2.2. Лабораторные методы исследования молока (секрета вымени)

Диагностику субклинического мастита у коров осуществляют с помощью лабораторных методов исследования молока (секрета) по выявлению изменений отдельных его компонентов. Они представлены в виде патологического экссудата серозного, катарального, гнойного, фибринозного, геморрагического или смешанного характера, образующегося в небольшом количестве в очаге воспаления, разбавленного в большом объеме нормального молока этой же доли вымени и не обнаруживаемого при визуальной оценке.

Для постановки диагноза на субклинический мастит проводят цитологическое, бактериологическое исследования, ставят пробу отстаивания молока.

2.2.1. Цитологические методы исследования

В молоке содержатся клетки крови, соединительной ткани и десквамированный эпителий молочной железы, объединенные в общее название СК. Количество СК подвержено значительным колебаниям и является одним из основных показателей функционального состояния вымени. Основная роль, которую выполняют клетки крови (лейкоциты) в молочной железе, – это фагоцитоз, и их увеличение в молоке связано с раздражением вымени или с воспалением тканей.

Однако увеличение числа СК может происходить и под действием различных физиологических факторов: в молозивный период, в конце лактации, во время течки, с возрастом животного.

Для дифференциации физиологического и патологического увеличения числа СК необходимо подсчитывать их в молоке из каждой доли вымени в отдельности, так как воспалительный процесс, как правило, возникает в одной, двух, реже трех долях.

Согласно требованиям Международной Молочной Федерации в молоке здоровых коров количество СК не должно превышать 500 000 в 1 мл и согласно Европейскому стандарту в сборном молоке не должно быть более 400 000 CК в 1 мл.

Подсчет СК в молоке проводят прямыми и косвенными методами.

а) Прямые методы подсчета СК

К ним относят метод подсчета на стекле по Прэскотту-Бриду, камерные методы по Н.М. Хилькевичу, И.И. Архангельскому и др., И.И. Архангельскому и др. в модификации В.И. Слободяника (1987), подсчета с помощью электронного прибора «Фоссоматик», других электронных счетчиков.

б) Косвенные методы определения СК

Косвенно СК определяют с помощью диагностических реактивов: масттеста, мастидина, димастина, мастоприма, пробы Уайт сайда, мастатеста Воронежского, сульфанола и других, содержащих поверхностно-активные вещества (ПАВ). ПАВ разрушают мембраны клеток, высвобождают из ядер ДНК и вступают с ней в реакцию, образуя желе. По степени образования желеобразного сгустка косвенно судят о количестве СК в молоке.

Реакцию молока с диагностическим реактивом проводят на молочно-контрольных пластинках ПМК-1 или ПМК-2, имеющих 4 луночки соответственно долям вымени коровы.

Определение СК с помощью диагностических реактивов проводят в молоке из отдельных долей вымени или удоя коровы для диагностики субклинического мастита и пробах сборного молока для определения в нем примеси анормального.

Для диагностики мастита по молоку из каждой доли вымени используют диагностические реактивы малой концентрации: масттест 2%, мастидин 2%, димастин 5%, мастоприм 1%, в пробе Уайт сайда 4% раствор едкого натра, мастатест Воронежский 2%, сульфанол 2,5%.

Для диагностики мастита у коров по молоку разового или суточного удоя используют 10% раствор димастидина и 20% димастина, 10% – мастатеста Воронежского, 20% – сульфанола, а для определения примеси анормального молока в сборном – 2,5% раствор мастоприма и маститодиагност (реактив Загаевского).

Наличие в составе масттеста и мастидина, кроме ПАВ, индикатора бромкрезолпурина, а в димастине фенолового красного, позволяет судить по изменению цвета смеси о величине рН исследуемого молока.

При использовании этих реактивов для диагностики субклинического мастита основным диагностическим признаком является образование желеобразного сгустка, а изменение цвета – смеси ориентирующим.