воздействия стресса, несмотря на повышенный уровень адаптивных процессов происходит постепенное истощение защитных резервов,

спостепенным нарушением функций организма вплоть до гибели (50, 63).

72

Основными активными веществами, отвечающими за адаптацию во время стресса, являются катехоламины. Они проявляют двойственные функции, являются гормонами, регулирующими все звенья обмена веществ в организме, а также играют роль нейромедиаторов в передаче сигнала между клетками

(49).

Являясь биогенным моноаминами, катехоламины осуществляют химическую регуляция межклеточных взаимодействий, активируя систему гипоталамус-гипофиз-надпочечники, обеспечивая протекание адаптивных реакций. К катехоламинам относятся адреналин, норадреналин и дофамин, синтез которых происходит преимущественно в мозговом веществе надпочечников по следующей схеме: тирозин - ДОФА - дофамин - норадреналин – адреналин. (13). Выработка катехоламинов является неспецифической приспособительной реакцией на изменение внутренней и окружающей среды. В условиях стресса эти вещества выбрасываются в кровь, что позволяет повысить выносливость и мобилизовать резервы организма путем изменения функционального состояния органов и повышения метаболизма в тканях (13).

Физиологическая активность катехоламинов обусловлена способностью связываться со специфическими восприимчивыми структурами в эффекторной клеткеадренорецепторами, потенцируя ответ в органах - мишенях (50). Существует 2 подвида рецепторов: α- и β- адренорецепторы. В зависимости от степени сродства катехоламинов к адренорецепторам разных типов различается и характер их биологической активности (50). Адреналин «гормон тревоги» взаимодействует с обоими видами рецепторов и вызывает сужение сосудов кожи и слизистых оболочек, скелетной мускулатуры, органов брюшной полости, однако на сосуды головного мозга действует как вазодилататор, менее выраженный прессорный эффект связан с возбуждением не только α1 и α2 -рецепторов, но и β2адренорецепторов сосудистой стенки. При взаимодействии с β2адренорецепторами также происходит расслабление скелетной мускулатуры, бронхов и кишечника. Напротив, норадреналин

73

обладает значительно большим прессорным и сосудосуживающим воздействием, приводя к повышению артериального давления. Среди функций катехоламинов следует выделить их способность связываться с тромбоцитами и белками плазмы, приводя к гиперкоагуляции, что в сочетании с сосудосуживающим эффектом при чрезмерном содержании катехоламинов в крови может сопровождаться нарушением трофики тканей и органов (13, 50).

Учитывая тесную взаимосвязь течения всех биохимических и физиологических процессов с механизмами наступления и течения беременности, следует отметить влияние катехоламинов на функциональное состояние миометрия (9).

Иннервация матки осуществляется путем взаимодействия симпатических и парасимпатических нервных волокон, оказывающих неодинаковое влияние на функциональное состояние миометрия, однако совместно реализующих главную задачу: сохранение либо прерывание беременности. Функционирование обеих подсистем подчиняется нервным центрам гипоталамуса и спинного мозга, располагающимся вблизи центра регуляции психосоматической функции, что объясняет их взаимное влияние друг на друга

(15).

Так, чрезмерное возбуждение психосоматического центра в результате психологическое напряжения, тревоги, хронического стресса, могут привести к дисбалансу между симпатической и парасимпатической нервной системой (13, 63).

Основными нейромедиаторами, отвечающими за передачу нервных импульсов в синапсах нервных волокон миометрия, являются катехоламины (9, 15). Характер воздействия определяется типом выделяемого медиатора, плотностью и типом расположения рецепторов в мышечных клетках миометрия. Норадреналин преимущественно воздействует на α- адренорецепторы, вызывая тем самым повышение возбудимости миометрия, усиление тонуса и сократительной активности матки (15). Наоборот, возбуждение β- адренорецепторов сопровождается токолизом, снижением

