Власні дослідження

Епізоотична ситуація щодо сказу в Україні, має тенденцію до постійної зміни. При несвоєчасно проведених щепленнях, котрі здійснюються після укусу інфікованої тварини, хвороба закінчується смертю. Щорічно в Україні реєструється понад 100 тисяч осіб, котрі звернулись у медичні заклади з приводу укусів тваринами, з яких 60 % отримують направлення за показниками підозри інфікування сказом.

Резервуар і джерела інфекції - інфіковані тварини (лисиці, вовки, собаки, кішки, кажани, гризуни, коні, дрібна і велика рогата худоба і ін.). Вірус виділяється в зовнішнє середовище із слиною, яка стає заразливою за 8-10 днів до початку захворювання.

Труп загиблої тварини направляють повністю. Трупи тварин розкривають з дотриманням запобіжних засобів: у гумових рукавичках, перевірених на цілісність, окулярах-консервах або масках на все обличчя з целофану або органічного скла. Черепну порожнину розкривають звичайним способом, але з дотриманням правил асептики. Відбирають шматочоки (0,5-1 см) з різних відділів: кора великих півкуль, мозочка, довгастого мозку і аммонового рогу. З аммонового рогу і мозочка вирізують невеликі шматочки завтовшки 3- 4 см і поміщають їх у фіксуючу рідину. Для біологічної проби шматочки мозку поміщають в стерильну банку, що щільно закривається, з нерозве-деним нейтральним стерильним гліцерином або розведенням навпіл фізіологічним розчином, яку тримають в льоду.

Реакцію преципітації в агарі при діагностиці сказу застосовують для виявлення специфічного рабічного антигена в неконсервованому головному мозку тварин, померлих від вуличного сказу, або від тварин, на яких ставили біопробу.

Постановка реакції. На знежирене, злегка підігріте (над полум'ям) предметне скло наносять краплю розплавленого агару, роблять мазок (на кшталт мазка крові) і на застиглий агар наливають зверху ще 2,5 мл середовища, яке рівномірно розподіляють по поверхні скла шаром завтовшки приблизно 2 мм (ця частина роботи виконується на горизонтальній поверхні). Потім стекла після застигання агару попарно вносять до чашок Петрі, куди з двох сторін поміщає шматочки вати, змочена водою, а стекла з агаром зберігають у вологому ексикаторі над шаром води для запобігання висиханню агару. Стекла з агаром використовують протягом 7 днів після приготування.

Лунки в агарі пробивають тонкостінною металевою (скляною) трубочкою з внутрішнім діаметром 4-5,6 мм (можна використовувати гільзу патрона дрібнокаліберної рушниці), розташовуючи їх згідно трафарету.

Трафарет заздалегідь викреслюють на папері і поміщають під скло. Пижі, що утворилися, витягують гострим кінцем учнівського пера. .Луночки не оплавляють. Необхідно стежити за тим щоб агаровий гель не відшаровувався від скла, оскільки в в цьому випадку антиген і антитіла підтікають під шар агару і лінії преципітації може не утворитися.

При дослідженні головного мозку великої рогатої худоби, коней, верблюдів, собак, лисиць, кроликів і інших тварин необхідно перевіряти в реакції наступні відділи мозку: кору півкулі лівої і правої сторони (А, Б), аммонові роги - лівий і правий (С, Д), мозочок (Е) і довгастий мозок (Ж). Досліджуючи мозок щурів, ховрахів, морських свинок, хом'яків і ін., рекомендується перевіряти в реакції три яких-небудь відділи. Від мишей досліджують весь головний мозок, що гомогенізує до пастоподібної консистенції.

Ямочки, позначені цифрами 1, 2, 3, 4, заповнюють глобуліном, що преципітує, в розведеннях 1:2, 1:4, 1:8; 1:10 (від вихідного розведення) на фізіологічному розчині.

