2.2.2. Бактериологическое исследование молока (секрета)
Бактериологическое исследование молока проводится для определения общей бактериальной загрязненности, выявления микроорганизмов, вызвавших заболевание молочной железы, определения чувствительности их к антимикробным препаратам, для оценки результатов лечения больных животных.
Правила отбора проб молока (секрета). Молоко (секрет) для бактериологического исследования отбирают в стерильные пробирки из долей вымени с соблюдением правил асептики. Для этого перед взятием пробы соски вымени и руки исследователя протирают ватным тампоном, смоченным 70- 50о этиловым или денатурированным спиртом, и надаивают в пробирки 5-10 мл альвеолярного молока (в конце дойки). При взятии пробы следят за тем, чтобы сосок не касался края пробирки. При повторном взятии пробы с целью подтверждения диагноза на мастит может быть использовано как цистернальное, так альвеолярное молоко. Пробирку с молоком (секретом) закрывают стерильной ватно-марлевой или резиновой пробкой и на этикетке записывают кличку или инвентарный номер коровы, долю вымени и ее состояние (здоровая, больная).
Правила доставки. Пробы молока после их отбора с сопроводительным документом доставляют в лабораторию в течение 3-4 ч. с момента взятия в специальных емкостях, обеспечивающих температуру не выше 8-10 оС или термосах со льдом.
Проведение исследований. Бактериологическое исследование молока (секрета) проводят сразу после доставки его в лабораторию. Оставшееся молоко хранят при температуре не выше 6°С.
Посев молока (секрета) проводят на мясопептонный агар с цитратной кровью крупного рогатого скота или дефибринированной кровью барана (рецепт 1) и дифференциально-диагностические, или элективные среды.
Для идентификации выросших культур микроорганизмов учитывают характер роста колоний и вид гемолиза на кровяном МПА, проводят микроскопию мазков, сделанных из одинаковых по морфологическим свойствам колоний и окрашенных по Грамму, изучают культурально-биохимические свойства.
2.2.3. Проба отстаивания молока
Из долей вымени молоко, давшее с одним из диагностических реактивов положительную или сомнительную реакцию, надаивают в отдельные пробирки в конце доения по 10-15 мл и выдерживают при температуре 4-8˚С в течение 16-18 ч, а затем просматривают и учитывают результат. Обращают внимание на цвет молока, толщину и характер сливок, наличие осадка.
Пробу отстаивания считают положительной при наличии осадка высотой 0,1 мм и больше, а также при появлении осадка до 0,1 мм с одновременным изменением цвета молока (водянистое) и характера сливок (слизистые, хлопьевидные, тягучие).
2.2.4. Постановка диагноза на субклинический мастит
Для того чтобы поставить диагноз на субклинический (скрытый) мастит, необходимо правильно классифицировать состояние «здоровья» молочной железы. Для его оценки используют данные анамнеза, клинического обследования организма и молочной железы коров, показатель быстрых маститных тестов, выполняемых с молоком и диагностическими реактивами непосредственно в хозяйствах, или подсчета СК, проводимого с помощью приборов, и результаты лабораторного исследования молока (секрета вымени) и крови.
В нашей стране признанной является схема оценки состояния молочной железы у коров, представленная в таблице 2.
2.2.5. Дифференциальная диагностика субклинического мастита
В условиях производства ставят предварительный диагноз на субклинический мастит путем проведения массового исследования коров с целью выявления в молоке повышенного (более 500 000 в 1 мл) количества СК. Повышенный уровень СК определяют с помощью диагностических реактивов (быстрый маститный тест) масттеста, мастидина, димаста, маститета Воронежского, сульфонола и др. или подсчитывают с помощью прибора «Фоссоматик» в молоке из удоя каждой доли вымени, разового, суточного удоя коровы, общего удоя стада.
Исследование молока из каждой доли вымени позволяет сразу определить подозрительную в поражении четверть. При исследовании молока разового или суточного удоя выявляют коров с раздражением вымени и скрытым маститом, молоко которых в последующем исследуют из каждой доли вымени для обнаружения пораженной четверти.
По показателю числа СК в сборном молоке определяют относительное количество больных маститом коров в стаде. По данным ученых Корнельского и Пнсильванского университетов США, при числе СК в сборном молоке до 100 тыс./мл количество больных маститом коров в стаде составляет 5-6%, до 200 тыс./мл – 12-17%, до 300 тыс./мл – 33-34%, до 400 тыс./мл – 38-45%, до 500 тыс./мл – 51-58%, до 600 тыс./мл – 61-79%. В зависимости от уровня заболеваемости коров маститом в стаде в хозяйствах проводят соответствующие мероприятия.
Окончательную оценку состояния «здоровья» молочной железы коров проводят по результатам дополнительного лабораторного исследования молока (секрета).
Для дифференциации субклинического мастита от раздражения вымени разработана методика повторного исследования с диагностическим реактивом секрета доли вымени, давшего положительную или сомнительную реакцию при первичном исследовании. При условии устранения причин, которые привели к повышению уровня СК в молочной железе (нарушение технологии и правил машинного доения, завышенные вакуум и частота пульсации, передержка стаканов на выдоенном вымени и др.), в долях, где было раздражение реакция молока с реактивом становится отрицательной.
При клинических формах мастита диагноз ставится согласно классификации А.П. Студенцова с учетом 5 классических признаков воспаления (болезненность, покраснение, повышение местной температуры, отечность и нарушение функции), которые обнаруживаются как со стороны пораженной доли, так и ее секрета.
При раздражении вымени и субклиническом мастите присутствует только один клиссический признак воспаления – нарушение функции, что проявляется снижением выработки молока в пораженной доле вымени на 10,5 и 36,4% соответственно.