74

возбудимости миомерия, приводящего к расслаблению матки. Поскольку адреналин способен связываться с α- и с β- адренорецепторами, он может оказывать разнонаправленное воздействие на тонус матки (15). Сосудосуживающая функция катехоламинов может приводить к спазму сосудов матки, а в комплексе с гиперкоагуляцией в условиях гиперкатехоламинемии может сопровождаться нарушениями трофики, приводящей в конечном итоге к неполноценности инвазии трофобласта. Чрезмерный спазм сосудов матки приводит к нарушению инвазии спиральных артерий, что обуславливает формирование плацентарной недостаточности и в условиях дисбаланса вазоконстрикторов и вазодилататоров сопровождается развитием многих осложнений беременности вплоть до ее потери (9, 38).

В условиях современной окружающей среды организм беременной женщины находится под постоянным воздействием стрессоров различного происхождения. Чрезмерная психоэмоциональная и интелектуальная активность женщин, связанная с напряженной профессиональной деятельностью во время беременности, обуславливает формирование стойкого хронического стрессового фона (63). Социальные и экономические проблемы, неблагополучная обстановка в семье - все это приводит к хронизации стресса и реализации связанных с ним повреждающих действий на организм матери и

75

Стресс

Нарушение инвазии трофобласта, плацентарная недостаточность

Рис.11. Влияние стресса на течение беременности в зависимости от активности фермента катехол-о-метилтрансферазы

Фермент дикого типа СОМТ обеспечивает адекватную катализацию катехоламинов, в результате чего поддерживаются физиологические концентрации нейромедиаторов в организме. Вариантные аллели, контролирующие синтез менее активного/стабильного фермента, могут быть сопряжены с дисбалансом уровня катехоламинов, особенно в условиях их гиперпродукции (98, 102, 107) .

76

Нами выведена патогенетическая схема взаимосвязи биохимических перестроек организма под влиянием стресса, связанных с накоплением катехоламинов, с развитием патологии беременности (Рис.11).

Одним из полиморфных вариантов гена COMT, наиболее изученных и описанных в литературе является rs 4680 (G1947А), при котором происходит замена гуанина на аденин в 1947 положении, с заменой аминокислоты валина на метионин в структуре белка. Известно, что аллель G ассоциирован с более высокой активностью фермента катехол-О-метилтрансферазы, по сравнению с аллелем А (107).

При проведении исследования одной из основных задач, стоящих перед нами, являлось изучение описанного выше полиморфизма гена СОМТ, как фактора неполноценной биохимической защиты организма беременной женщины при чрезмерной выработке катехоламинов.

Согласно полученным данным, минорный аллель А в гомозиготном состоянии встречался у пациенток основной группы в 25 % случаев (n=37), в контрольной группе этот показатель оказался идентичным и составил 24,5 % (n=28), что не является статистически различным и приближено к общепопуляционным значениям для европеоидовоколо 30%.

Что касается гетерозиготного генотипа G/А, то в нашем исследовании он оказался наиболее часто встречающимся, что соответствует распределению в популяции - до 45%. Здесь также не было выявлено статистически значимой разницы между группами, среди пациенток с НБ гетерозиготы выявлены в 57,04 % (n= 85), против здоровых женщин, у которых этот показатель составил

42,47 % (n=48) (Рис. 12).

Наиболее интересные данные получены нами при сравнении частот встречаемости гомозиготного генотипа G/G, отвечающего за экспрессию фермента катехол-О-метилтрансферразы с полноценной активностью, что позволяет рассматривать данный генотип, как благоприятный (Рис. 12).

77

*Различия статистически достоверны, при р< 0,05.

Рис.12. Распределение генотипов rs 4680 (G1947А) гена COMT у пациенток основной и контрольной групп.

Так, в группе пациенток с репродуктивными потерями гомозигота G/G выявлена всего в 18 % случаев (n= 27), что оказалось почти в два раза ниже по сравнению со здоровыми женщинами, где аллель G в гомозиготном состоянии достигал 33% (n=37). Данная разница между группами была статистически достоверна: χ² =7,4, р=0,006 ( Рис. 12).