Контролі з позитивними і негативними антигенами ставляться одночасно, але кожен на окремому склі, в тому ж агарі, по тому ж трафарету. При цьому досить заповнити дві лунки позитивним і негативним антигенами, а лунки довкола - глобуліном у вказаних розведеннях.

Після поміщення в лунки досліджуваної мозкової маси, контрольних позитивного і негативного антигенів і глобуліну у відповідних розведеннях наочні стекла поміщають в чашки Петрі з шматочками вологої вати або у вологий ексикатор і ставлять в термостат при 37-38° на 6 годин. Потім чашки залишають при кімнатній температурі ще на 18 годин.

Реакцію враховують через 3, 6 і 24 години після постановки. Часто позитивна реакція відмічається вже через 2,5-3 години ( + ) і відповідає утворення однієї і рідше 2-3 лінії преципітації між найближчими лунками, що містять антиген і глобулін. Остаточно реакцію враховують через 24 години. Лінії преципітації можуть утворитися довкола лунки з антигеном зі всіма розведеннями глобуліну і незрідка з досліджуваним матеріалом зі всіх відділів мозку; у інших випадках реакція буває позитивною з матеріалом лише з деяких відділів мозку і з окремими розведеннями глобуліну. Це пояснюється вмістом неоднакової кількості антигена в різних ділянках досліджуваного мозку. Для постановки позитивного діагнозу досить утворення лінії преципітації з матеріалом з одного відділу головного мозку з одним розведенням глобуліну. Лінії преципітації, що утворилися, видимі візуально при просвічуванні стекол освітлювачем від низу до верху під кутом приблизний 45°.

При позитивній реакції преципітації в прозорому агарі між лунками з глобуліном і антигеном можуть утворитися одна, дві і дуже рідко три паралельно розташовані лінії преципітації. При негативних свідченнях реакції преципітації проводять біопробу на 5-10 білих мишах або двох морських свинках шляхом інтрацеребрального їх зараження. За зараженими тваринами спостерігають не менше 1,/2 місяців.

Полеглих після зараження тварин (миші, морські свинки) обстежують за допомогою реакції преципітації і залежно від її свідчень ставлять остаточний діагноз.

Для постановки реакції преципітації можна брати головний мозок тварин, що зберігається протягом місяця при кімнатній температурі.

Нервова тканина, консервована гліцерином, формаліном, ацетоном або спиртом, для дослідження за допомогою реакції преципітації непридатна.

Реакція преципітації є експресним методом діагностики, що дозволяє протягом доби поставити діагноз на сказ більш ніж в 95% випадків за матеріалом, узятим від полеглих тварин, що завжди може бути підтверджене подальшою біопробою.

Діагностувати сказ при допомозі РДП можна незалежно від наявності або відсутності в патологічному матеріалі телець Бабеша-Негрі.

Біопроба на кроликах. Беруть чотирьох кроликів вагою не менше 1,5 кг кожен. Двох кроликів заражають інтрацеребрально (по 0,2 мл) і два - внутрішньом'язово в області стегна (по 0,2мл). При позитивному результаті кролики захворюють через 16- 21 день. Сказ у кроликів протікає в тихій, паралітичній формі із смертельним результатом. У полеглих тварин витягують головний мозок і подальше дослідження проводять так само, як і при зараженні мишей. Спостерігають за кроликами 45-50 днів. Після закінчення зазначеного терміну їх знищують.

Етіотропна терапія не розроблена. Застосовують заходи і засоби, що полегшують стан хворого

Профілактичні заходи. Включають систематичну планову боротьбу із сказом серед тварин на основі масових запобіжних щеплень, знищення скажених і бродячих собак, правильний вміст домашніх тварин і кішок, контроль за перевезеннями домашніх тварин як в масштабах країни, так і на міжнародному рівні. Порядок вмісту, реєстрації і обліку собак і кішок в населених пунктах визначає місцева адміністрація [5].