Билет 4

2. Третичная структура — пространственное строение полипептидной цепи (набор пространственных координат составляющих белок атомов). Структурно состоит из элементов вторичной структуры, стабилизированных различными типами взаимодействий, в которых гидрофобные взаимодействия играют важнейшую роль. В стабилизации третичной структуры принимают участие:

• ковалентные связи (между двумя остатками цистеина — дисульфидные мостики);

• ионные связи между противоположно заряженными боковыми группами аминокислотных остатков;

• водородные связи;

• гидрофильно-гидрофобные взаимодействия. При взаимодействии с окружающими молекулами воды белковая молекула «стремится» свернуться так, чтобы неполярные боковые группы аминокислот оказались изолированы от водного раствора; на поверхности молекулы оказываются полярные гидрофильные боковые группы.

Дисульфидная связь возникает за счет сульфгидридных ( тиоловых) групп цистерна. Соединение, получается в результате замыкания дисульфидной связи между двумя молекулами свободного цистеина, называют цистином:

CH2 – S – S – CH2

׀ ׀

H2N – CH2 – COOH H2N-CH -COOH

Образование дисульфидных связей приводит к тому, что удаленные друг от друга области пептида сближаются и фиксируются. При действии восстановителей дисульфидные связи легко разрушаются с образованием SH-групп. Дисульфидные связи имеются во многих белках, чаще в секретируемых, но не во всех белках.

3. Денатурация белка — разрушение сил (связей), стабилизирующих

четвертичную, третичную и вторичную структуры, приводящее к дезориентации

конфигурации белковой молекулы и сопровождаемое изменением растворимости,

вязкости, химической активности, характера рассеивания рентгеновских лучей,

снижением или полной потерей биологической функции.

Различают физические (температура, давление, механическое воздействие,

ультразвуковое и ионизирующее излучения) и химические (тяжелые металлы,

кислоты, щелочи, органические растворители, алкалоиды) факторы, вызывающие

денатурацию.

4. Осаждение белков нагреванием

В пробирку вносят 2 мл раствора яичного белка и нагревают на кипящей водяной бане. Наблюдают образование осадка (свертывание белка). Чтобы сравнить зависимость осаждения белков от концентрации водородных ионов, в пять пробирок помещают по 5 мл раствора яичного белка. Нейтральный раствор белка в первой пробирке нагревают до кипения, он мутнеет, наблюдается опалесценция, обусловленная разрушением гидратной оболочки вокруг молекулы белка, и увеличение белковых частиц. Но мицеллы белка несут заряд и потому остаются в растворе, не попадая в осадок. Раствор во второй пробирке нагревают до кипения, вливают 1 мл раствора уксусной кислоты до слабокислой реакции. Через некоторое время белок выпадает в осадок. В этих условиях частицы теряют заряд, потому что значение pH среды близко к изоэлектрическому состоянию. В третью пробирку вносят 3 мл раствора уксусной кислоты для создания кислой реакции среды. При кипячении раствора осадок не образуется, так как молекулы белка приобретают положительный заряд, что повышает их устойчивость. В четвертую пробирку добавляют 5 мл раствора уксусной кислоты, 2 мл насыщенного раствора хлорида натрия и нагревают. Выпадает белый осадок. Его образование обусловлено тем, что белок при взаимодействии с ионами хлорида натрия теряет свой заряд. В пятую пробирку вносят 2 мл раствора гидроксида натрия для создания щелочной среды. При кипячении жидкости осадок не образуется, так как в щелочной среде увеличивается отрицательный заряд белка.

5. Ц-20%. Ц=Г, => Г- 20% . Ц+Г+А+Т=100% . 100- 40=60%. А+Т= 60%. 60/2=30%. Ответ: Аденин составляет 30%.