Таким образом, можно утверждать, что среди здоровых женщин благоприятный генотип G/G встречается достоверно чаще и может играть протективную роль, защищая организм в условиях гиперпродукции катехоламинов, поддерживая их концентрацию на физиологическом уровне.

Аллель А в гомозиготном состоянии можно соответственно рассматривать как рисковый аллель (доминантная модель).

При проведении статистического анализа распределения генотипов полиморфизма в зависимости от сроков беременности по некоторым исследуемым генам, нами был выявлен рубеж 10 недель, до и после которого происходило изменение частот встречаемости генотипов, что указывало на изменчивость влияния того или иного аллеля на течение беременности на разных сроках гестации. Поэтому, нам представлялось интересным поделить

78

основную группу на 2 подгруппы: с потерей беременности до 10 недель и после 10 недель гестации и провести сравнение выделенных подгрупп с общим контролем для интересующего нас полиморфного варианта.

В нашем исследовании мы провели сравнение двух подгрупп пациенток с невынашиванием беременности с целью установления изменения распределения генотипов относительно сроков гестации.

Выявлено, что среди пациенток с репродуктивными потерями на сроке до 10 недель генотип А/А встречался в 24,05 % (n=19) наблюдений, что совпадало с распределением в группе контроля - 24,4 % (n=28).

По частоте гетерозигот G/А также не наблюдалось существенной разницы, данный генотип выявлен у пациенток с потерей беременности до 10 недель в 55,7 % (n=44) случаев, в группе контроля этот показатель составил 42,47 % (n= 48), что достоверно не различалось.

Также разницы не выявлено и по аллелю G в гомозиготном состоянии, данный генотип наблюдался у 20,2% (n=19) пациенток с потерей беременности на сроке менее 10 недель, в контрольной группе показатель составил 33 % (n= 37).

Изменение частоты встречаемости генотипов на более ранних сроках беременности, по сравнению с общей основной группой пациенток с невынашиванием, может быть обусловлено тем, что на сроках гестации до 10 недель реализуются механизмы потери беременности, обусловленные грубыми генными мутациями самого плода.

Данные анализа частоты распределения генотипов в подгруппе пациенток с потерей беременности после 10 недель гестации приведены на (Рис.13).

На основании полученных результатов установлено, что гомозиготный генотип А/А в этой подгруппе встречался в 29% (n=26), что оказалось несколько выше, чем в группе общего контроля 24,4 % (n=28), и незначительно превышает результат по основной группе в целом, однако разница не являлась достоверной (Рис.13)

79

*Различия статистически достоверны, р< 0,05.

Рис.13 Распределение генотипов rs 4680 (А1947G) гена СОМТ у пациенток при потере беременности на сроке более 10 недель.

Гетерозиготный генотип G/А выявлен более чем у половины женщин с потерями беременности на сроке свыше 10 недель и составил 80% (n=52), у группы здоровых женщин этот показатель оказался на уровне 42,47 % (n= 48), однако показатели достоверно не отличались (Рис.13).

Разница между пациентками с невынашиванием на сроке более 10 недель и здоровыми женщинами по частоте распределения генотипа G/G является статистически значимой. В основной подгруппе этот показатель составил 13 % (n=12), тогда как в группе контроля генотип G/G наблюдался значительно чаще – у 33% (n=37) здоровых испытуемых, установлена достоверная разница: χ² =10,31, р=0,0013 (Рис. 21). Превалирование гомозигот G/G в группе здоровых женщин подтверждает протективную функцию носительства данного генотипа в сравнении с группой пациенток с репродуктивными потерями, где фенотипически благоприятный генотип встречался более чем в два раза реже. Снижение частоты носительства протективного аллеля G с увеличением срока беременности в группе с НБ может объясняться более значимой ролью фермента СОМТ для течения беременности после 10 недель гестации.

80